[發(fā)明專利]一株多抑制物脅迫耐受性釀酒酵母及制備方法、應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711229258.9
• 申請(qǐng)日: 2017-11-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107937297B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-04-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何艷艷;孜力汗;劉源濤;許建韌;白鳳武
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 大連理工大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/19
• 分類號(hào): C12N1/19;C12N15/81;C12P7/06;C12R1/865
• 代理公司: 大連智高專利事務(wù)所(特殊普通合伙) 21235
• 代理人: 胡景波

1.一株多抑制物脅迫耐受性釀酒酵母（Saccharomyces Cerevisiae），其特征在于，該菌株名稱為S288C-YOL032W，菌株的保藏編號(hào)為CGMCC No.13926，保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏日期為2017年03月24日；該菌株攜帶有YOL032W基因，該基因GenBank登錄號(hào)為NM_001183286.1。

2.一種制備如權(quán)利要求1所述的一株多抑制物脅迫耐受性釀酒酵母的方法，其特征在于，包括如下步驟：以自絮凝酵母SPSC01基因組為模板，通過(guò)PCR擴(kuò)增得到的YOL032W基因連接到pHO組成型整合表達(dá)載體，線性化后轉(zhuǎn)入釀酒酵母S288C，實(shí)現(xiàn)整合表達(dá)。

3.一種制備如權(quán)利要求1所述的一株多抑制物脅迫耐受性釀酒酵母的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1磷脂合成蛋白基因 YOL032W 的重組釀酒酵母的構(gòu)建和轉(zhuǎn)化

S1.1自絮凝酵母SPSC01基因組DNA提取；

S1.2 PCR擴(kuò)增目標(biāo)基因條帶；

S1.3 目標(biāo)片段酶切；

S1.4 目的基因與載體連接；

S1.5 連接產(chǎn)物在大腸桿菌DH5α中轉(zhuǎn)化；

S1.6 重組質(zhì)粒的線性化；

S2 磷脂合成蛋白基因 YOL032W 的釀酒酵母轉(zhuǎn)化

S2.1 釀酒酵母電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的制備；

S2.2 電轉(zhuǎn)化法獲得重組酵母轉(zhuǎn)化子。

4.如權(quán)利要求1所述的釀酒酵母在抑制物脅迫條件下燃料乙醇生產(chǎn)中的應(yīng)用。

5.如權(quán)利要求4所述的釀酒酵母在抑制物脅迫條件下燃料乙醇生產(chǎn)中的應(yīng)用，其特征在于，所述的抑制物脅迫條件為10g/L的乙酸、3g/L的糠醛和2g/L的香草醛。