[發(fā)明專利]一種關(guān)節(jié)假體感染診斷試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711205459.5
• 申請日: 2017-11-27
• 公開（公告）號: CN108034735B
• 公開（公告）日: 2021-02-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 彭兆祥;李瑾;鄭慷;林杰;王思佳
• 申請（專利權(quán)）人: 寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12N15/11;C12Q1/04
• 代理公司: 杭州知見專利代理有限公司 33295
• 代理人: 趙越劍

1.一種關(guān)節(jié)假體感染診斷試劑盒，其特征在于，包括引物、無鎂離子PCR反應(yīng)緩沖液、MgCl₂、Taq 聚合酶、dNTP混合物及ddH₂O，所述引物包括通用引物、特異性引物及內(nèi)參引物，所述特異性引物組成如下：

ica D基因檢測引物：上游引物5'-ATCGTTGTGATGATTGTTTA-3'和下游引物5'-GATATGTCACGACCTTTCTT-3'；

eno基因檢測引物：上游引物5'-ACGTGCAGCAGCTGACT-3'和下游引物5'-CAACAGCATYCTTCAGTACCTTC-3'；

sar A基因檢測引物：上游引物5'-CATCAGCGAAAAGAGAAA-3'和下游引物5'-TGTTTGCTTCAGTAATTCGTTT-3'；

agr基因檢測引物：上游引物5'-GCGCCATAGGATTGTAGAGTG-3'和下游引物5'-CTCAGTAAGAATCCATTTCGCCC-3'；

Mec A基因檢測引物：上游引物5'-TATTAGGTTATGTTGGTCCC-3'和下游引物5'-TGTATGTGCGATTGTATTGC-3'；

Mre B基因檢測引物：上游引物5'-GGGTCGTACACCTGGTAACATT-3'和下游引物5'-GAACTTCATCACCTGGGTAAGC-3'；

所述通用引物為16s rRNA基因檢測引物：

上游引物5'-TCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTA-3'，

下游引物5'-GGTTTCGCTGCCCTTTGTATTGT-3'。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種關(guān)節(jié)假體感染診斷試劑盒，其特征在于，所述內(nèi)參引物為gyrB基因檢測引物：

上游引物5'-TTATGGTGCTGGACAGATACA-3'，

下游引物5'-CACCGTGAAGACCGCCAGATA-3'。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種關(guān)節(jié)假體感染診斷試劑盒，其特征在于，所述關(guān)節(jié)假體感染診斷試劑盒檢測時(shí)的檢測反應(yīng)體系如下：

模板3μL，

10×無鎂離子PCR反應(yīng)緩沖液 5μL，

dNTP混合物3μL，濃度各200μmol/L；

MgCl₂ 3μL，濃度1.5mmol/L；

Taq 聚合酶0.25μL，濃度10U/μL；

目的基因的上游引物2μL，濃度10pmol/L；

目的基因的下游引物2μL，濃度10pmol/L；

gyrB基因檢測引物的上游引物2μL，濃度10pmol/L；

gyrB基因檢測引物的下游引物2μL，濃度10pmol/L；

ddH₂O補(bǔ)足至50μL。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種關(guān)節(jié)假體感染診斷試劑盒，其特征在于，目的基因的上游引物及下游引物選自16s rRNA基因檢測引物、ica D基因檢測引物、eno基因檢測引物、sarA基因檢測引物、agr基因檢測引物、Mec A基因檢測引物、Mre B基因檢測引物的中的一種。