[發(fā)明專利]一種煙嘧磺隆降解菌系的篩選方法及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711223120.8
• 申請(qǐng)日: 2017-11-29
• 公開（公告）號(hào): CN109837233A
• 公開（公告）日: 2019-06-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張惠文;李旭;王健;蘇振成
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院沈陽應(yīng)用生態(tài)研究所
• 主分類號(hào): C12N1/36
• 分類號(hào): C12N1/36;A62D3/02;A62D101/04;A62D101/28
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎;周秀梅

本發(fā)明涉及生物降解農(nóng)藥殘留技術(shù)領(lǐng)域，具體的說是一種煙嘧磺隆降解菌系的篩選方法及其應(yīng)用。方法包括如下步驟：取菌懸液,在馴化培養(yǎng)基中添加煙嘧磺隆進(jìn)行馴化，每隔20?30天定期轉(zhuǎn)接并逐步提高培養(yǎng)基中煙嘧磺隆濃度，經(jīng)多次轉(zhuǎn)接、馴化后可得到菌系，再通過檢測菌系對(duì)煙嘧磺隆的降解率可篩選得到降解煙嘧磺隆的菌系。該方法操作簡單、成本低、效率高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物降解農(nóng)藥殘留技術(shù)領(lǐng)域，具體的說是一種煙嘧磺隆降解菌系的篩選方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

煙嘧磺隆是由美國杜邦公司聯(lián)合開發(fā)的磺酰脲類內(nèi)吸性除草劑。可被雜草莖葉和根部吸收，隨后在植物體內(nèi)傳導(dǎo)，造成敏感植物生長停滯、莖葉褪綠、逐漸枯死，煙嘧磺隆主要用于玉米田間雜草防治，是目前使用量最大的化學(xué)除草劑。煙嘧磺隆在土壤中較易移動(dòng)，很容易對(duì)土壤及地下水造成污染，影響生態(tài)環(huán)境及人體健康，因此去除煙嘧磺隆在土壤和水體中的殘留具有重要意義。目前有關(guān)微生物降解煙嘧磺隆的研究已受到廣泛關(guān)注，研究人員已經(jīng)篩選到多種可以降解煙嘧磺隆的微生物。但目前經(jīng)篩選得到的單一菌種在降解煙嘧磺隆方面有很多局限性，包括單一菌種環(huán)境適應(yīng)性較差，對(duì)農(nóng)藥降解不徹底等。馴化篩選可降解煙嘧磺隆的菌系，是生物降解煙嘧磺隆的可行方向。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種煙嘧磺隆降解菌系的篩選方法。

為實(shí)現(xiàn)上述目的本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

一種煙嘧磺隆降解菌系的篩選方法：

1)取菌懸液，在馴化培養(yǎng)基中添加煙嘧磺隆濃度為400-500mg/L，按照體積百分比5-10％的接種量接種菌懸液，28-30℃，150-180r/Min搖床培養(yǎng)20-30天；

2)按體積百分比5-10％的接種量將培養(yǎng)液接種于含煙嘧磺隆馴化培養(yǎng)基中，進(jìn)行轉(zhuǎn)接培養(yǎng)5-6次，使得最后一次轉(zhuǎn)接培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)基中煙嘧磺隆濃度為900-1000mg/L；其中轉(zhuǎn)接培養(yǎng)過程中煙嘧磺隆含量按100mg/L的濃度遞增；

3)按體積百分比5-10％的接種量將培養(yǎng)液接種于含1000mg/L生物煙嘧磺隆馴化培養(yǎng)基中，進(jìn)行轉(zhuǎn)接培養(yǎng)5-6次，所得能夠生長的即為富集的菌系。

所述步驟1)菌懸液為取受煙嘧磺隆污染的土壤或灰塵樣品，加入無菌水，即制成菌懸液。

所述馴化培養(yǎng)基成分為：磷酸氫二鉀0.8-1克，硫酸銨0.8-1克，硝酸鈉0.8-1克，氯化鉀0.4-0.5克，硫酸鎂0.4-0.5克，硫酸亞鐵0.005-0.01克，丙酮酸鈉0.2-0.3克，酵母浸出粉0.4-0.5克，蛋白胨0.4-0.5克，可溶性淀粉0.4-0.5克，蒸餾水1000ml，pH值7.0-7.5。

一種降解煙嘧磺隆的菌劑：

1)取菌懸液，在馴化培養(yǎng)基中添加煙嘧磺隆濃度為400-500mg/L，按照體積百分比5-10％的接種量接種菌懸液，28-30℃，150-180r/Min搖床培養(yǎng)20-30天；

2)按體積百分比5-10％的接種量將培養(yǎng)液接種于含煙嘧磺隆馴化培養(yǎng)基中，進(jìn)行轉(zhuǎn)接培養(yǎng)5-6次，使得最后一次轉(zhuǎn)接培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)基中煙嘧磺隆濃度為900-1000mg/L；其中轉(zhuǎn)接培養(yǎng)過程中煙嘧磺隆含量按100mg/L的濃度遞增；

3)按體積百分比5-10％的接種量將培養(yǎng)液接種于含1000mg/L生物煙嘧磺隆馴化培養(yǎng)基中，進(jìn)行轉(zhuǎn)接培養(yǎng)5-6次，所得培養(yǎng)物即為菌劑。

所述步驟1)菌懸液為取受煙嘧磺隆污染的土壤或灰塵樣品，加入無菌水，即制成菌懸液。