[發(fā)明專(zhuān)利]龍眼葉中多成分的含量測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711244715.1
• 申請(qǐng)日: 2017-11-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108061763B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-10-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梁潔;黃春燕;李耀華;周昱杉;信晨曦;楊川川
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 廣西中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 南寧勝榮專(zhuān)利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 45126
• 代理人: 關(guān)文龍

本發(fā)明公開(kāi)了一種龍眼葉中多成分的含量測(cè)定方法，采用的是高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定龍眼葉中的沒(méi)食子酸乙酯、紫云英苷、槲皮素、木犀草素、山柰酚的含量，該方法具有高效、準(zhǔn)確，分離度好，重復(fù)性好，穩(wěn)定性好，簡(jiǎn)單易操作等優(yōu)點(diǎn)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)龍眼葉質(zhì)量的有效控制。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種龍眼葉中多成分的含量測(cè)定方法。

背景技術(shù)

龍眼葉，是一味具有廣西民族特色的中藥材，最早記載于《滇南本草圖說(shuō)》。為著名的亞 熱帶水果--龍眼(Dimocarpus longan Lour.)樹(shù)的葉子或嫩芽。其性味甘、淡、平，具有發(fā)表 清熱、利濕解毒等功效。主要用于治療感冒發(fā)熱、瘧疾、疔瘡、濕疹等。龍眼原產(chǎn)于我國(guó)南 部和越南北部的南亞熱帶區(qū)域，在我國(guó)已有2000多年栽培歷史。我國(guó)龍眼栽培面積和產(chǎn)量 均居世界首位。我國(guó)南方龍眼葉資源蘊(yùn)藏量豐富，每年龍眼被摘之后，果農(nóng)對(duì)樹(shù)木進(jìn)行截枝， 大量的樹(shù)葉被拋棄或燃燒，造成資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。

龍眼葉主要含有鞣質(zhì)、酚酸類(lèi)、黃酮類(lèi)及揮發(fā)油等成分。目前國(guó)內(nèi)對(duì)龍眼葉化學(xué)成分的 研究報(bào)道不多，主要集中在黃酮類(lèi)成分方面。發(fā)明人曾對(duì)龍眼葉進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究， 發(fā)現(xiàn)其主要活性成分為黃酮成分，發(fā)明人還對(duì)其中的3種黃酮類(lèi)物質(zhì)(槲皮素、木犀草素和 山奈素)進(jìn)行了含量測(cè)定研究。已有研究表明龍眼葉具有明顯的降血糖，抗氧化等藥理作用， 發(fā)明人曾經(jīng)進(jìn)行的龍眼葉降血糖作用研究結(jié)果表明從龍眼葉中提取分離所得的羽扇豆醇、沒(méi) 食子酸乙酯、山柰酚、木犀草素、槲皮素、紫云英苷等成分對(duì)α-葡萄糖苷酶均有較強(qiáng)的抑制 作用。隨著對(duì)龍眼葉的進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)利用，建立高效、準(zhǔn)確且適用性廣的龍眼葉檢測(cè)和評(píng) 價(jià)方法，為龍眼葉質(zhì)量評(píng)價(jià)提供依據(jù)已成為當(dāng)前急需要解決的問(wèn)題。

以上背景技術(shù)內(nèi)容的公開(kāi)僅用于輔助理解本發(fā)明的發(fā)明構(gòu)思及技術(shù)方案，其并不必然屬 于本專(zhuān)利申請(qǐng)的現(xiàn)有技術(shù)，在沒(méi)有明確的證據(jù)表明上述內(nèi)容在本專(zhuān)利申請(qǐng)的申請(qǐng)日已經(jīng)公開(kāi) 的情況下，上述背景技術(shù)不應(yīng)當(dāng)用于評(píng)價(jià)本申請(qǐng)的新穎性和創(chuàng)造性。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)對(duì)龍眼葉的質(zhì)量控制，本發(fā)明提供了一種高效、準(zhǔn)確，分離 度好，重復(fù)性好，穩(wěn)定性好，簡(jiǎn)單易操作的龍眼葉中多成分的含量測(cè)定方法。

本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：

一種龍眼葉中多成分的含量測(cè)定方法，為采用HPLC法同時(shí)測(cè)定龍眼葉中的沒(méi)食子酸乙 酯、紫云英苷、槲皮素、木犀草素、山柰酚的含量。

以上所述的龍眼葉中多成分的含量測(cè)定方法，包括以下步驟：

S1.供試品溶液制備:取龍眼葉粗粉，加入體積比為8:1的甲醇-鹽酸的混合溶液，超聲 提取40-60min，濾過(guò)，取續(xù)濾液于離心管離心，取上清液備用；

S2.對(duì)照品溶液制備:精密稱(chēng)取沒(méi)食子酸乙酯對(duì)照品、紫云英苷對(duì)照品、槲皮素對(duì)照品、 木犀草素對(duì)照品、和山柰酚對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含沒(méi)食子酸乙酯4.0mg、紫云英苷0.1mg、 槲皮素4.0mg、木犀草素0.1mg、山柰酚0.8mg的混合對(duì)照品溶液；

S3.色譜條件：色譜柱：Kromasil C18柱，4.6mm×250mm，粒度5μm；檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm， 25min轉(zhuǎn)360nm；流動(dòng)相：流動(dòng)相A為甲醇，流動(dòng)相B為0.2％磷酸，梯度洗脫程序?yàn)椋?～ 20min，15％→40％A，20～50min，40％→70％A；流速：1ml/min；柱溫：30℃；

S4.測(cè)定：在色譜條件下，分別進(jìn)混合對(duì)照品溶液、供試品溶液各10μl，以保留時(shí)間定性， 以峰面積定量。

進(jìn)一步的，以上所述的龍眼葉中多成分的含量測(cè)定方法，步驟S1項(xiàng)下龍眼葉粗粉與所加 入“體積比為8:1的甲醇-鹽酸的混合溶液”的料液比為1:5。

進(jìn)一步的，以上所述的龍眼葉中多成分的含量測(cè)定方法，步驟S1中超聲提取時(shí)間為 50min。