[發明專利]亞精胺三鹽酸鹽介導核酸納米材料自組裝方法及采用該方法制備的三棱柱的納米制劑和應用

有效

• 申請號: 201711210045.1
• 申請日: 2017-11-28
• 公開（公告）號: CN108113961B
• 公開（公告）日: 2019-06-25
• 發明（設計）人: 錢航;王棟;王關嵩;劉倩;賀斌峰
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍陸軍軍醫大學第二附屬醫院
• 主分類號: A61K9/00
• 分類號: A61K9/00;A61K31/7088;A61K47/26;A61P35/00;A61P11/00
• 代理公司: 重慶志合專利事務所(普通合伙) 50210
• 代理人: 胡榮琿

1.一種亞精胺三鹽酸鹽介導核酸納米材料自組裝的方法，其特征在于，有方法如下：

1）取需合成納米材料的DNA凍干粉，分別加H₂O稀釋，混勻，得到DNA溶液；

2）DNA溶液中加入亞精胺三鹽酸鹽水溶液，混勻， DNA溶液均按需要組裝核酸的數量設置摩爾比，在亞精胺三鹽酸鹽水溶液中梯度退火或恒溫或慢退火下介導核酸納米材料的自組裝合成；

所述的恒溫為37°C或45℃，恒溫下放置30～90 min；

所述梯度退火合成為，95°C放置5 min， 65°C放置30 min，50°C放置30 min，37°C放置30 min， 22°C 放置30 min；

所述慢退火合成為，密封DNA溶液，放入100℃的水中緩慢降溫，兩天降至室溫；

所述亞精胺三鹽酸鹽水溶液的pH值為6.0-10.0；

所述亞精胺三鹽酸鹽水溶液的濃度范圍50μM-300μM。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟2）采用亞精胺三鹽酸鹽水溶液介導核酸納米材料制備三棱柱納米材料時，用梯度退火后得到半三棱柱結構溶液；將兩份半三棱柱結構溶液混合，37°C放置60 min，然后在 22°C 放置30min。

3.采用權利要求1-2任一所述方法制備的攜帶siRNA的三棱柱的納米制劑，其特征在于：所述的納米材料由序列如SEQ ID NO：2所示的P1、序列如SEQ ID NO：3所示的P2、序列如SEQ ID NO：4所示的P2’， 在恒溫下或梯度退火或慢退火下，通過單鏈分子堿基互補配對合成，所述的P1、P2、P2’ 的摩爾比2:3:3，mTOR siRNA、P1、P2、P2’的摩爾比為6:2:3:3。

4.權利要求3所述的納米制劑的制備方法，其特征在于，有以下步驟：

1）取P1、P2、P2’的凍干干粉，分別加H₂O稀釋，混勻，得到P1、P2、P2’溶液；

2）取P1、P2與P1、P2’溶液均按照1：3的比例在亞精胺三鹽酸鹽水溶液中分別化合，DNA三棱柱在恒溫下或梯度退火或慢退火合成，得到P1、P2、P2’的摩爾比為2:3:3的納米材料溶液，將mTOR siRNA添加到納米材料溶液中，再次放置30 min，得到mTOR siRNA、P1、P2、P2’的摩爾比的納米制劑溶液。

5.權利要求3所述的制劑在制備治療肺癌的藥物中的應用。