[發明專利]A型H7亞型流感病毒的檢測試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 201711216435.X
• 申請日: 2017-11-28
• 公開（公告）號: CN108051592A
• 公開（公告）日: 2018-05-18
• 發明（設計）人: 馬嵐;吳峰;岑瑜
• 申請（專利權）人: 清華大學深圳研究生院
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/577;G01N33/533
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 趙天月

本發明公開了A型H7亞型流感病毒的檢測試劑盒及其應用。其中，該流感病毒的檢測試劑盒包括：基底層；第一包被膜，所述第一包被膜形成在所述基底層上，且包被有熒光標記的第一抗體，所述第一抗體特異性結合所述A型H7亞型流感病毒；第二包被膜，所述第二包被膜形成在所述基底層上，并與所述第一包被膜相連，所述第二包被膜上設置有分離的第一區域和第二區域，且第一區域位于近所述第一包被膜端，其中，所述第一區域包被有第二抗體，所述第二抗體和所述第一抗體能夠特異性結合所述A型H7亞型流感病毒，所述第二區域包被有抗抗體，所述抗抗體能夠特異性結合所述第一抗體。該試劑盒的檢測靈敏度高、特異性強、速度快。

技術領域

本發明涉及病毒檢測領域，具體地，涉及A型H7亞型流感病毒的檢測試劑盒及其應用，更具體地，涉及A型H7亞型流感病毒的檢測試劑盒和檢測A型H7亞型流感病毒的方法

背景技術

A型流感病毒即甲型流感病毒為常見流感病毒，甲型流感病毒容易發生變異，其亞型常被人們稱為“禽流感”。禽流感是嚴重危害世界養禽業的毀滅性疫病，其病原容易突變，具有多個血清型，給該病的防控帶來困難，病毒基因變異后能夠感染人類，感染后的癥狀主要表現為高熱、咳嗽、流涕、肌痛等，多數伴有嚴重的肺炎，嚴重者心、腎等多種臟器衰竭導致死亡。甲型流感H7亞型對人類致病性高,據WHO統計，人感染H7亞型的死亡率高達60％。

目前常見的A型H7亞型流感病毒的檢測方法主要有：核酸檢測和病毒分離鑒定。核酸檢測有RT-PCR檢測和real-time RT-PCR檢測方法，核酸檢測依賴于樣本模板RNA的質與量，操作要求嚴格，需要大量儀器與設備及專業人員操作，檢測時間較長，檢測靈敏度高。病毒分離鑒定常用于對陽性樣品病毒的亞型鑒定，需要專門實驗室才能進行。

由此，A型H7亞型流感病毒的檢測方法有待改進。

發明內容

本發明旨在至少解決現有技術中存在的技術問題之一。為此，本發明的一個目的在于提出一種流感病毒的檢測試劑盒，該試劑盒的檢測靈敏度高、特異性強、能快速、簡便地檢測A型H7亞型流感病毒。

因而，根據本發明的一個方面，本發明提供了一種流感病毒的檢測試劑盒。根據本發明的實施例，該試劑盒包括：基底層；第一包被膜，所述第一包被膜形成在所述基底層上，且包被有熒光標記的第一抗體，所述第一抗體特異性結合所述A型H7亞型流感病毒；第二包被膜，所述第二包被膜形成在所述基底層上，并與所述第一包被膜相連，所述第二包被膜上設置有分離的第一區域和第二區域，且第一區域位于近所述第一包被膜端，其中，所述第一區域包被有第二抗體，所述第二抗體和所述第一抗體能夠特異性結合所述A型H7亞型流感病毒，所述第二區域包被有抗抗體，所述抗抗體能夠特異性結合所述第一抗體。

根據本發明實施例的試劑盒，發明人通過對大量A型H7亞型流感病毒的抗體進行篩選，獲得能同時特異性結合于A型H7亞型流感病毒的兩種抗體，即本發明的兩種抗體(即第一抗體和第二抗體)能與抗原的不同表面決定簇特異性結合，從而形成雙抗體夾心復合物，基于檢測復合物中的第一抗體上帶的熒光標記的熒光強度來判斷樣品中是否存在所說的抗原。該試劑盒的檢測靈敏度高、特異性強，檢測時間短，檢測成本低，易于操作和推廣。(

另外，根據本發明上述實施例的流感病毒的檢測試劑盒，還可以具有如下附加的技術特征：

根據本發明的實施例，該方法進一步包括：吸水墊，所述吸水墊與所述第二包被膜的遠所述第一包被膜端相連。

根據本發明的實施例，所述第一抗體和所述第二抗體均為單克隆抗體。

根據本發明的實施例，所述第一抗體為購自昆明云大單抗中心的編號為F7-25的單克隆抗體，所述第二抗體為購自昆明云大單抗中心的編號為F7-26的單克隆抗體。

根據本發明的實施例，所述第一抗體為購自昆明云大單抗中心的編號為F7-14的單克隆抗體，所述第二抗體為購自昆明云大單抗中心的編號為F7-12的單克隆抗體。