[發(fā)明專利]檢測運動基因SNP的引物組及其應用和產(chǎn)品以及檢測運動基因SNP的檢測方法及應用

有效

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• 申請日: 2017-11-28
• 公開（公告）號: CN107893120B
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發(fā)明（設計）人: 張棟;劉攀峰;王曉紅;劉曉東;宋志強
• 申請（專利權）人: 保定佑安生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 北京超凡志成知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 吳嘯寰

本發(fā)明涉及生物檢測技術領域，具體而言，提供了一種檢測運動基因SNP的引物組及其應用和產(chǎn)品以及檢測運動基因SNP的檢測方法及應用。本發(fā)明提供的引物組包含用于檢測AMPD1基因、PPARGC1A基因、ACTN3基因、NRF?1基因和COL5A1基因的探針組和一組引物對，可以同時檢測五種基因的SNP情況，特異性好沒有交叉反應。本發(fā)明提供的一種用于檢測運動基因SNP的產(chǎn)品，檢測操作方便，靈敏度高，特異性強，同時給出五個基因是否是野生型、突變純合子或突變雜合子的結果。本發(fā)明提供的運動基因SNP多重檢測方法操作簡單，檢測速度成倍提高，檢測特異性好，結果準確，為運動基因SNP檢測提供了快速多重檢測方法。

技術領域

本發(fā)明涉及生物檢測技術領域，具體而言，涉及一種檢測運動基因SNP的引物組及其應用和產(chǎn)品以及檢測運動基因SNP的檢測方法及應用。

背景技術

單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)，主要是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性，包括轉換、顛換、缺失和插入，形成的遺傳標記，其數(shù)量很多，多態(tài)性豐富，從理論上來看每一個SNP位點都可以有4種不同的變異形式，但實際上發(fā)生的只有兩種，即轉換和顛換，二者之比為2:1。SNP在探索人類健康和癌癥診斷扮演著重要角色。至今已發(fā)現(xiàn)200多個染色體和18個線粒體的基因多態(tài)性位點和人類的肌肉力量、身體活動水平、耐力水平和訓練敏感性相關。

目前已報道多種SNP的檢測方法，聚合酶鏈式反應(PCR)作為經(jīng)典的方法，通過進行目標序列預擴增來檢測SNP。盡管PCR擴增的方法能達到很高的檢測靈敏度，但也存在一些缺點，如儀器試劑成本和對實驗人員的操作水平較高，選擇性低及需要高精確度的溫度循環(huán)儀器等。其他反應如滾環(huán)擴增反應(RCA)、鏈接酶鏈式擴增反應(LCR)、鏈置換擴增反應(SDA)由于其靈敏度原因，不能用于低濃度樣品和多重SNP檢測。

已報道的檢測LAMP擴增方法主要是使用熒光標記的DNA探針、焦磷酸根離子沉淀、金屬熒光指示劑等。熒光標記物質(zhì)不僅會出現(xiàn)光漂白和光譜重疊等問題，而且成本較高，如精確定量還需要使用熒光顯微鏡或激光掃描儀等昂貴的儀器。另外，如果使用標記探針，在均相溶液中發(fā)生反應的探針信號很難與未反應的探針產(chǎn)生的背景信號分開。使用焦磷酸根離子或金屬熒光指示劑進行檢測，檢出限高，靈敏度低，而且特異性差，極容易產(chǎn)生氣溶膠等污染，造成假陽性結果。用凝膠電泳分離分析LAMP產(chǎn)物，而需要繁瑣的步驟、高成本及很長的反應時間。

綜上所述，找到一種可以同時檢測多個位點SNP，操作快速簡便，結果準確，特異性好的探針組、反應體系和檢測方法具有重要的意義。

有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的在于提供一種用于檢測運動基因SNP的引物組；本發(fā)明的第二目的在于提供一種上述引物組在檢測運動基因SNP中的應用；本發(fā)明的第三個目的在于提供一種上述引物組在制備用于檢測運動基因SNP的產(chǎn)品中的應用；本發(fā)明的第四個目的在于提供一種用于檢測運動基因SNP的產(chǎn)品；本發(fā)明的第五個目的在于提供一種用于運動基因SNP的多重檢測方法；本發(fā)明的第六個目的在于提供上述運動基因SNP的多重檢測方法在運動基因SNP檢測中的應用，以緩解現(xiàn)有技術中存在的若想檢測AMPD1、PPARGC1A、ACTN3、NRF-1和COL5A1五種基因SNP時需要針對每種基因分別進行實驗設計，費時費力的問題。

為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術方案：

本發(fā)明提供了一種用于檢測運動基因SNP的引物組，所述引物組包括1個引物對和5個探針組，所述5個探針組包括：

用于檢測AMPD1基因的探針組、用于檢測PPARGC1A基因的探針組、用于檢測ACTN3基因的探針組、用于檢測NRF-1基因的探針組和用于檢測COL5A1基因的探針組；

所述引物對包括