[發(fā)明專利]一種基于硝酸纖維素基底膜的微流控腸芯片及其應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201711214625.8 | 申請日: | 2017-11-28 |
| 公開(公告)號: | CN109837237A | 公開(公告)日: | 2019-06-04 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 秦建華;郭雅瓊;李中玉 | 申請(專利權(quán))人: | 中國科學院大連化學物理研究所 |
| 主分類號: | C12N5/071 | 分類號: | C12N5/071 |
| 代理公司: | 沈陽晨創(chuàng)科技專利代理有限責任公司 21001 | 代理人: | 鄭虹 |
| 地址: | 116023 *** | 國省代碼: | 遼寧;21 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 硝酸纖維素膜 芯片 硝酸纖維素 流體通道 基底膜 微流控 頂層 試劑消耗量 微流控芯片 細胞 底層支撐 廢物運輸 流動條件 體外構(gòu)建 通道芯片 細胞代謝 細胞生長 纖維素膜 營養(yǎng)物質(zhì) 真實環(huán)境 培養(yǎng)基 腸細胞 人體腸 藥物腸 支撐層 灌流 基質(zhì) 膠原 下層 修飾 代謝 耗時 應(yīng)用 體內(nèi) 中層 分化 支撐 交換 | ||
1.一種基于硝酸纖維素基底膜的微流控腸芯片,其特征在于:該微流控芯片主要由頂層通道層、硝酸纖維素膜夾層、底層無結(jié)構(gòu)層組成;所述硝酸纖維素膜夾層以PDMS膠水封在頂層通道層和底層無結(jié)構(gòu)層之間。
2.按照權(quán)利要求1所述基于硝酸纖維素基底膜的微流控腸芯片,其特征在于:所述的微流控腸芯片頂層通道層由進液口、通道、細胞培養(yǎng)室、出液口組成,所述細胞培養(yǎng)室通過通道與進液口和出口連接,在進液口可以通入流體培養(yǎng)基,為細胞的生長提供流體環(huán)境和良好的物質(zhì)交換。
3.按照權(quán)利要求1所述基于硝酸纖維素基底膜的微流控腸芯片,其特征在于:該微流控芯片主要頂層通道層可集成多個通道,構(gòu)成平行組,進行高通量的實驗。
4.按照權(quán)利要求1所述基于硝酸纖維素基底膜的微流控腸芯片,其特征在于:該微流控芯片硝酸纖維素膜夾層的硝酸纖維素膜孔徑為0.4-8um。
5.按照權(quán)利要求1所述基于硝酸纖維素基底膜的微流控腸芯片,其特征在于:所述的微流控腸芯片上下兩層分別采用軟刻蝕技術(shù)制作,先以SU8光刻膠制作通道模板,再使用混合好的PDMS倒模得到通道層,下層支撐層采用無結(jié)構(gòu)的模板再使用混合好的PDMS倒模,所述PDMS:引發(fā)劑體積比為5-15:1。
6.按照權(quán)利要求1所述基于硝酸纖維素基底膜的微流控腸芯片的應(yīng)用,其特征在于:所述的微流控腸芯片用于進行腸細胞的培養(yǎng),具體步驟為:芯片經(jīng)過無菌處理和膠原或其他蛋白修飾后,將腸細胞從培養(yǎng)器皿消化下來,密度調(diào)整至1~5×106cells/ml,接種100ul,并移入恒溫培養(yǎng)箱中放置3~5h,細胞貼附后,從通道入口灌入培養(yǎng)基,流速控制在200-1000μl/h,五天后細胞長至緊密融合的細胞單層,可作為體外腸模型。
7.按照權(quán)利要求1所述基于硝酸纖維素基底膜的微流控腸芯片的應(yīng)用,其特征在于:所述腸細胞包括腸細胞系或原代腸細胞。
8.按照權(quán)利要求6所述基于硝酸纖維素基底膜的微流控腸芯片的應(yīng)用,其特征在于:所述微流控腸芯片的無菌處理技術(shù)包括紫外光照射消毒、臭氧消毒,消毒處理時長不小于3小時。
9.按照權(quán)利要求6所述基于硝酸纖維素基底膜的微流控腸芯片的應(yīng)用,其特征在于:所述的微流控腸芯片的表面膠原或其他蛋白修飾,方法為芯片使用前將50-100ug/ml一型膠原或其他蛋白溶液通入通道中,37℃孵育一小時,然后通入培養(yǎng)基替換膠原溶液。
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