[發(fā)明專利]肺癌診斷標(biāo)記物microRNA-4317及在藥物和診斷試劑盒中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711252465.6
• 申請日: 2017-12-01
• 公開（公告）號: CN107881237B
• 公開（公告）日: 2020-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫國貴;胡萬寧
• 申請（專利權(quán)）人: 唐山市人民醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;A61K31/7105;A61P35/00
• 代理公司: 唐山永和專利商標(biāo)事務(wù)所 13103
• 代理人: 張?jiān)坪?/td>

本發(fā)明屬于分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，公開了一組用于非小細(xì)胞肺癌發(fā)生轉(zhuǎn)移、預(yù)后或靶向治療的分子標(biāo)記物microRNA?4317。本發(fā)明進(jìn)一步公開了所述分子標(biāo)記物在制備非小細(xì)胞肺癌發(fā)生轉(zhuǎn)移、預(yù)后或靶向治療診斷試劑或試劑盒中的應(yīng)用。本發(fā)明還公開了microRNA?4317在制備具有抑制腫瘤藥物中的應(yīng)用和microRNA?4317的基因表達(dá)情況在制備具有抑制腫瘤預(yù)后或靶向治療藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明利用分子生物學(xué)技術(shù)，能夠有效地進(jìn)行分子水平檢測來判斷非小細(xì)胞肺癌患者發(fā)生轉(zhuǎn)移、預(yù)后及靶向治療的標(biāo)志，進(jìn)而為個(gè)體化治療這些疾病提供便利。同時(shí)對后續(xù)臨床研究的開展具有重要的指導(dǎo)意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，涉及一組標(biāo)志基因microRNA-4317作為非小細(xì)胞肺癌診斷標(biāo)記物及在藥物和診斷試劑盒中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

肺癌一直是最危險(xiǎn)的惡性腫瘤之一,其高發(fā)病率和高病死率是導(dǎo)致當(dāng)今國內(nèi)乃至世界范圍內(nèi)癌癥致死的主要原因。據(jù)病理類型將肺癌主要分為兩大類：一類是小細(xì)胞肺癌，約占肺癌比例的15％；另一類是非小細(xì)胞肺癌約占85％。雖然針對肺癌的研究方面有一定進(jìn)展,包括肺癌患者的早期診斷、術(shù)前輔助化療、放療甚至靶向治療的應(yīng)用,但肺癌發(fā)病隱匿，肺癌患者就診時(shí)大多數(shù)已屬于中晚期，錯(cuò)過了最佳治療時(shí)機(jī)，加上缺乏敏感、特異、有效的診斷和治療方法，肺癌患者總的5年生存率仍低至15％，即便就診時(shí)為早期，但因復(fù)發(fā)率很高，治療效果也不佳。據(jù)統(tǒng)計(jì)，每年全球因肺癌致死的患者超過100萬,并且以每年120萬的新發(fā)肺癌病例遞增，對人類健康和生命造成嚴(yán)重威脅。在我國的大部分地區(qū)，肺癌的發(fā)病率和死亡率呈持續(xù)上升趨勢,男女肺癌發(fā)病率和死亡率居各類癌癥榜首，若不采取相應(yīng)的措施加以控制，到2025年我國預(yù)計(jì)將成為全球第一肺癌大國。因此探索有效地診斷、治療以及預(yù)防肺癌的方法尤為重要。

利用分子生物學(xué)技術(shù)，能夠有效地進(jìn)行分子水平檢測來判斷惡性腫瘤患者發(fā)生轉(zhuǎn)移、預(yù)后及靶向治療的標(biāo)志。進(jìn)而為個(gè)體化治療這些疾病提供便利。

MicroRNA是長約19-22個(gè)核苷酸的小片段單鏈非編碼RNA。它通過有缺陷的堿基配對綁定其靶基因的3’非翻譯區(qū)的互補(bǔ)序列來控制基因表達(dá)，從而使靶基因在轉(zhuǎn)錄或者翻譯水平表達(dá)下調(diào)。近來microRNA成為從生長發(fā)育到癌癥等很多病理生理過程的重要和革命性的保守調(diào)節(jié)因素。在不同的惡性腫瘤中，同一microRNA的作用可能不同。一個(gè)microRNA可以有很多屬于不同通路的靶基因，而一個(gè)基因可以被幾個(gè)microRNA調(diào)控。科學(xué)家發(fā)展技術(shù)來識別與腫瘤分期和患者預(yù)后相關(guān)的特異的基因表達(dá)標(biāo)記，以改善預(yù)后和治療。人們使用全面轉(zhuǎn)錄研究來識別以基因表達(dá)為基礎(chǔ)的預(yù)后標(biāo)識，但是，目前為止無一能應(yīng)用于臨床。與經(jīng)典的mRNA表達(dá)譜相比，microRNA腫瘤表達(dá)譜似乎能夠更準(zhǔn)確地確定腫瘤亞型的分類。越來越多的證據(jù)支持實(shí)體腫瘤有特異的microRNA標(biāo)記。與此同時(shí)，人們發(fā)現(xiàn)越來越多的microRNA的靶基因在肺癌發(fā)生中起重要作用，例如let-7、miR-34家族和miR-17-92簇。目前，科學(xué)家對microRNA的靶基因的識別仍然有限。在分子框架中，成熟microRNA帶電后成為microRNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體(miRISC)。該復(fù)合體含有Argonaute家族(一類龐大的蛋白質(zhì)家族)，與通常位于靶基因3’端非翻譯區(qū)的互補(bǔ)位點(diǎn)反應(yīng)。目前的模型認(rèn)為microRNA和其靶基因的反應(yīng)起源于位于microRNA的5’端的一段被稱為“種子序列”的6至8個(gè)核苷酸短片段。MicroRNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體能夠?qū)谢蛟倥渲贸商貏e間隔，在其中處理翻譯阻滯和mRNA衰變。許多研究證實(shí)了microRNA誘導(dǎo)的mRNA失穩(wěn)。聯(lián)合計(jì)算預(yù)測，mRNA表達(dá)譜的測量代表了識別功能microRNA-靶關(guān)系的有效方法。在非小細(xì)胞肺癌中，許多不同的microRNA調(diào)節(jié)異常，可能有致癌或抑癌作用，并預(yù)測預(yù)后。識別能夠預(yù)測肺癌患者預(yù)后的microRNA是一項(xiàng)重要發(fā)現(xiàn)，這表明microRNA可能在腫瘤進(jìn)展中起重要作用。現(xiàn)行的臨床病理分期在預(yù)測患者腦轉(zhuǎn)移上有其局限性。具有相似臨床病理特點(diǎn)或者相同分期的肺癌患者的轉(zhuǎn)移發(fā)生和預(yù)后可能明顯不同。分子標(biāo)記物可以幫助醫(yī)生鑒別高危患者，以便給予患者個(gè)體化治療，從而改善生存。