[發明專利]基于唾液蛋白質組學的肝癌腎陰虛證生物標志物檢測的方法

在審

• 申請號: 201711241300.9
• 申請日: 2017-11-30
• 公開（公告）號: CN108107219A
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發明（設計）人: 吳正治;孫珂煥;丁峰;黃飛娟;曹美群;范大華;姚永超
• 申請（專利權）人: 深圳市老年醫學研究所;吳正治
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京華智則銘知識產權代理有限公司 11573
• 代理人: 陳向敏

1.基于唾液蛋白質組學的肝癌腎陰虛證生物標志物檢測的方法，其特征在于，具體步驟如下：

(1)樣品蛋白提取：樣本中加入5％的裂解緩沖液進行渦旋混勻，超聲60s，振幅22％室溫提取30min；15000r/min、4℃離心20min，取出上清；收集上清，分裝分裝后凍存于-80℃；

(2)蛋白定量：采用Bradford法測定提取的蛋白濃度，先將樣本用裂解緩沖液進行一定倍數稀釋使其終濃度落在標曲范圍內，稀釋好的樣本和標準品各取10μl分別和300μl蛋白定量染料避光反應20min，用酶標儀同時測定標準品和樣本在595nm下的吸光值，根據標準品每管吸光值和濃度的關系繪制標準曲線，根據曲線公式計算各樣品蛋白濃度；

(3)蛋白酶解：蛋白定量后取200μg蛋白溶液置于離心管中；加入4μl還原劑，60℃反應1h；加入2μl的半胱氨酸阻斷劑，室溫反應10min；將還原烷基化后的蛋白溶液加入10K的超濾管中，12000r/min離心20min，棄掉收集管底部溶液；加入iTRAQ試劑盒中的溶液緩沖液100μl，12000轉離心20min，棄掉收集管底部溶液，重復3次；更換新的收集管，在超濾管中加入胰蛋白酶，總量4μg，體積50μl，37℃反應過夜；次日，12000r/min離心20min，酶解消化后的肽段溶液離心于收集管底部；在超濾管中加入50μl溶解緩沖液，12000r/min再次離心20min，與上步合并，收集管底部共得到100μl酶解后的樣品；

(4)iTRAQ標記：從冰箱中取出iTRAQ試劑，平衡到室溫，將iTRAQ試劑離心至管底；向每管iTRAQ試劑中加入150μl異丙醇，渦旋振蕩，離心至管底；取50μl酶解后的樣品轉移到新的離心管中；將iTRAQ試劑添加到樣品中，渦旋振蕩，離心至管底，室溫反應2h；加入100μl水終止反應；從4組樣品中各取出1ul混合，用Ziptip脫鹽后進行MALDI-TOF-TOF鑒定，確認標記反應良好；混合標記后的樣品，渦旋振蕩，離心至管底；真空冷凍離心干燥；抽干后的樣品冷凍保存待用；

(5)高pH條件下的反相色譜分離：所需試劑的調配：流動相A：98％ddH2O，2％乙腈，pH10；流動相B：98％乙腈，2％ddH2O，pH10；ddH2O用氨水調pH值到10；混合標記后的樣品用100ul流動相A溶解，14000r/min離心20min，取上清待用；使用400μg酶解好的BSA進行分離，檢測系統情況；取100ul準備好的樣本上樣；流速0.7ml/min，得到分離梯度數據；

(6)ABI-5600進行蛋白質分析：所需試劑的調配：流動相A：100％超純水，0.1％甲酸；流動相B：100％乙腈，0.1％甲酸；將高pH反相分離得到的組份用20μl2％甲醇，0.1％甲酸復溶；12000r/min離心10min，吸取上清上樣，上樣體積10μl，采取夾心法上樣；裝載泵流速350nl/min，15min；分離流速350nl/min，得到分離梯度數據；

(7)質譜數據分析：在選擇數據庫時，若為已經測序生物，直接選用該物種數據庫，若為非測序生物，則選擇與被測樣品最為相關的大類蛋白質組數據庫；采用ABI-5600型質譜儀進行iTRAQ的質譜分析；

(8)檢測結果：對肝癌腎虛證和正常對照組進行對比實驗，定量蛋白質組學研究結果顯示：鑒定1297個蛋白；與正常對照組相比，肝癌腎虛證中鑒定到的1.5倍以上表達差異的顯著差異蛋白共140個，其中上調蛋白64個，下調蛋白76個；差異蛋白列表如下：上調蛋白如下：1)檢索號為Q96JC1，基因注釋為Vam6/Vps39-like protein；

2)檢索號為O00755，基因注釋為Protein Wnt-7a；

3)檢索號為P06702，基因注釋為Protein S100-A9；

4)檢索號為Q6ZP82，基因注釋為Coiled-coil domain-containing protein 141；

5)檢索號為P05109，基因注釋為Protein S100-A8；

6)檢索號為Q8NDA2，基因注釋為Hemicentin-2；

7)檢索號為Q7Z589，基因注釋為Protein EMSY；

8)檢索號為Q6UW32，基因注釋為Insulin growth factor-like family member 1；

9)檢索號為，Q6ZT21，基因注釋為Transmembrane protein withmetallophosphoesterase domain；

10)檢索號為P51159，基因注釋為Ras-related protein Rab-27A；

11)檢索號為Q14573，基因注釋為Inositol 1,4,5-trisP29034hosphate receptortype 3；

12)檢索號為P0CG06，基因注釋為Ig lambda-3 chain C regions；

13)檢索號為P35354，基因注釋為Prostaglandin G/H synthase 2；

14)檢索號為P05164，基因注釋為Myeloperoxidase；

15)檢索號為Q14508，基因注釋為WAP four-disulfide core domain protein 2；

16)檢索號為P83593，基因注釋為g kappa chain V-IV region STH(Fragment；

17)檢索號為O75629，基因注釋為Protein CREG1；

18)檢索號為Q92565，基因注釋為Rap guanine nucleotide exchange factor 5；

19)檢索號為P02795，基因注釋為Metallothionein-2；

20)檢索號為Q02218，基因注釋為2-oxoglutarate dehydrogenase,mitochondrial；

21)檢索號為P55145，基因注釋為Mesencephalic astrocyte-derived neurotrophicfactor；

22)檢索號為P02792，基因注釋為Ferritin light chain；

23)檢索號為P50552，基因注釋為Vasodilator-stimulated phosphoprotein；

24)檢索號為，P02771，基因注釋為Alpha-fetoprotein；

25)檢索號為，Q16623，基因注釋為Syntaxin-1A；

26)檢索號為，P22532，基因注釋為Small proline-rich protein 2D；

27)檢索號為，P00390，基因注釋為Glutathione reductase,mitochondrial；

28)檢索號為，P34972，基因注釋為Cannabinoid receptor 2；

29)檢索號為，Q96JB2，基因注釋為Conserved oligomeric Golgi complex subunit3；

30)檢索號為，Q9HD89，基因注釋為Resistin；

31)檢索號為，P03973，基因注釋為Antileukoproteinase；

32)檢索號為，P04179，基因注釋為Superoxide dismutase[Mn],mitochondrial；

33)檢索號為，P01040，基因注釋為Cystatin-A；

34)檢索號為，Q9UL25，基因注釋為Ras-related protein Rab-21；

35)檢索號為，P28749，基因注釋為Retinoblastoma-like protein 1；

36)檢索號為，P02743，基因注釋為Serum amyloid P-component；

37)檢索號為，P58062，基因注釋為Serine protease inhibitor Kazal-type 7；

38)檢索號為，P00736，基因注釋為Complement C1r subcomponent；

39)檢索號為，Q96T37，基因注釋為Putative RNA-binding protein 15；

40)檢索號為，P01770，基因注釋為Ig heavy chain V-III region NIE；

41)檢索號為，P08246，基因注釋為Neutrophil elastase；

42)檢索號為，P20160，基因注釋為Azurocidin；

43)檢索號為，Q7L0X2，基因注釋為Glutamate-rich protein 6；

44)檢索號為，P10643，基因注釋為Complement component C7；

45)檢索號為，P04181，基因注釋為Ornithine aminotransferase,mitochondrial；

46)檢索號為，Q9H7L9，基因注釋為Sin3 histone deacetylase corepressor complexcomponent SDS3；

47)檢索號為，P29034，基因注釋為Protein S100-A2；

48)檢索號為，O75038，基因注釋為1-phosphatidylinositol 4,5-bisphosphatephosphodiesterase eta-2；

49)檢索號為，Q8NCM8，，基因注釋為Cytoplasmic dynein 2 heavy chain 1；

50)檢索號為，Q9Y6V0，基因注釋為Protein piccolo；

51)檢索號為，P01743，基因注釋為Ig heavy chain V-I region HG3；

52)檢索號為，P04632，基因注釋為Calpain small subunit 1；

53)檢索號為，Q5T5U3，基因注釋為Rho GTPase-activating protein 21；

54)檢索號為，P14174，基因注釋為Macrophage migration inhibitory factor；

55)檢索號為，O43653，基因注釋為Prostate stem cell antigen；

56)檢索號為，P01612，基因注釋為Ig kappa chain V-I region Mev；

57)檢索號為，Q14210，基因注釋為Lymphocyte antigen 6D；

58)檢索號為，P12883，基因注釋為Myosin-7；

59)檢索號為，P80188，基因注釋為Neutrophil gelatinase-associated lipocalin；

60)檢索號為，P31997，基因注釋為Carcinoembryonic antigen-related celladhesion molecule 8；

61)檢索號為，Q10588，基因注釋為ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribosehydrolase 2；

62)檢索號為，P02763，基因注釋為Alpha-1-acid glycoprotein 1；

63)檢索號為，Q9UBW5，基因注釋為Bridging integrator 2；

64)檢索號為，P02788，基因注釋為Lactotransferrin；

65)檢索號為，Q66K66，基因注釋為Transmembrane protein 198；

66)檢索號為，P08236，基因注釋為Beta-glucuronidase；

67)檢索號為，O60635，基因注釋為Tetraspanin-1；

68)檢索號為，P14780，基因注釋為Matrix metalloproteinase-9；

69)檢索號為，P13473，基因注釋為Lysosome-associated membrane glycoprotein 2；

70)檢索號為，P13010，基因注釋為X-ray repair cross-complementing protein 5；

71)檢索號為，P04003，基因注釋為C4b-binding protein alpha chain；

72)檢索號為，P01624，基因注釋為Ig kappa chain V-III region POM；

73)檢索號為，P06748，基因注釋為Nucleophosmin；

74)檢索號為，O75578，基因注釋為Integrin alpha-10；

75)檢索號為，P59665，基因注釋為Neutrophil defensin 1；

76)檢索號為，P02741，基因注釋為C-reactive protein；

77)檢索號為，Q8N6Q3，基因注釋為CD177antigen；

78)檢索號為，P46939，基因注釋為Utrophin；

79)檢索號為，Q9P1Z9，基因注釋為Coiled-coil domain-containing protein 180；

80)檢索號為，Q9NQ48，基因注釋為Leucine zipper transcription factor-likeprotein 1；

81)檢索號為，P00738，基因注釋為Haptoglobin；

82)檢索號為，P55000，基因注釋為Secreted Ly-6/uPAR-related protein 1；

83)檢索號為，P01771，基因注釋為Ig heavy chain V-III region HIL；

84)檢索號為，P49913，基因注釋為Cathelicidin antimicrobial peptide；

85)檢索號為，Q9UFN0，基因注釋為Protein NipSnap homolog 3A；

86)檢索號為，P07602，基因注釋為Prosaposin；

87)檢索號為，Q96AT9，基因注釋為Ribulose-phosphate 3-epimerase；

88)檢索號為，Q96L46，基因注釋為Calpain small subunit 2；

89)檢索號為，P02760，基因注釋為Protein AMBP；

90)檢索號為，P01773，基因注釋為Ig heavy chain V-III region BUR；

91)檢索號為，P69905，基因注釋為Hemoglobin subunit alpha；

92)檢索號為，P49221，基因注釋為Protein-glutamine gamma-glutamyltransferase4；

93)檢索號為，P36222，基因注釋為Chitinase-3-like protein 1；

94)檢索號為，P01764，基因注釋為Ig heavy chain V-III region 23；

95)檢索號為，P19652，基因注釋為Alpha-1-acid glycoprotein 2；

96)檢索號為，P28799，基因注釋為Granulins；

97)檢索號為，P00505，基因注釋為Aspartate aminotransferase,mitochondrial；

98)檢索號為，P00441，基因注釋為Superoxide dismutase[Cu-Zn]；

99)檢索號為，P01598，基因注釋為Ig kappa chain V-I region EU；

100)檢索號為，Q12913，基因注釋為Receptor-type tyrosine-protein phosphataseeta；

101)檢索號為，P20933，基因注釋為N(4)-(beta-N-acetylglucosaminyl)-L-asparaginase；

102)檢索號為，P17900，基因注釋為Ganglioside GM2activator；

103)檢索號為，Q8WWY7，WAP，基因注釋為four-disulfide core domain protein 12；

104)檢索號為，P22894，基因注釋為Neutrophil collagenase；

105)檢索號為，O95445，基因注釋為Apolipoprotein M；

106)檢索號為，P04839，基因注釋為Cytochrome b-245 heavy chain；

107)檢索號為，P02753，基因注釋為Retinol-binding protein 4；

108)檢索號為，Q5JS37，基因注釋為NHL repeat-containing protein 3；

109)檢索號為，A6NKB5，基因注釋為Pecanex-like protein 2；

110)檢索號為，P15090，基因注釋為Fatty acid-binding protein,adipocyte；

111)檢索號為，Q9GZP4，基因注釋為PITH domain-containing protein 1；

112)檢索號為，P01623，基因注釋為Ig kappa chain V-III region WOL；

113)檢索號為，P02794，基因注釋為Ferritin heavy chain；

114)檢索號為，P61457，基因注釋為Pterin-4-alpha-carbinolamine dehydratase；

115)檢索號為，P10153，基因注釋為Non-secretory ribonuclease；

116)檢索號為，P42768，基因注釋為Wiskott-Aldrich syndrome protein；

117)檢索號為，O75594，基因注釋為Peptidoglycan recognition protein 1；

118)檢索號為，Q9H244，基因注釋為P2Y purinoceptor 12；

119)檢索號為，P00387，基因注釋為NADH-cytochrome b5reductase 3；

120)檢索號為，P63208，基因注釋為S-phase kinase-associated protein 1

121)檢索號為，P02748，基因注釋為Complement component C9；

122)檢索號為，P01782，基因注釋為Ig heavy chain V-III region DOB；

123)檢索號為，P68871，基因注釋為Hemoglobin subunit beta；

124)檢索號為，Q04837，基因注釋為Single-stranded DNA-binding protein,mitochondrial；

125)檢索號為，Q86VH2，基因注釋為Kinesin-like protein KIF27；

126)檢索號為，Q9ULD9，基因注釋為Zinc finger protein 608；

127)檢索號為，Q7RTS6，基因注釋為Otopetrin-2；

128)檢索號為，P01834，基因注釋為Ig kappa chain C region；

129)檢索號為，Q9NQ38，基因注釋為Serine protease inhibitor Kazal-type 5；

130)檢索號為，O60701，基因注釋為UDP-glucose 6-dehydrogenase；

131)檢索號為，P50995，基因注釋為Annexin A11；

132)檢索號為，Q9H0W9，基因注釋為，Ester hydrolase C11orf54；

133)檢索號為，Q8IUX8，基因注釋為Epidermal growth factor-like protein 6；

134)檢索號為，P10155，基因注釋為60kDa SS-A/Ro ribonucleoprotein；

135)檢索號為，P06870，基因注釋為Kallikrein-1；

136)檢索號為，P01877，基因注釋為Ig alpha-2 chain C region；

137)檢索號為，Q9BPV8，基因注釋為P2Y purinoceptor 13；

138)檢索號為，P13987，基因注釋為CD59 glycoprotein；

139)檢索號為，Q9BRT3，基因注釋為Migration and invasion enhancer 1；

140)檢索號為，P13688，基因注釋為Carcinoembryonic antigen-related celladhesion molecule 1；

141)檢索號為，P09525，基因注釋為Annexin A4；

142)檢索號為，O15400，基因注釋為Syntaxin-7；

143)檢索號為，P31949，基因注釋為Protein S100-A11；

144)檢索號為，Q6P4A8，基因注釋為Phospholipase B-like 1；

145)檢索號為，Q96RM1，基因注釋為Small proline-rich protein 2F；

146)檢索號為，O43866，基因注釋為CD5antigen-like；

147)檢索號為，P01617，基因注釋為Ig kappa chain V-II region TEW；

148)檢索號為，P05155，基因注釋為Plasma protease C1inhibitor；

149)檢索號為，P04434，基因注釋為Ig kappa chain V-III region VH(Fragment)；

150)檢索號為，P48637，基因注釋為Glutathione synthetase；

151)檢索號為，P98088，基因注釋為Mucin-5AC；

152)檢索號為，O95479，基因注釋為GDH/6PGL endoplasmic bifunctional protein；

153)檢索號為，P35241，基因注釋為Radixin；

154)檢索號為，P80419，基因注釋為Ig heavy chain V-III region GAR；

155)檢索號為，P25774，基因注釋為Cathepsin S；

156)檢索號為，P08603，基因注釋為Complement factor H；

157)檢索號為，Q9UGM3，，基因注釋為Deleted in malignant brain tumors1protein；

158)檢索號為，Q16881，基因注釋為Thioredoxin reductase 1,cytoplasmic；

159)檢索號為，P01763，基因注釋為Ig heavy chain V-III region WEA；

160)檢索號為，P19957，基因注釋為Elafin；

161)檢索號為，Q6UXH1，基因注釋為Cysteine-rich with EGF-like domain protein2；

162)檢索號為，P01766，基因注釋為Ig heavy chain V-III region BRO；

163)檢索號為，O14732，基因注釋為Inositol monophosphatase 2；

164)檢索號為，P05107，基因注釋為Integrin beta-2；

165)檢索號為，O43451，基因注釋為Maltase-glucoamylase,intestinal；

166)檢索號為，O43768，基因注釋為Alpha-endosulfine；

167)檢索號為，P16219，基因注釋為Short-chain specific acyl-CoAdehydrogenase,mitochondrial；

168)檢索號為，P02790，基因注釋為Hemopexin；

169)檢索號為，Q00839，基因注釋為Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein U；

170)檢索號為，P31151，基因注釋為Protein S100-A7；

171)檢索號為，P06331，基因注釋為Ig heavy chain V-II region ARH-77；

172)檢索號為，P42126，基因注釋為Enoyl-CoA delta isomerase 1,mitochondrial；

173)檢索號為，P01857，基因注釋為Ig gamma-1chain C region；

174)檢索號為，P01616，基因注釋為Ig kappa chain V-II region MIL；

175)檢索號為，O75635，基因注釋為Serpin B7；

176)檢索號為，P15328，基因注釋為，Folate receptor alpha；

177)檢索號為，P08758，基因注釋為Annexin A5；

178)檢索號為，Q8TED4，基因注釋為Sugar phosphate exchanger 2；

179)檢索號為，O15031，基因注釋為Plexin-B2；

180)檢索號為，P06731，基因注釋為Carcinoembryonic antigen-related celladhesion molecule 5；

181)檢索號為，P01861，基因注釋為Ig gamma-4 chain C region；

182)檢索號為，P23083，基因注釋為Ig heavy chain V-I region V35；

183)檢索號為，P01033，基因注釋為Metalloproteinase inhibitor 1；

184)檢索號為，Q99828，基因注釋為Calcium and integrin-binding protein 1；

185)檢索號為，P01776，基因注釋為Ig heavy chain V-III region WAS；

186)檢索號為，Q86SG5，基因注釋為Protein S100-A7A ；

187)檢索號為，Q9Y608，基因注釋為Leucine-rich repeat flightless-interactingprotein 2

188)檢索號為，P01023，基因注釋為Alpha-2-macroglobulin；

189)檢索號為，Q969T9，基因注釋為WW domain-binding protein 2；

190)檢索號為，P01762，基因注釋為Ig heavy chain V-III region TRO；

191)檢索號為，P27695，基因注釋為DNA-(apurinic or apyrimidinic site)lyase；

192)檢索號為，P01767，基因注釋為Ig heavy chain V-III region BUT；

193)檢索號為，P01605，基因注釋為Ig kappa chain V-I region Lay；

194)檢索號為，Q6PCB0，基因注釋為von Willebrand factor A domain-containingprotein 1；

195)檢索號為，Q9UL46，基因注釋為Proteasome activator complex subunit 2；

196)檢索號為，P01876，基因注釋為Ig alpha-1chain C region；

197)檢索號為，P01781，基因注釋為Ig heavy chain V-III region GAL；

198)檢索號為，P00734，基因注釋為Prothrombin；

199)檢索號為，Q99584，基因注釋為Protein S100-A13；

200)檢索號為，P10644，基因注釋為cAMP-dependent protein kinase type I-alpharegulatory subunit；

201)檢索號為，P54108，基因注釋為Cysteine-rich secretory protein 3；

202)檢索號為，P02042，基因注釋為Hemoglobin subunit delta；

203)檢索號為，P01859，基因注釋為Ig gamma-2 chain C region；

204)檢索號為，P01603，基因注釋為Ig kappa chain V-I region Ka；

下調蛋白如下：

1)檢索號為，Q2TAA2，基因注釋為Isoamyl acetate-hydrolyzing esterase1homolog；

2)檢索號為O60814，基因注釋為Histone H2B type 1-K；

3)檢索號為，Q06828，基因注釋為Fibromodulin；

4)檢索號為，P02808，基因注釋為Statherin；

5)檢索號為，F5H4A9，基因注釋為Uncharacterized membrane protein C3orf80；

6)檢索號為，Q8IVL1，基因注釋為Neuron navigator 2；

7)檢索號為，P22392，基因注釋為Nucleoside diphosphate kinase B；

8)檢索號為，P80303，基因注釋為Nucleobindin-2；

9)檢索號為，Q96A08，基因注釋為Histone H2B type 1-A；

10)檢索號為，Q9BYB0，基因注釋為SH3 and multiple ankyrin repeat domainsprotein 3；

11)檢索號為，P04745，基因注釋為Alpha-amylase 1；

12)檢索號為，Q8IUE6，基因注釋為Histone H2A type 2-B；

13)檢索號為，Q9H2E6，基因注釋為Semaphorin-6A；

14)檢索號為，Q2NL68，基因注釋為Proline and serine-rich protein 3；

15)檢索號為，P01602，基因注釋為Ig heavy chain V-I region 5(Fragment)；

16)檢索號為，P35754，基因注釋為Glutaredoxin-1；

17)檢索號為，Q5SNV9，基因注釋為Uncharacterized protein C1orf167；

18)檢索號為，Q7Z5M8，，基因注釋為Abhydrolase domain-containing protein 12B；

19)檢索號為，Q96DR5，基因注釋為BPI fold-containing family A member 2；

20)檢索號為，Q15181，基因注釋為Inorganic pyrophosphatase；

21)檢索號為，Q99460，基因注釋為26S proteasome non-ATPase regulatory subunit1；

22)檢索號為，Q9BPY8，基因注釋為Homeodomain-only protein；

23)檢索號為，Q9GZZ8，基因注釋為Extracellular glycoprotein lacritin；

24)檢索號為，P32243，基因注釋為Homeobox protein OTX2；

25)檢索號為，O95881，基因注釋為Thioredoxin domain-containing protein 12；

26)檢索號為，Q9H299，基因注釋為SH3 domain-binding glutamic acid-rich-likeprotein 3；

27)檢索號為，Q92520，基因注釋為Protein FAM3C；

28)檢索號為，P23280，基因注釋為Carbonic anhydrase 6；

29)檢索號為，Q9BRK5，基因注釋為45kDa calcium-binding protein；

30)檢索號為，P22626，基因注釋為Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1；

31)檢索號為，Q16378，基因注釋為Proline-rich protein 4；

32)檢索號為，Q14118，基因注釋為Dystroglycan；

33)檢索號為，P0C0S5，基因注釋為Histone H2A.Z；

34)檢索號為，P16401，基因注釋為Histone H1.5；

35)檢索號為，P02652，基因注釋為Apolipoprotein A-II；

36)檢索號為，Q9BRZ2，基因注釋為E3ubiquitin-protein ligase TRIM56；

37)檢索號為，Q13185，基因注釋為Chromobox protein homolog 3；

38)檢索號為，P16870，基因注釋為Carboxypeptidase E；

39)檢索號為，Q7Z591，基因注釋為AT-hook-containing transcription factor；

40)檢索號為，O15050，基因注釋為TPR and ankyrin repeat-containing protein 1；

41)檢索號為，Q9UKK3，基因注釋為Poly[ADP-ribose]polymerase 4；

42)檢索號為，P08571，基因注釋為Monocyte differentiation antigen CD14；

43)檢索號為，P28838，基因注釋為Cytosol aminopeptidase；

44)檢索號為，Q8N4F0，基因注釋為BPI fold-containing family B member 2；

45)檢索號為，O43852，基因注釋為Calumenin；

46)檢索號為，Q13127，基因注釋為RE1-silencing transcription factor；

47)檢索號為，P50748，基因注釋為Kinetochore-associated protein 1；

48)檢索號為，P48735，基因注釋為Isocitrate dehydrogenase[NADP],mitochondrial；

49)檢索號為，Q9HAJ7，基因注釋為Histone deacetylase complex subunit SAP30L；

50)檢索號為，Q6ZUA9，基因注釋為Maestro heat-like repeat family member 5；

51)檢索號為，Q96FZ7，基因注釋為Charged multivesicular body protein 6；

52)檢索號為，O75695，基因注釋為Protein XRP2；

53)檢索號為，Q9H4M9，基因注釋為EH domain-containing protein 1；

54)檢索號為，P01036，基因注釋為Cystatin-S；

55)檢索號為，Q99592，基因注釋為Zinc finger and BTB domain-containingprotein 18；

56)檢索號為，P04792，基因注釋為Heat shock protein beta-1；

57)檢索號為，Q04917，基因注釋為14-3-3 protein eta；

58)檢索號為，P58499，基因注釋為Protein FAM3B；

59)檢索號為，P30085，基因注釋為UMP-CMP kinase；

60)檢索號為，Q9P0M2，基因注釋為A-kinase anchor protein 7 isoform gamma；

61)檢索號為，P30405，基因注釋為Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase F,mitochondrial；

62)檢索號為，P02647，基因注釋為Apolipoprotein A-I；

63)檢索號為，P15374，基因注釋為Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolaseisozyme L3；

64)檢索號為，Q96DA0，基因注釋為Zymogen granule protein 16 homolog B；

65)檢索號為，P62805，基因注釋為Histone H4；

66)檢索號為，P55957，基因注釋為BH3-interacting domain death agonist；

67)檢索號為，Q05315，基因注釋為Galectin-10；

68)檢索號為，Q14289，基因注釋為Protein-tyrosine kinase 2-beta；

69)檢索號為，P15515，基因注釋為Histatin-1；

70)檢索號為，Q9H2U2，基因注釋為Inorganic pyrophosphatase 2,mitochondrial；

71)檢索號為，P28325，基因注釋為Cystatin-D；

72)檢索號為，P63313，基因注釋為Thymosin beta-10；

73)檢索號為，P06737，基因注釋為Glycogen phosphorylase,liver form；

74)檢索號為，P30044，基因注釋為Peroxiredoxin-5,mitochondrial；

75)檢索號為，O95777，基因注釋為U6snRNA-associated Sm-like protein LSm8；

76)檢索號為，P40925，基因注釋為Malate dehydrogenase,cytoplasmic；

77)檢索號為，O75015，基因注釋為Low affinity immunoglobulin gamma Fc regionreceptor III-B；

78)檢索號為，P68032，基因注釋為Actin,alpha cardiac muscle 1；

79)檢索號為，P15289，基因注釋為Arylsulfatase A；

80)檢索號為，O00602，基因注釋為Ficolin-1；

81)檢索號為，P40121，基因注釋為Macrophage-capping protein；

82)檢索號為，P04406，基因注釋為Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase；

83)檢索號為，Q9UBC9，基因注釋為Small proline-rich protein 3；

84)檢索號為，Q8NBJ4，基因注釋為Golgi membrane protein 1；

85)檢索號為，Q96FV2，基因注釋為Secernin-2；

86)檢索號為，Q96BQ1，基因注釋為Protein FAM3D；

87)檢索號為，Q9NRS6，基因注釋為Sorting nexin-15；

88)檢索號為，P05089，基因注釋為Arginase-1；

89)檢索號為，Q6BCY4，基因注釋為NADH-cytochrome b5reductase 2；

90)檢索號為，Q9Y5Z4，基因注釋為Heme-binding protein 2；

91)檢索號為，P11216，基因注釋為Glycogen phosphorylase,brain form；

92)檢索號為，P60709，基因注釋為Actin,cytoplasmic 1；

93)檢索號為，P30041，基因注釋為Peroxiredoxin-6；

94)檢索號為，P20962，基因注釋為Parathymosin；

95)檢索號為，Q9H8J5，基因注釋為MANSC domain-containing protein 1；

96)檢索號為，P68431，基因注釋為Histone H3.1；

97)檢索號為，P23381，基因注釋為Tryptophan--tRNA ligase,cytoplasmic；

98)檢索號為，P07737，基因注釋為Profilin-1；

99)檢索號為，P01712，基因注釋為Ig lambda chain V-II region WIN；

100)檢索號為，P46108，基因注釋為Adapter molecule crk；

101)檢索號為，O00584，基因注釋為Ribonuclease T2；

102)檢索號為，Q6NUM9，基因注釋為All-trans-retinol 13,14-reductase；

103)檢索號為，P19827，基因注釋為Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chainH1；

104)檢索號為，Q02413，基因注釋為Desmoglein-1；

105)檢索號為，O60361，基因注釋為Putative nucleoside diphosphate kinase；

106)檢索號為，O95861，基因注釋為3'(2'),5'-bisphosphate nucleotidase 1；

107)檢索號為，P55058，基因注釋為Phospholipid transfer protein；

108)檢索號為，Q9UHY7，基因注釋為Enolase-phosphatase E1；

109)檢索號為，Q13043，基因注釋為Serine/threonine-protein kinase 4；

110)檢索號為，P61956，基因注釋為Small ubiquitin-related modifier 2；

111)檢索號為，Q8TAX7，基因注釋為Mucin-7；

112)檢索號為，P0C0L4，基因注釋為Complement C4-A；

113)檢索號為，Q96C23，基因注釋為Aldose 1-epimerase；

114)檢索號為，P11233，基因注釋為Ras-related protein Ral-A；

115)檢索號為，P22314，基因注釋為Ubiquitin-like modifier-activating enzyme1；

116)檢索號為，Q15493，基因注釋為Regucalcin；

117)檢索號為，P40394，基因注釋為Alcohol dehydrogenase class 4mu/sigmachain；

118)檢索號為，Q9UHA7，基因注釋為Interleukin-36alpha；

119)檢索號為，Q9UBX7，基因注釋為Kallikrein-11；

120)檢索號為，P23528，基因注釋為Cofilin-1；

121)檢索號為，P00338，基因注釋為L-lactate dehydrogenase A chain；

122)檢索號為，Q8NI35，基因注釋為InaD-like protein；

123)檢索號為，Q15121，基因注釋為Astrocytic phosphoprotein PEA-15；

124)檢索號為，P52272，基因注釋為Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein M；

125)檢索號為，P01037，基因注釋為Cystatin-SN；

126)檢索號為，O75367，基因注釋為Core histone macro-H2A.1；

127)檢索號為，Q8IWF6，基因注釋為Protein DENND6A；

128)檢索號為，P61960，基因注釋為Ubiquitin-fold modifier 1；

129)檢索號為，Q9Y3C8，基因注釋為Ubiquitin-fold modifier-conjugating enzyme1；

130)檢索號為，P30043，基因注釋為Flavin reductase(NADPH)；

131)檢索號為，P25787，基因注釋為Proteasome subunit alpha type-2；

132)檢索號為，P09871，基因注釋為Complement C1s subcomponent；

133)檢索號為，P15531，基因注釋為Nucleoside diphosphate kinase A；

134)檢索號為，P14550，基因注釋為Alcohol dehydrogenase[NADP(+)]；

135)檢索號為，Q13421，基因注釋為Mesothelin；

136)檢索號為，Q01853，基因注釋為Transitional endoplasmic reticulum ATPase；

137)檢索號為，P10909，基因注釋為Clusterin；

138)檢索號為，P36871，基因注釋為Phosphoglucomutase-1；

139)檢索號為，P53396，基因注釋為ATP-citrate synthase；

140)檢索號為，P14314，基因注釋為Glucosidase 2subunit beta；

141)檢索號為，P39687，基因注釋為Acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein32 family member A；

142)檢索號為，Q8NC60，基因注釋為Nitric oxide-associated protein 1；

143)檢索號為，P49411，基因注釋為Elongation factor Tu,mitochondrial；

144)檢索號為，P29373，基因注釋為Cellular retinoic acid-binding protein 2；

145)檢索號為，P52565，基因注釋為Rho GDP-dissociation inhibitor 1；

146)檢索號為，P45877，基因注釋為Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase C；

147)檢索號為，O43707，基因注釋為Alpha-actinin-4；

148)檢索號為，P18827，基因注釋為Syndecan-1；

149)檢索號為，Q15782，基因注釋為Chitinase-3-like protein 2；

150)檢索號為，P13693，基因注釋為Translationally-controlled tumor protein；

151)檢索號為，P17066，基因注釋為Heat shock 70kDa protein 6；

152)檢索號為，P28066，基因注釋為Proteasome subunit alpha type-5；

153)檢索號為，P00558，基因注釋為Phosphoglycerate kinase 1。