[發明專利]來自Nephilengys Cruentata蜘蛛的網的蛋白

有效

• 申請號: 201711245428.2
• 申請日: 2008-03-13
• 公開（公告）號: CN108218972B
• 公開（公告）日: 2021-10-15
• 發明（設計）人: 埃利彼奧·萊奧波爾多·雷?！し坡?/a>;納塔莉亞·克里斯蒂娜·維爾扎·費里拉;喬瓦尼·羅得里格斯·維亞娜;費利佩·羅得里格斯·達·席爾瓦;弗朗西斯科·約賽·利瑪·阿拉岡;魯伊茲·艾伯托·科爾納格;艾倫·卡瓦略·安德拉德;丹尼拉·馬蒂亞斯·德·卡瓦略·比頓科特;彼得羅·伊斯瑪艾爾·達·席爾瓦·朱尼爾;貝圖里亞·德·莫拉伊斯·蘇托;路易薩·德·莫拉埃斯·馬德拉;保羅·凱撒·莫塔
• 申請（專利權）人: 巴西農牧研究企業;巴西利亞大學基金會
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C12N15/12;A61K38/17;A61P31/00
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理有限公司 11270
• 代理人: 景鵬;姚開麗

1.分離的蜘蛛核酸分子，其核苷酸序列如序列SEQ ID NO. 1所示。

2.包括權利要求1所述的分離的蜘蛛核酸分子的嵌合基因。

3.一種嵌合基因，包括：

a) 啟動子，其與前導序列連接或不連接；和

b) 如SEQ ID NO. 1所示的蜘蛛核酸分子；

其中所述啟動子可操作地連接到所述蜘蛛核酸分子。

4.包括根據權利要求3所述的嵌合基因的表達載體。

5.根據權利要求3所述的嵌合基因或根據權利要求4所述的表達載體，其中所述啟動子含有增強子元件。

6.一種表達載體，包括：

a) 啟動子，其與前導序列連接或不連接；

b) 如SEQ ID NO. 1所示的蜘蛛核酸分子；

c) 終止信號；

d) 復制起點；

e) 選擇標記；和

f) 克隆位點；

其中所述啟動子可操作地連接到所述蜘蛛核酸分子，并且所述蜘蛛核酸分子可操作地連接到所述終止信號。

7.根據權利要求3所述的嵌合基因或根據權利要求6所述的表達載體，其中所述啟動子選自組成性啟動子、誘導性啟動子和組織特異性啟動子。

8.根據權利要求7所述的嵌合基因或表達載體，其中所述組織特異性啟動子選自棉纖維基因的啟動子。

9.根據權利要求8所述的嵌合基因或表達載體，其中所述棉纖維基因選自E6、H6S、Rac13、LTP、ACP、擴張蛋白、CAP、膜連蛋白、FbL2A和肌動蛋白2。

10.根據權利要求3所述的嵌合基因或根據權利要求6所述的表達載體，其中所述前導序列從與用來指導轉錄所述蜘蛛核酸分子的啟動子相同的基因獲得，或者其中所述啟動子能夠在植物、動物或真菌中表達。

11. 根據權利要求6所述的表達載體，其中所述終止信號包括SV40終止信號、HSV TK腺苷化信號、根癌農桿菌的胭脂堿合成酶基因(NOS)的終止信號、章魚堿合成酶基因終止信號、CaMV的19S和35S基因的終止信號、玉米醇脫氫酶基因終止信號、甘露堿合成酶基因終止信號、β-菜豆素基因終止信號、ssRUBISCO基因終止信號、蔗糖合成酶基因終止信號、攻擊地三葉草的病毒(SCSV)的終止信號和構巢曲霉的trpC基因的終止信號。

12.根據權利要求6所述的表達載體，其中所述選擇標記選自賦予對抗生素或除草劑的抗性的基因或可視標記，并且其中所述選擇標記選自賦予對卡那霉素、新霉素、氨芐青霉素、氯霉素、鏈霉素、潮霉素、遺傳霉素、草丁膦、草甘磷和草胺磷抗性的基因和AHAS、BAR和GUS基因。

13. 分離的蜘蛛絲蛋白分子，其氨基酸序列如序列SEQ ID NO. 20所示。

14.轉化細胞，其包含根據權利要求2或3所述的嵌合基因，或包含根據權利要求4-12任一項所述的表達載體，或包含根據權利要求13所述的分離的蜘蛛絲蛋白分子，其中所述轉化細胞來源于細菌或真菌。

15.微生物，包含根據權利要求2或3所述的嵌合基因，或包含根據權利要求10-12任一項所述的表達載體。