[發明專利]一種用于提高高容量腺病毒包裝效率的輔助腺病毒有效
| 申請號： | 201711239774.X | 申請日： | 2017-11-30 |
| 公開（公告）號： | CN108203706B | 公開（公告）日： | 2021-03-26 |
| 發明（設計）人： | 夏海濱;單琳琳;朱賀;張偉鋒 | 申請（專利權）人： | 陜西師范大學 |
| 主分類號： | C12N7/01 | 分類號： | C12N7/01;C12N15/61 |
| 代理公司： | 西安恒泰知識產權代理事務所 61216 | 代理人： | 李鄭建 |
| 地址： | 710062 *** | 國省代碼： | 陜西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 提高 容量 病毒 包裝 效率 輔助 | ||
1.一種用于提高高容量腺病毒包裝效率的輔助腺病毒，其特征在于，以5型腺病毒基因組為基礎，去除了5型腺病毒基因組距離5＇端193bp到5196bp之間的DNA序列和27893bp到30990bp之間的DNA序列；在5型腺病毒基因組距離5＇端第192個堿基和第5197個堿基之間依次插入loxp序列、腺病毒包裝信號Ψ、Cre基因表達框、loxp序列，插入的兩個loxp序列方向保持一致；在5型腺病毒基因組距離5＇端第27892個堿基和第30991個堿基之間插入pIX基因表達框和IVa2基因表達框；
所述的Cre基因表達框由啟動子、Cre基因、終止子組成；其中，Cre基因序列包含N端序列、C端序列、內含子剪切供體序列、內含子剪切受體序列，N端序列為Cre基因編碼區5＇端4個堿基到1049個堿基長的DNA片段，C端序列為Cre基因編碼區3＇端4個堿基到1049個堿基長的DNA片段，在N端序列的3＇端插入一段內含子剪切供體序列，在C端序列的5＇端插入一段內含子剪切受體序列，內含子剪切供體序列和剪切受體序列總長度不超過500bp；內含子剪切供體序列、Cre基因N端序列、啟動子、終止子、Cre基因C端序列、內含子剪切受體序列依次按照3＇到5＇的方向插入到腺病毒包裝信號Ψ的3＇端。
2.如權利要求1所述的用于提高腺病毒包裝效率的輔助腺病毒，其特征在于，所述的腺病毒包裝信號Ψ是5型腺病毒的包裝信號，具體為5型腺病毒基因組距離5＇端第193個堿基到第440個堿基之間的DNA序列，其方向為正向或反向。
3.如權利要求1所述的用于提高腺病毒包裝效率的輔助腺病毒，其特征在于，所述的Cre基因表達框序列如下：
AAACGCAAGAGTCTTCTCTGTCTCGACAAGCCCAGTTTCTATTGGTCTCCTTAAACCTGTCTTGTAACCTTGATACTTACCTGGTCGAAATCAGTGCGTTCGAACGCTAGAGCCTGTTTTGCACGTTCACCGGCATCAACGTTTTCTTTTCGGATCCGCCGCATAACCAGTGAAACAGCATTGCTGTCACTTGGTCGTGGCAGCCCGGACCGACGATGAAGCATGTTTAGCTGGCCCAAATGTTGCTGGATAGTTTTTACTGCCAGACCGCGCGCCTGAAGATATAGAAGATAATCGCGAACATCTTCAGGTTCTGCGGGAAACCATTTCCGGTTATTCAACTTGCACCATGCCGCCCACGACCGGCAAACGGACAGAAGCATTTTCCAGGTATGCTCAGAAAACGCCTGGCGATCCCTGAACATGTCCATCAGGTTCTTGCGAACCTCATCACTCGTTGCATCGACCGGTAATGCAGGCAAATTTTGGTGTACGGTCAGTAAATTGGACACCTTCCTCTTCTTCTTGGGCATGGTGGCATCTGACGGTTCACTAAACGAGCTCTGCTTATATAGACCTCCCACCGTACACGCCTACCGCCCATTTGCGTCAATGGGGCGGAGTTGTTACGACATTTTGGAAAGTCCCGTTGATTTTGGTGCCAAAACAAACTCCCATTGACGTCAATGGGGTGGAGACTTGGAAATCCCCGTGAGTCAAACCGCTATCCACGCCCATTGATGTACTGCCAAAACCGCATCACCATGGTAATAGCGATGACTAATACGTAGATGTACTGCCAAGTAGGAAAGTCCCATAAGGTCATGTACTGGGCATAATGCCAGGCGGGCCATTTACCGTCATTGACGTCAATAGGGGGCGTACTTGGCATATGATACACTTGATGTACTGCCAAGTGGGCAGTTTACCGTAAATACTCCACCCATTGACGTCAATGGAAAGTCCCTATTGGCGTTACTATGGGAACATACGTCATTATTGACGTCAATGGGCGGGGGTCGTTGGGCGGTCAGCCAGGCGGGCCATTTACCGTAAGTTATGTAACGCCACCGCGGGGACTAGAGTCGACCTCATGGCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGAGGCAGCCGGGATCATAATCAGCCATACCACATTTGTAGAGGTTTTACTTGCTTTAAAAAACCTCCCACACCTCCCCTGAACCTGAAACATAAAATGAATGCAATTGTTGTTGTTAACTTGTTTATTGCAGCTTATAATGGTTACAAATAAAGCAATAGCATCACAAATTTCACAAATAAAGCATTTTTTTCACTGCATTCTAGTTGTGGTTTGTCCAAACTCATCAATGTATCTTATCATGTCTGGATCTCCCCGCGGTGCTAATCGCCATCTTCCAGCAGGCGCACCATTGCCCCTGTTTCACTATCCAGGTTACGGATATAGTTCATGACAATATTTACATTGGTCCAGCCACCAGCTTGCATGATCTCCGGTATTGAAACTCCAGCGCGGGCCATATCTCGCGCGGCTCCGACACGGGCACTGTGTCCAGACCAGGCCAGGTATCTCTGACCAGAGTCATCCTTAGCGCCGTAAATCAATCGATGAGTTGCTTCAAAAATCCCTTCCAGGGCGCGAGTTGATAGCTGGCTGGTGGCAGATGGCGCGGCAACACCATTTTTTCTGACCCGGCAAAACAGGTAGTTATTCGGATCATCAGCTACACCAGAGACGGAAATCCATCGCTCGACCAGTTTAGTTACCCCCAGGCTAAGTGCCTTCTCTACACCTGCGGTGCTAACCAGCGTTTTCGTTCTGCCAATATGGATTAACATTCTCCCACCGTCAGTACGTGAGATATCTTTAACCCTGATCCTGGCAATTTCGGCTATACGTAACAGGGTGTTATAAGCAATCCCCAGAAATGCCAGATTACGTATATCCTGGCAGCGATCGCTATTTTCCATGAGTGAACGAACCTGTGGAGAGAAAGGCAAAGTGGATGTCAGTAAGACCAATAGGTGCCTATCAT。
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