[發明專利]一種基于超高效液相色譜檢測篩選高產麥角固醇紅曲菌的方法

在審

• 申請號: 201711238247.7
• 申請日: 2017-11-30
• 公開（公告）號: CN108226320A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 何坤;邵彥春
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 徐紹新

1.一種基于超高效液相色譜檢測篩選高產麥角固醇紅曲菌的方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)標準曲線的制備：稱取100mg麥角固醇標準品用無水乙醇溶解并定容至100mL，作標準儲備液，用標準儲備液分別配制1，5，10，40，80，100，200，400，800mg/L九份標準液，在色譜條件下進樣，以峰面積對標準液濃度做回歸曲線，得到回歸方程；

(2)樣品檢測：稱取紅曲菌發酵樣品，經預處理后，在色譜條件下進樣，根據得到的峰面積計算濃度，

所述色譜條件為：色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C18(2.1×100mm，1.7um)；流動相：乙睛：水＝95：5；流速：0.3ml/min；檢測器：紫外可見光檢測器；檢測波長：282nm；運行時間：10min；進樣體積2μL。

2.如權利要求1所述基于超高效液相色譜檢測篩選高產麥角固醇紅曲菌的方法，其特征在于，所述樣品預處理方法是：精密稱取烘干粉碎的紅曲菌發酵樣品0.50g于圓底燒瓶中，加入16mL 25％氫氧化鈉-乙醇水溶液，85℃皂化1.5h，補加4mL無水乙醇繼續皂化1h，冷卻至室溫加10mL乙醚，振蕩30s，靜置萃取30min，重復2次；取上層萃取液水洗至中性，將乙醚全部蒸干，用無水乙醇定容至25mL，樣品經0.22μm尼龍膜過濾。

3.如權利要求2所述基于超高效液相色譜檢測篩選高產麥角固醇紅曲菌的方法，其特征在于：所述25％氫氧化鈉-乙醇水溶液，是將25g氫氧化鈉溶于40mL去離子水后，用無水乙醇定容至100mL。