[發明專利]一種強酸水解?HPLC法檢測大蒜果聚糖含量的方法

在審

• 申請號: 201711220784.9
• 申請日: 2017-11-29
• 公開（公告）號: CN107941952A
• 公開（公告）日: 2018-04-20
• 發明（設計）人: 田潔;鐘啟文;田萌;王麗慧;楊世鵬
• 申請（專利權）人: 青海大學;青海省農林科學院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司32218
• 代理人: 杜靜,徐冬濤

1.一種強酸水解-HPLC法檢測大蒜果聚糖含量的方法，其特征在于，首先利用強酸將大蒜果聚糖徹底水解，通過HPLC法檢測水解前后蔗糖、葡萄糖和果糖的含量并計算差值得到大蒜組織中所有果聚糖的總含量。

2.根據權利要求1所述的強酸水解-HPLC法檢測大蒜果聚糖含量的方法，其特征在于，包含以下步驟：

(1)將大蒜組織清洗后擦干，切片，100～110℃殺青10～20min，75～85℃烘干至恒重，粉碎，過35～45目篩形成大蒜組織干樣；

(2)取等量的兩份步驟(1)制備的大蒜組織干樣，向兩份組織干樣中分別加入蒸餾水和強酸溶液，95～105℃水解0.8～1.5h，冷卻至室溫，加入蒸餾水的組織干樣形成待測樣品A，加入強酸溶液的組織干樣加入絮凝劑和堿調節pH至6.8～7.2并定容到與待測樣品A相同的體積形成待測樣品B；

(3)HPLC法分別檢測步驟(2)待測樣品A和待測樣品B中蔗糖、葡萄糖和果糖的含量，按照以下公式得到果聚糖的含量：

果聚糖的含量(mg/g DW)＝(S₁+G₁+F₁)－(S₀+G₀+F₀)

其中S₁：待測樣品B中蔗糖含量；G₁：待測樣品B中葡萄糖含量；F₁：待測樣品B中果糖含量；S₀：待測樣品A中蔗糖含量；G₀：待測樣品A中葡萄糖含量；F₀：待測樣品A中果糖含量。

3.根據權利要求2所述的強酸水解-HPLC法檢測大蒜果聚糖含量的方法，其特征在于，步驟(2)所述強酸溶液為HCl溶液、硫酸溶液或三氯乙酸溶液，優選HCl溶液。

4.根據權利要求2所述的強酸水解-HPLC法檢測大蒜果聚糖含量的方法，其特征在于，步驟(2)所述強酸溶液濃度為0.1～0.2mol/L。

5.根據權利要求4所述的強酸水解-HPLC法檢測大蒜果聚糖含量的方法，其特征在于，步驟(2)所述強酸溶液濃度為0.15～0.17mol/L。

6.根據權利要求2所述的強酸水解-HPLC法檢測大蒜果聚糖含量的方法，其特征在于，步驟(2)中大蒜組織干樣與蒸餾水或強酸溶液的加入量滿足(25～50)mg/ml。

7.根據權利要求2所述的強酸水解-HPLC法檢測大蒜果聚糖含量的方法，其特征在于，步驟(2)中所述堿為NaOH。

8.根據權利要求2所述的強酸水解-HPLC法檢測大蒜果聚糖含量的方法，其特征在于，步驟(2)所述絮凝劑為Al₂(SO₄)₃；所述絮凝劑濃度優選為0.2～0.3mmol/L。

9.根據權利要求2所述的強酸水解-HPLC法檢測大蒜果聚糖含量的方法，其特征在于，步驟(2)待測樣品A和待測樣品B在檢測前過0.2μm微孔濾膜。

10.根據權利要求2所述的強酸水解-HPLC法檢測大蒜果聚糖含量的方法，其特征在于，步驟(3)HPLC檢測條件為：Shodex SUGAR KS-801串KS-802色譜柱，示差檢測器RID-10A，柱溫80℃，進樣量為10μL；流動相為超純水，流速為1mL/min。