[發(fā)明專利]一種嗜熱毀絲菌外切葡聚糖苷酶突變體及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201711226179.2 | 申請日： | 2017-11-29 |
| 公開（公告）號： | CN107988182B | 公開（公告）日： | 2020-01-03 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李多川;楊志芹 | 申請（專利權(quán)）人： | 山東農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C12N9/24 | 分類號： | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/81;C12P19/14 |
| 代理公司： | 37240 濟南譽豐專利代理事務(wù)所(普通合伙企業(yè)) | 代理人： | 李茜 |
| 地址： | 271000 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 蛋白質(zhì) 糖苷酶 突變體 絲菌 外切 氨基酸序列 融合蛋白質(zhì) 催化效率 工業(yè)應(yīng)用 熱穩(wěn)定性 野生型 標簽 應(yīng)用 | ||
1.一種外切葡聚糖苷酶，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.編碼權(quán)利要求1所述外切葡聚糖苷酶的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.含有權(quán)利要求2所述基因的表達盒、重組載體或重組菌。
4.引物組在擴增權(quán)利要求2所述基因中的用途，其特征在于，所述引物組包括：序列表中SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的引物對，以及SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示的引物對。
5.權(quán)利要求1所述的外切葡聚糖苷酶或權(quán)利要求2所述的編碼蛋白質(zhì)的基因在降解纖維素中的應(yīng)用。
6.一種重組載體，其特征在于，所述重組載體為將權(quán)利要求2所述的基因插入載體pPIC9K多克隆位點間得到的重組載體。
7.一種重組菌，其特征在于，所述重組菌為將權(quán)利要求6所述的重組載體導(dǎo)入畢赤酵母GS115中得到的重組菌。
8.權(quán)利要求6所述的重組載體或權(quán)利要求7所述的重組菌在生產(chǎn)外切葡聚糖苷酶中的應(yīng)用。
9.一種生產(chǎn)外切葡聚糖苷酶的方法，其特征在于，包括如下步驟：將權(quán)利要求7所述的重組菌接種于BMGY培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，離心，收集菌體并轉(zhuǎn)入到BMMY培養(yǎng)基，在28 ℃，200rpm條件下進行甲醇誘導(dǎo)培養(yǎng)，培養(yǎng)液經(jīng)離心、硫酸銨沉淀、純化，得到外切葡聚糖苷酶。
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