[發明專利]含有中藥材的菌種培養基的制備方法

在審

• 申請號: 201711236202.6
• 申請日: 2017-11-30
• 公開（公告）號: CN108004160A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發明（設計）人: 張熠;王文;雷宇;文彬
• 申請（專利權）人: 成都歐林生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/46
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了含有中藥材的菌種培養基的制備方法，包括以下步驟：稱取瓊脂加注射用水溶解、濕熱滅菌，冷卻后備用；稱取以下原料：碳源為：菊芋，10～35份，靈芝，10～30份，甘蔗渣，15～40份；氮源為：棉籽餅粉，20～80份，蛋白胨，15～45份，蝦皮粉，20～50份，玉米漿，15～35份，麩皮10～30份；無機鹽及微量元素：MgSO4，0.20～1.5g/L；NaCl，2.5～12.5g/L；K2HPO4，0.1～2.5g/L；ZnSO4，0.1～0.2g/L；FeSO4，0.01～0.12g/L；煙酸：0.2～1.2g/L；腺嘌呤：3.5～8.5g/L；半胱氨酸，0.8～2.0g/L；瓊脂12～20g；水，1000份；采用注射用水溶解稱取的原料，定容、調節pH值、除菌處理，再加入滅菌冷卻后的瓊脂培養基中，制得固體培養基。本發明促進了肺炎鏈球菌增殖速率顯著提升，同時不易發生染菌問題。

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，具體涉及含有中藥材的菌種培養基的制備方法。

背景技術

肺炎鏈球菌于1881年首次由巴斯德(Louis Pasteur)及G.M.Sternberg分別在法國及美國從患者痰液中分離出。為革蘭染色陽性，菌體似矛頭狀，成雙或成短鏈狀排列的雙球菌，有毒株菌體外有化學成分為多糖的莢膜。5％～10％正常人上呼吸道中攜帶此菌，有毒株是引起人類疾病的重要病原菌。該菌株在生物技術領域具有一定的應用，然而在常用的培養基中肺炎鏈球菌增殖速度較慢，同時易發生染菌現象。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是現有用于培養肺炎鏈球菌的培養基中，肺炎鏈球菌增殖速度較慢，且易發生染菌現象，目的在于提供含有中藥材的菌種培養基的制備方法，促進了肺炎鏈球菌增殖速率顯著提升，同時不易發生染菌問題。

本發明通過下述技術方案實現：

含有中藥材的菌種培養基的制備方法，包括以下步驟：

步驟1，稱取瓊脂，加注射用水溶解后定容到所需體積的90％；

步驟2，將所述步驟1溶解后的溶液進行濕熱滅菌，冷卻后備用；

步驟3，稱取以下原料：

碳源為：菊芋，10～35份，靈芝，10～30份，甘蔗渣，15～40份；氮源為：棉籽餅粉，20～80份，蛋白胨，15～45份，蝦皮粉，20～50份，玉米漿，15～35份，麩皮10～30份；無機鹽及微量元素：MgSO4，0.20～1.5g/L；NaCl，2.5～12.5g/L；K2HPO4，0.1～2.5g/L；ZnSO4，0.1～0.2g/L；FeSO4，0.01～0.12g/L；煙酸：0.2～1.2g/L；腺嘌呤：3.5～8.5g/L；半胱氨酸，0.8～2.0g/L；瓊脂12～20g；水，1000份；

步驟4，采用注射用水對所述步驟3稱取的原料進行溶解，將溶解后的混合溶液進行定容到所需體積，并調節pH值；

步驟5，將所述步驟4獲得的混合溶液進行除菌處理，再加入所述步驟2滅菌冷卻后的瓊脂培養基中，倒入平皿，制得固體培養基。

優選地，所述步驟3中，取菊芋和靈芝切片，將切片后的菊芋、靈芝和甘蔗渣在40℃溫度條件下烘干5h；然后再將菊芋切片、靈芝切片、甘蔗渣粉碎為粒徑為140～200目的顆粒，并在45℃溫度條件下烘干5h。