[發(fā)明專利]具有靈敏熒光各向異性響應(yīng)的免疫球蛋白E的熒光染料標(biāo)記核酸適配體有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201711212201.8 | 申請(qǐng)日： | 2017-11-28 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN107868787B | 公開（公告）日： | 2021-05-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 趙強(qiáng);白云龍 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國(guó)科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心 |
| 主分類號(hào)： | C12N15/115 | 分類號(hào)： | C12N15/115;G01N33/68;G01N33/58 |
| 代理公司： | 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245 | 代理人： | 關(guān)暢 |
| 地址： | 100085*** | 國(guó)省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 具有 靈敏 熒光 各向異性 響應(yīng) 免疫球蛋白 染料 標(biāo)記 核酸 適配體 | ||
1.用于檢測(cè)人免疫球蛋白E的核酸適配體，為如下（a1）-（a13）中任一種：
（a1）將核酸適配體IgE37第10位所示的堿基T進(jìn)行FAM標(biāo)記得到的適配體；
（a2）將核酸適配體IgE37第11位所示的堿基T進(jìn)行FAM標(biāo)記得到的適配體；
（a3）將核酸適配體IgE37第13位所示的堿基T進(jìn)行FAM標(biāo)記得到的適配體；
（a4）將核酸適配體IgE37第10位所示的堿基T進(jìn)行TMR標(biāo)記得到的適配體；
（a5）將核酸適配體IgE37第9位所示的堿基T進(jìn)行FAM標(biāo)記得到的適配體；
（a6）將核酸適配體IgE37第15位所示的堿基C進(jìn)行FAM標(biāo)記得到的適配體；
（a7）將核酸適配體IgE37第17位所示的堿基T進(jìn)行FAM標(biāo)記得到的適配體；
（a8）將核酸適配體IgE37第23位所示的堿基C進(jìn)行FAM標(biāo)記得到的適配體；
（a9）將核酸適配體IgE37第30位所示的堿基C進(jìn)行FAM標(biāo)記得到的適配體；
（a10）將核酸適配體IgE37第5位所示的堿基C進(jìn)行TMR標(biāo)記得到的適配體；
（a11）將核酸適配體IgE37第11位所示的堿基T進(jìn)行TMR標(biāo)記得到的適配體；
（a12）將核酸適配體IgE37第17位所示的堿基T進(jìn)行TMR標(biāo)記得到的適配體；
（a13）將核酸適配體IgE37第22位所示的堿基C進(jìn)行TMR標(biāo)記得到的適配體；
所述核酸適配體IgE37的核苷酸序列如序列1所示。
2.用于檢測(cè)人免疫球蛋白E的試劑盒，該試劑盒包括權(quán)利要求1所述的核酸適配體。
3.權(quán)利要求1所述的核酸適配體或權(quán)利要求2所述的試劑盒在如下（c1）-（c3）中任一種中的應(yīng)用：
（c1）制備識(shí)別或結(jié)合人免疫球蛋白E的產(chǎn)品；
（c2）制備檢測(cè)或輔助檢測(cè)人免疫球蛋白E的產(chǎn)品；
（c3）制備診斷和/或治療與人免疫球蛋白E相關(guān)的疾病的產(chǎn)品。
4.一種檢測(cè)或輔助檢測(cè)人免疫球蛋白E的方法，包括如下步驟：
（d1）將權(quán)利要求1所述的核酸適配體和待測(cè)樣品在結(jié)合緩沖液中混勻，得到混合溶液；
（d2）將所述混合溶液進(jìn)行溫育；溫育結(jié)束后，檢測(cè)熒光各向異性值或熒光偏振值，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)所述待測(cè)溶液中人免疫球蛋白E的檢測(cè)；
所述方法為非疾病診斷和治療目的。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于：所述對(duì)所述待測(cè)溶液中人免疫球蛋白E的檢測(cè)為定量檢測(cè)或定性檢測(cè)；
若為定量檢測(cè)時(shí)，按照如下確定所述待測(cè)溶液中人免疫球蛋白E的含量：當(dāng)所述溫育結(jié)束后，將所測(cè)定的熒光各向異性值或熒光偏振值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，從而計(jì)算所述待測(cè)溶液中人免疫球蛋白E的含量；所述標(biāo)準(zhǔn)曲線方程按照如下獲得：用系列已知濃度的人免疫球蛋白E標(biāo)準(zhǔn)品溶液替代所述待測(cè)溶液進(jìn)行步驟（d1）-（d2），測(cè)得各濃度的人免疫球蛋白E標(biāo)準(zhǔn)品溶液對(duì)應(yīng)的熒光各向異性值或熒光偏振值，從而獲得人免疫球蛋白E的濃度與熒光各向異性值或熒光偏振值之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程；
若為定性檢測(cè)時(shí)，按照如下確定所述待測(cè)溶液中是否含有人免疫球蛋白E：當(dāng)所述溫育結(jié)束后，若所測(cè)定的熒光各向異性值或熒光偏振值顯著高于對(duì)照值，則所述待測(cè)溶液中含有或候選含有人免疫球蛋白E；反之，則所述待測(cè)溶液中不含有或候選不含有人免疫球蛋白E；
所述對(duì)照值為用不含有人免疫球蛋白E的溶液替代所述待測(cè)溶液進(jìn)行步驟（d1）-（d2）所測(cè)得的熒光各向異性值或熒光偏振值。
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