[發明專利]一種人的超氧化物歧化酶突變蛋白及其應用

在審

• 申請號: 201711223432.9
• 申請日: 2017-11-29
• 公開（公告）號: CN109839504A
• 公開（公告）日: 2019-06-04
• 發明（設計）人: 張耀洲;吳玉乾;馮建華;李冬梅;張樹軍;胖鐵良;陳玉皎;王文雅
• 申請（專利權）人: 天津市湖濱盤古基因科學發展有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558;G01N33/535
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種人的超氧化物歧化酶突變蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一種人的超氧化物歧化酶突變蛋白的編碼基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQID NO:2所示。

3.一種基因芯片，其特征在于，包括：固相載體和固定在該載體上的核苷酸探針；所述核苷酸探針根據所述人的超氧化物歧化酶突變蛋白的核苷酸序列，與人的超氧化物歧化酶正常蛋白的核苷酸序列的比對結果確定。

4.根據權利要求3所述的基因芯片，其特征在于，所述核苷酸探針為SEQ ID NO:3所示的堿基序列。

5.一種特異性識別人的超氧化物歧化酶突變蛋白的單克隆抗體，其特征在于，其編碼的氨基酸序列為SEQ ID NO:1所示。

6.一種用于檢測人的超氧化物歧化酶突變蛋白的抗體的ELISA試劑盒，其特征在于，所述ELISA試劑盒包括：包被有權利要求5所述單克隆抗體的ELISA酶標板、酶標二抗、檢測對象的超氧化物歧化酶蛋白、樣品稀釋液、包被緩沖液、ELISA酶標板洗滌液、顯色液和終止液。

7.根據權利要求6所述用于檢測人的超氧化物歧化酶突變蛋白的抗體的ELISA試劑盒，其特征在于，所述酶標二抗為稀釋的HRP辣根過氧化物酶標記的山羊抗人IgG。

8.一種基于權利要求6或7所述ELISA試劑盒檢測人的超氧化物歧化酶突變蛋白的抗體的方法，其特征在于，包括：

a、使用所述包被緩沖液對權利要求5所述單克隆抗體進行稀釋，并將稀釋后的所述單克隆抗體加樣至ELISA酶標板的孔中，并室溫孵育；

b、使用所述樣品稀釋液將檢測對象的超氧化物歧化酶蛋白稀釋成不同濃度梯度，并將不同濃度梯度的超氧化物歧化酶蛋白分別加樣至ELISA酶標板的孔中，并室溫孵育；

c、甩去各孔中的液體，加入所述ELISA酶標板洗滌液，洗滌并甩干；

d、加入所述酶標二抗，并室溫孵育；

e、甩去各孔中的液體，加入所述ELISA酶標板洗滌液，洗滌并甩干；

f、加入所述顯色液，室溫避光孵育，并加入所述終止液終止反應；

g、在酶標儀上450nm測定OD值。

9.根據權利要求8所述ELISA試劑盒檢測人的超氧化物歧化酶突變蛋白的抗體的方法，其特征在于，進一步包括：空白對照實驗。