[發(fā)明專利]一種核酸適配體及其在識別、檢測溶藻弧菌中的應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201711246574.7 | 申請日: | 2017-12-01 |
| 公開(公告)號: | CN107937404B | 公開(公告)日: | 2020-12-08 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 李鵬飛;秦啟偉;余慶;陳波 | 申請(專利權(quán))人: | 廣西科學(xué)院 |
| 主分類號: | C12N15/115 | 分類號: | C12N15/115;C12N15/10;G01N33/569 |
| 代理公司: | 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 44202 | 代理人: | 肖宇揚;付靜 |
| 地址: | 530007 廣西壯*** | 國省代碼: | 廣西;45 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 核酸 適配體 及其 識別 檢測 弧菌 中的 應(yīng)用 | ||
1.一種ssDNA核酸適配體,其特征在于,所述ssDNA核酸適配體的核苷酸序列為5’-TTTCTTCTATTCGCGATCTCATACAACTTACTTATCTCATTTCTTTACC-3’。
2.一種ssDNA核酸適配體,其特征在于,所述ssDNA核酸適配體的核苷酸序列為5’-GACGCTTACTCAGGTGTGACTCGTTTCTTCTATTCGCGATCTCATACAACTTACTTATCTCATTTCTTTACC-CGAAGGACGCAGATGAAGTCTC-3’。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的ssDNA核酸適配體,其特征在于,所述ssDNA核酸適配體的核苷酸序列兩端結(jié)合有標(biāo)記物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的ssDNA核酸適配體,其特征在于,所述標(biāo)記物選自生物素、酶、發(fā)光基團中的一種或多種。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的ssDNA核酸適配體,其特征在于,所述發(fā)光基團選自異硫氰酸熒光素或羧基四甲基羅丹明。
6.一種應(yīng)用如權(quán)利要求1或2所述ssDNA核酸適配體的ELISA檢測方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟1:對ssDNA核酸適配體進行生物素標(biāo)記;
步驟2:取待測樣品1-100mg與步驟1所得濃度為100-200nM的ssDNA核酸適配體混合,并在冰上孵育結(jié)合20-40min;待孵育結(jié)合后,清洗待測樣品,并加入100-200μl由辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素,在冰上再次進行孵育結(jié)合10-40min,孵育結(jié)合后用PBS溶液清洗待測樣品,并加入辣根過氧化物酶顯色試劑盒中進行TMB顯色液顯色,使用酶標(biāo)儀讀取待測樣品在450nm處的吸光值并記錄結(jié)果,根據(jù)吸光值的變化檢測待測樣品中是否含有溶藻弧菌;
所述應(yīng)用不包括在疾病診斷中的應(yīng)用。
7.如權(quán)利要求1或2所述ssDNA核酸適配體在檢測溶藻弧菌中的用途;
所述用途不包括在疾病診斷中的用途。
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