[發(fā)明專利]一種檢測TREM2基因多態(tài)性的探針及方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711210289.X
• 申請日: 2017-11-28
• 公開（公告）號: CN109837330A
• 公開（公告）日: 2019-06-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張奕;毛丹丹
• 申請（專利權(quán)）人: 上海中優(yōu)精準(zhǔn)醫(yī)療科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6858
• 分類號: C12Q1/6858;C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 上海容慧專利代理事務(wù)所(普通合伙) 31287
• 代理人: 于曉菁

1.一種檢測TREM2基因多態(tài)性的方法，其特征在于，包括以下步驟：

L1確定TREM2基因突變位點；

L2根據(jù)突變位點設(shè)計并合成探針和引物；

L3將被檢測的TREM2目標(biāo)基因、探針、引物和酶混合進行熒光定量PCR，并監(jiān)測熒光信號；

L4計算雜交峰所顯示的Tm值，根據(jù)Tm值判斷TREM2基因的類型。

2.如權(quán)利要求1所述的檢測TREM2基因多態(tài)性的方法，其特征在于，所述的TREM2基因突變位點包括rs75932628。

3.如權(quán)利要求1或2所述的檢測TREM2基因多態(tài)性的方法，其特征在于，所述的引物包括SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2。

4.如權(quán)利要求1所述的檢測TREM2基因多態(tài)性的方法，其特征在于，所述的檢測熒光信號的方法為：在PCR熔解溫度為45-80℃時，每升溫1℃記錄3-5次熒光信號。

5.一種適用于權(quán)利要求1-4中任意一項所述用于檢測TREM2基因多態(tài)性的探針，其特征在于，所述探針的核苷酸序列包括SEQ ID NO.3。

6.如權(quán)利要求5所述的探針，其特征在于，所述的探針攜帶有可檢測標(biāo)記物。

7.如權(quán)利要求6所述的探針，其特征在于，所述的可檢測標(biāo)記物為熒光標(biāo)記物。

8.如權(quán)利要求7所述的探針，其特征在于，所述熒光標(biāo)記物包括FAM熒光標(biāo)記物和BHQ熒光標(biāo)記物；所述FAM熒光標(biāo)記物設(shè)于探針5′端，所述BHQ熒光標(biāo)記物設(shè)于探針3′端。

9.一種檢測TREM2基因多態(tài)性的方法，其特征在于，包括可以特異識別核酸序列的熒光標(biāo)記探針，通過與靶序列進行雜交后發(fā)生構(gòu)象的變化而釋放熒光染料，根據(jù)雜交后產(chǎn)生不同溫度的峰圖判定分型結(jié)果。