[發明專利]高產左旋內酯水解酶的黑曲霉菌株BFA010-7及其在制備D-泛解酸內酯中的應用有效
| 申請號： | 201711208094.1 | 申請日： | 2017-11-27 |
| 公開（公告）號： | CN108102926B | 公開（公告）日： | 2021-04-13 |
| 發明（設計）人： | 潘江;許建和;鄭高偉;張志鈞;錢小龍;趙朋;戴憶思 | 申請（專利權）人： | 蘇州百福安酶技術有限公司 |
| 主分類號： | C12N1/14 | 分類號： | C12N1/14;C12N9/18;C12N11/093;C12P17/04;C12R1/685 |
| 代理公司： | 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙) 32231 | 代理人： | 張福敏 |
| 地址： | 215513 江蘇省蘇州市常熟市*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 高產 內酯 水解 曲霉 菌株 bfa010 及其 制備 泛解酸 中的 應用 | ||
1.一種高產左旋內酯水解酶的黑曲霉(Aspergillus niger)菌株BFA010-7，其特征在于：該菌株已于2017年11月03日保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為CGMCC No：14631。
2.根據權利要求1所述的黑曲霉菌株BFA010-7，其特征在于：該菌株的ITS 1和ITS 4序列的核酸序列分別如序列表中SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。
3.權利要求1所述的黑曲霉菌株BFA010-7在制備D-泛解酸內酯中的應用。
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：其步驟包括：
(1)細胞固定化培養：將權利要求1所述的黑曲霉菌株BFA010-7接種到含有海綿塊的無菌培養液中進行培養；
(2)細胞化學交聯：在步驟(1)的培養液中加入戊二醛進行絲狀真菌細胞共價自交聯，然后分離獲得海綿包埋的固定化細胞；
(3)將步驟(2)的固定化細胞添加到外消旋泛解酸內酯的水溶液中，催化D-泛解酸內酯的水解反應，獲得D-泛解酸；
(4)分離上述步驟(3)的反應液中的固定化細胞，固定化細胞可重復利用，使用有機溶劑萃取分離除去步驟(3)中未水解的D-泛解酸內酯和L-泛解酸內酯；
(5)對上述步驟(4)中有機溶劑萃取剩余的水相溶液進行酸化處理，使步驟(4)中的水解產物D-泛解酸轉化為D-泛解酸內酯，再用有機溶劑萃取得到目標產物D-泛解酸內酯。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于：步驟(1)中，黑曲霉菌絲體生長在海綿塊的內部和表面。
6.根據權利要求4所述的應用，其特征在于：步驟(1)中，無菌培養液中，海綿塊的體積密度為50～500cm3/L，培養溫度為25～35℃。
7.根據權利要求4所述的應用，其特征在于：所述固定化細胞的對映選擇率高于200，重復使用的半衰期超過200批次。
8.根據權利要求4所述的應用，其特征在于：還包括步驟(6)：當固定化細胞的活力低于原始固定化細胞活力的一半時，將固定化細胞再加到無菌培養液中進行復活增殖培養，實現固定化細胞的活力再生。
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