[發明專利]一種利用松花粉粕制備抗氧化松花粉肽的方法

有效

• 申請號: 201711248182.4
• 申請日: 2017-12-01
• 公開（公告）號: CN107988299B
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發明（設計）人: 尹利端;王桐;鞠東;徐宏楠;楊長軍;仲米存;孫海軍
• 申請（專利權）人: 煙臺新時代健康產業有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/14
• 代理公司: 煙臺上禾知識產權代理事務所(普通合伙) 37234
• 代理人: 劉志毅

1.一種利用松花粉粕制備抗氧化松花粉肽的方法，其特征在于，步驟如下：

(1)將松花粉粕用粉碎機粉碎，按照1:(10-15)(w:v)的比例加入乙醇，在60℃水浴中攪拌提取1-3h，離心10-20min，收集沉淀在自然通風條件下靜置18-24h，加水配制成4-8wt％的松花粉粕溶液；

(2)取步驟(1)的松花粉粕溶液用堿性溶液調節pH為11.5，在60℃水浴中攪拌提取1-3h，離心10-20min，收集上清液；上清液用酸性溶液調節pH為4.5-5.5，離心10-20min，收集沉淀，加水配制成2-4wt％的松花粉蛋白分散液，并調節pH為7.0-8.0，得到松花粉分離蛋白溶液；

(3)取步驟(2)的松花粉分離蛋白溶液通過堿性溶液調節pH為8.0-10.0，然后加入蛋白酶1000-5000U/g，在50-60℃水浴中水解1-6h，保持溫度和pH恒定，當水解度達到7.8-24.5％時停止酶解，得到松花粉蛋白酶解液；

(4)取步驟(3)的松花粉蛋白酶解液于85-100℃水浴滅活蛋白酶5-15min，冷卻至20-25℃后，離心10-20min，收集上清液，經超濾膜進行超濾，得到松花粉肽超濾液；

(5)將步驟(4)的松花粉肽超濾液進行減壓蒸發濃縮和真空冷凍干燥，得到抗氧化松花粉肽產品；

其中，步驟(4)中所述的超濾膜截留分子量小于10000Da；

其中，步驟(3)中所述的蛋白酶為胰酶。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中所述的乙醇濃度為80wt％。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)(2)(4)中所述的離心轉速為2000-4000r/min。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)中所述的水解在震蕩狀態下進行。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的堿性溶液為2-5wt％氫氧化鈉溶液；所述的酸性溶液為2-5wt％鹽酸溶液。