[發明專利]重組肌紅蛋白的制備方法有效
| 申請號： | 201711214207.9 | 申請日： | 2017-11-28 |
| 公開（公告）號： | CN109836492B | 公開（公告）日： | 2022-07-22 |
| 發明（設計）人： | 鄧盛元;崔宏達;鄭晨昱 | 申請（專利權）人： | 南京理工大學 |
| 主分類號： | C07K14/805 | 分類號： | C07K14/805;C07K1/34 |
| 代理公司： | 南京理工大學專利中心 32203 | 代理人： | 劉海霞 |
| 地址： | 210094 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 重組 肌紅蛋白 制備 方法 | ||
【權利要求書】：
1.重組肌紅蛋白的制備方法，其特征在于，具體包括以下步驟：
步驟1、制備脫輔基肌紅蛋白：
4℃條件下，取肌紅蛋白溶于水中，用HCl溶液調節pH至2.0，靜置，然后將溶液用等量丁酮萃取，直至上層丁酮無色為止，取下層淺紅色脫輔基肌紅蛋白溶液進行透析，低溫高速離心取上清液，得到脫輔基肌紅蛋白溶液，所述的離心速度為8000 r/min，離心時間為10min，離心溫度為4℃；所述的透析步驟為先用4℃的5mmol/L NaHCO3透析兩次，每次透析0.5h，透析兩次，再用4℃的 H2O透析兩次，每次透析1h，最后用4℃ 的0.1 mol/L的pH=7.0磷酸鹽緩沖溶液透析1h；
步驟2、制備重組肌紅蛋白：
取鋅卟啉Zn（II）溶于NaOH溶液中，緩慢攪拌下滴入脫輔基蛋白溶液中，并在冰浴中靜置，然后用NaOH溶液將pH調至9.5，再用G25脫鹽柱洗脫，得到重組肌紅蛋白，所述的洗脫溶液為0.1 mol/L的pH=7.0磷酸鹽緩沖溶液。
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