[發明專利]一種黃連木組織培養褐化的方法

在審

• 申請號: 201711254428.9
• 申請日: 2017-11-22
• 公開（公告）號: CN109804922A
• 公開（公告）日: 2019-05-28
• 發明（設計）人: 賈立偉;趙燦;胡冬杰;朵慶同;喬星;梁宇
• 申請（專利權）人: 保定綠視野林業發展有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種防止黃連木組織培養褐化的方法，將遮光處理24～48h后的幼嫩莖段浸泡在0.5～1.0wt‰的冰醋酸，1.0～1.5wt‰的食鹽，0.5～1.0wt‰的山梨酸鉀與水混合制得溶液1h。本發明通過控制接種材料前處理，能夠顯著降低黃連木外植體的褐變率以及提高其成活率，操作簡便，抑制褐化效果較好，為黃連木組織培養提供技術依托，為實現黃連木的快速繁育，為生產提供大量優質種苗。

技術領域

本發明屬農林領域的植物組織培養技術，具體涉及一種防止黃連木組織培養褐化的方法。

背景技術

黃連木(Pistacia chinensis Bunge)，漆樹科，雌雄異株。又名楷木、楷樹、藥樹、藥木、黃連茶等。黃連木是一種多年生木本油料植物，也是阿月渾子良好的砧木樹種。籽播育苗是黃連木的主要育苗方法，但其種子屬深休眠類型。此外，由于黃連木種子外被蠟質，直接播種發芽比較困難。在沙藏前必須對種子進行脫蠟處理。運用組織培養技術是建立黃連木無性快繁的重要手段。莖段是植物組培過程中常用的外植體之一，莖段組培具有繁殖速度快、變異系數較低等優點。而黃連木在組培快繁過程中外植體存在著易褐化死亡的問題，因此如何克服褐變成為其組培快繁成功與否的關鍵。

發明內容

本發明的目的是提供一種降低黃連木褐化的方法，包括如下步驟：

(1)在剪取黃連木植株嫩莖前，將植株進行遮光處理24～48h；

(2)將0.5～1.0wt‰的冰醋酸，1.0～1.5wt‰的食鹽，0.5～1.0wt‰的山梨酸鉀與水混合制得溶液，將步驟(1)材料在上述溶液中浸泡1h左右，自來水沖洗2～3遍；

(3)將步驟(2)中材料在超凈工作臺上用75％的酒精進行表面消毒30s，無菌水沖洗2～3次；然后用0.1％的氯化汞溶液處理10min，最后再用無菌水沖洗5～6次。將消毒后的莖段切成長度為1cm左右(帶1個腋芽)的小段，接種到初代培養基中，初代培養基為WPM+6-BA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L，PH6.0。

(4)將步驟(3)中接種好的材料置于22℃～25℃，光照為2500lx～2700lx下培養20天。

由于采用了上述技術方案，本發明與現有技術相比，雖然該技術采用的殺菌劑為常用殺菌劑，但本發明方法通過化學與物理方法相結合的方式抑制黃連木褐化，能夠顯著降低黃連木外植體的褐變率，提高其成活率，操作簡便，抑制褐化效果較好，為黃連木組織培養提供技術依托。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步詳述：

實施例1

(1)在剪取黃連木植株嫩莖前，將植株進行遮光處理24h；

(2)將0.5wt‰的冰醋酸，1.0wt‰的食鹽，0.5wt‰的山梨酸鉀與水混合制得溶液，將步驟(1)材料在上述溶液中浸泡1h左右，自來水沖洗2～3遍；

(3)將步驟(2)中材料在超凈工作臺上用75％的酒精進行表面消毒30s，無菌水沖洗2～3次；然后用0.1％的氯化汞溶液處理10min，最后再用無菌水沖洗5～6次。將消毒后的莖段切成長度為1cm左右(帶1個腋芽)的小段，接種到初代培養基中，初代培養基為WPM+6-BA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L，PH6.0。

(4)將步驟(3)中接種好的材料置于22℃～25℃，光照為2500lx～2700lx下培養20天。

本實施例黃連木褐化率56％，幼苗成活率為92％。

實施例2

(1)在剪取黃連木植株嫩莖前，將植株進行遮光處理36h；