[發明專利]一種用于HBsAg純化的藥用級XAD-4樹脂柱的處理方法

在審

• 申請號: 201711212402.8
• 申請日: 2017-11-27
• 公開（公告）號: CN107970899A
• 公開（公告）日: 2018-05-01
• 發明（設計）人: 劉海濤;蘭宇見;甘建輝
• 申請（專利權）人: 深圳康泰生物制品股份有限公司
• 主分類號: B01J20/26
• 分類號: B01J20/26;B01J20/30;C07K16/08;C07K1/22
• 代理公司: 深圳市行一知識產權代理事務所(特殊普通合伙)44453
• 代理人: 楊賢

背景技術

本發明涉及一種用于HBsAg純化的藥用級XAD-4樹脂柱的處理方法，屬于生物制藥技術。

背景技術

XAD-4樹脂是一種非極性大孔聚苯乙烯吸附樹脂，常用于從工藝水中和極性溶劑中除去小分子有機物。在HBsAg純化工藝中，需要使用表面活性劑-曲通改變分子表面張力來分離不同的組分，后續工藝中利用XAD-4樹脂對曲通的特異吸附，達到去除曲通的目的。可用于純化HBsAg藥用級成品XAD-4樹脂柱，目前主要使用市售的藥用級成品XAD-4樹脂柱，不僅價格高昂，且難以再生重復利用，生產成本很高，不利于HBsAg的大規模生產。

發明內容

本發明的目的在于為了解決現有技術存在的缺點，而提供一種用于HBsAg純化的藥用級XAD-4樹脂柱的處理方法。本發明采用工業級散裝XAD-4樹脂為原料，按特定方法和流程處理后，可達到藥用級XAD-4樹脂柱的要求，具有很強的曲通吸附能力，且蛋白吸附率小，且其成本相對于藥用級成品XAD-4樹脂柱來說極其低廉，具有較好的經濟效益。

為了實現上述目的，本發明采用如下的技術方案：

一種用于HBsAg純化的藥用級XAD-4樹脂柱的處理方法，包括以下步驟：

(1)將XAD-4樹脂用注射用水清洗去掉懸浮顆粒后裝入柱筒；

(2)注射用水沖洗0.5-1.5小時；

(3)體積分數為20％的乙醇溶液沖洗1-3小時；

(4)注射用水沖洗0.5-1.5小時；

(5)摩爾濃度為0.1mol/L的HCl溶液沖洗1-3小時；

(6)注射用水沖洗0.5-1.5小時；

(7)摩爾濃度為0.1mol/L的NaOH溶液沖洗1-3小時；

(8)摩爾濃度為0.1mol/L的NaOH溶液保存6小時以上；

(9)使用前用6.2mmol/L的磷酸鹽緩沖溶液沖洗3-5小時。

所述處理方法沖洗時柱筒垂直放置，沖洗液下進上出，流量控制在250-300ml/min；如果同時處理多根XAD-4樹脂柱時應串聯，最多可串聯5根XAD-4樹脂柱。

所述XAD-4樹脂為工業級散裝XAD-4樹脂。

與現有技術相比，本發明具有以下的有益效果：

本發明方法處理后的XAD-4樹脂柱可達到藥用級的要求，應用本發明方法處理后的XAD-4樹脂柱用于純化HBsAg時，具有很強的曲通吸附能力，且蛋白吸附率小，在去除曲通的能力和蛋白吸附率均達到甚至略優于目前市售的藥用級成品XAD-4樹脂柱，且其制備成本遠低于市售的藥用級成品XAD-4樹脂柱的價格，具有較好的經濟效益。

具體實施例方式

下列實施例旨在進一步舉例更具體地描述本發明的具體實施方式，但是應理解所述實施例僅為了說明本發明，而不是以任何方式限制本發明的范圍。

實施例

一、裝柱及清洗

1.材料：

XAD-4樹脂柱筒：由本公司開發和設計，材質為不銹鋼，拆卸和組裝快速方便，柱筒容量1L。

XAD-4樹脂：市售工業級散裝XAD-4樹脂

2.制備方法

將市售工業級散裝XAD-4樹脂用注射用水清洗去掉懸浮顆粒后裝入柱筒，再依次采用以下試劑清洗：

(1)注射用水沖洗1小時；

(2)20％乙醇溶液沖洗2小時；

(3)注射用水沖洗1小時；

(4)0.1mol/L的HCl溶液沖洗2小時；

(5)注射用水沖洗1小時；

(6)0.1mol/L的NaOH溶液沖洗2小時；

(7)0.1mol/L的NaOH溶液保存6小時以上；

(8)使用前用6.2mmol/L的磷酸鹽緩沖溶液沖洗4小時。

沖洗時柱筒垂直放置，沖洗液下進上出，流量300ml/min；如果同時處理多根XAD-4樹脂柱時應串聯，為保證清洗效果最多可串聯5根XAD-4樹脂柱。

二、清洗效果

按以下操作制作市售的工業級散裝XAD-4樹脂浸出物、按本發明方法制備的XAD-4樹脂柱浸出物、市售的藥用級成品XAD-4樹脂柱浸出物，檢測這三種浸出物的DVB(Divinlybenzene，二乙烯苯)殘余量和TCO(色譜分析化學物)。