[發明專利]一種環境污染物對記憶損害動物模型的建立方法

有效

• 申請號: 201711224475.9
• 申請日: 2017-11-29
• 公開（公告）號: CN107737138B
• 公開（公告）日: 2020-09-18
• 發明（設計）人: 田建英;王晨;王天琪;王憂美
• 申請（專利權）人: 寧夏醫科大學
• 主分類號: A61K33/32
• 分類號: A61K33/32;A61K38/17;A01K67/02
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 李振瑞

本發明屬于生物學技術領域，公開了一種環境污染物對記憶損害動物模型的建立方法，動物模型建立過程耗時5周，前3周為低劑量給藥期，第4周為高劑量給藥期，第5周為自然生長期；其中，低劑量給藥期以7天為一個循環操作周期，循環3次；高劑量給藥期共計7天；動物模型建立期間自由取食飲水。本發明以低壓氧環境、硫酸錳溶液和β?淀粉樣蛋白液復合因素作為環境污染物，采用循序漸進的給藥方式，通過環境和藥物的積累作用，逐步誘導大鼠腦部記憶神經元區(海馬區)病變，建立穩定的記憶損害大鼠模型，大鼠的腦部病變呈彌漫性分布，重現性良好，可以很好的模擬阿爾茲海默病的腦部彌漫性病變。

技術領域

本發明屬于生物學技術領域，具體涉及一種環境污染物對記憶損害動物模型的建立方法。

背景技術

阿爾茲海默病(AD)是一種常發生與中老年人的中樞神經系統退變性疾病，目前尚無有效的根治方法。研究發現，阿爾茲海默病的早期病變主要與腦內膽堿能系統功能降低有關，包括腦內β-淀粉樣蛋白聚集形成的老年斑，神經元內tau蛋白異常聚集形成的神經原纖維纏結，神經元不同程度凋亡或丟失以及星形膠質細胞增生和肥大，患者臨床癥狀主要表現為進行性記憶力減退和認知功能障礙為特征。

為了進一步研究阿爾茲海默病病理特征，發生機制，研發治療該疾病的有效藥物，建立一種記憶損害動物模型尤為必要。現有技術中，阿爾茲海默病的動物模型主要包括：(1)老化型動物模型，分為自然老化型、快速老化型和D-半乳糖致老化型；(2)損傷性動物模型，分為膽堿能系統損傷型、Aβ(β-淀粉樣蛋白)損傷型、tau蛋白損傷型、鉛中毒損傷型；(3)轉基因動物模型，分為APP轉基因型、tau轉基因型、多重轉基因型。

在上述Aβ損傷型構建過程中，即使Aβ是很小濃度也會產生神經元的毒性作用，不管是單點注射還是多出注射，都能迅速建立認知障礙性動物模型，但是，由于阿爾茲海默病的腦部病變多呈彌漫性，單純注射Aβ無法完全模擬彌漫性腦部病變，影響阿爾茲海默病的病理研究。

發明內容

本發明提供的一種環境污染物對記憶損害動物模型的建立方法，解決了單純注射Aβ無法完全模擬彌漫性腦部病變，影響阿爾茲海默病的病例研究的問題。

本發明提供的一種環境污染物對記憶損害動物模型的建立方法，動物模型建立過程耗時5周，前3周為低劑量給藥期，第4周為高劑量給藥期；

其中，低劑量給藥期以7天為一個循環操作周期，循環3次，每個循環操作周期的操作步驟如下：

第1-6天，每天給動物腹腔注射環境污染物；第7天給腦部注射0.1mg/ml的β-淀粉樣蛋白液，注射量為1μL/kg體重，并且注射β-淀粉樣蛋白液2小時后，將動物暴露于60±2KPa的低壓氧環境中10-30分鐘；

其中，高劑量給藥期共計7天，具體操作如下：

第1-6天，每天給動物腹腔注射環境污染物；第7天給腦部注射0.1mg/ml的β-淀粉樣蛋白液，注射量為2-3μL/kg體重，并且注射β-淀粉樣蛋白液1小時后，將動物暴露于40±2KPa的低壓氧環境中10-20分鐘；

其中，第5周為自然生長期，不做任何給藥處理；

動物模型建立期間自由取食飲水。

優選的，上述環境污染物對記憶損害動物模型的建立方法，所述環境污染物為硫酸錳溶液，用法和用量為：低劑量給藥期的循環操作周期內，第1-6天，每天給動物腹腔注射濃度2mg/ml的硫酸錳溶液，注射量為1-2mL/kg體重；高劑量給藥期內，第1-6天，每天給動物腹腔注射濃度2mg/ml的硫酸錳溶液，注射量為3-4mL/kg體重。

優選的，上述環境污染物對記憶損害動物模型的建立方法，動物模型建立的作用對象為10周齡的成年大鼠，體重為300-550g。