[發明專利]一種炎癥狀態下的穩定型調節性T細胞及其制備方法在審
| 申請號: | 201711236983.9 | 申請日: | 2017-11-30 |
| 公開(公告)號: | CN107937351A | 公開(公告)日: | 2018-04-20 |
| 發明(設計)人: | 鄭頌國;王菊華;徐振建 | 申請(專利權)人: | 中山大學附屬第三醫院 |
| 主分類號: | C12N5/10 | 分類號: | C12N5/10;A61K35/17;A61P29/00;A61P37/02;A61P37/06 |
| 代理公司: | 廣州三環專利商標代理有限公司44202 | 代理人: | 宋靜娜,郝傳鑫 |
| 地址: | 510000 廣東省廣州市*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 炎癥 狀態 穩定 調節 細胞 及其 制備 方法 | ||
1.一種炎癥狀態下的穩定型調節性T細胞,其特征在于,具有CD4+CD126-Foxp3+的免疫表型。
2.一種如權利要求1所述的炎癥狀態下的穩定型調節性T細胞的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)獲得Foxp3上帶有熒光標記的轉基因小鼠的脾臟細胞懸液;
(2)從步驟(1)的細胞懸液中分離出CD4+T細胞;
(3)向步驟(2)獲得的CD4+T細胞中加入anti-mouse CD4抗體和anti-mouse CD126抗體標記,分選得到所述CD4+CD126-Foxp3+調節性T細胞。
3.根據權利要求2所述的炎癥狀態下的穩定型調節性T細胞的制備方法,其特征在于,所述步驟(1)中使用Foxp3上帶有GFP熒光標記的轉基因小鼠。
4.根據權利要求2所述的炎癥狀態下的穩定型調節性T細胞的制備方法,其特征在于,所述步驟(1)中獲得小鼠脾臟細胞懸液的方法為:取小鼠脾臟,研磨后離心,取細胞沉淀,加入紅細胞裂解液去除紅細胞,離心,利用細胞培養液重懸細胞沉淀,獲得所述脾臟細胞懸液。
5.根據權利要求2所述的炎癥狀態下的穩定型調節性T細胞的制備方法,其特征在于,所述步驟(2)中分離CD4+T細胞的方法為磁激活細胞分選技術或流式細胞分選技術。
6.根據權利要求2所述的炎癥狀態下的穩定型調節性T細胞的制備方法,其特征在于,所述步驟(3)中加入anti-mouse CD4抗體和anti-mouse CD126抗體后,將細胞置于4℃避光孵育30min,然后利用流式細胞分選儀分選得到所述CD4+CD126-Foxp3+調節T細胞。
7.根據權利要求1所述的炎癥狀態下的穩定型調節性T細胞在制備治療炎癥性疾病、自身免疫性疾病或器官移植的免疫排斥疾病的藥物中的用途。
8.一種藥物,其特征在于,所述藥物含有如權利要求1所述的炎癥狀態下的穩定型調節性T細胞。
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