[發(fā)明專利]一種巨菌草人工種子制作方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711200147.5
• 申請日: 2017-11-27
• 公開（公告）號: CN107896991B
• 公開（公告）日: 2020-03-10
• 發(fā)明（設計）人: 李瑞梅;林才偉;姚遠;郭建春;劉姣;符少萍;段瑞軍
• 申請（專利權(quán)）人: 中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院熱帶生物技術研究所;儋州牧春綠色生態(tài)農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京卓特專利代理事務所(普通合伙) 11572
• 代理人: 段宇

1.一種巨菌草人工種子制作方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1，外植體取材：取成熟的巨菌草莖稈，斜向扦插在土中，22-33℃環(huán)境促進種間處腋芽萌發(fā)，待腋芽萌發(fā)2-5cm高時，用小刀將巨菌草莖稈基部的腋芽切下，用作外植體；

S2，外植體消毒：將收集的腋芽材料放入75％的酒精中消毒30-40s，然后放入10％次氯酸鈉溶液中消毒9-12min；在無菌操作間內(nèi)將消毒后的腋芽放入滅菌自來水中清洗3-5次，之后取出晾干水分，備用；

S3，種芽修整：將消毒后的腋芽用無菌小刀修切去上端及不規(guī)則部分，留下基部1.4-1.6cm的短縮節(jié)部分用于人工種子制備；

S4，人工胚乳成分制備：人工胚乳成分為2.5-3.5％海藻酸鈉、MS培養(yǎng)基、1-3mg/L萘乙酸、0.2-0.5mg/L吲哚丁酸、2-3％蔗糖和0.5-1g/L活性炭，pH為5.8-6.2；110-130℃高溫高壓滅菌20min；冷卻備用；

S5，人工種芽膠囊制備：將胚乳凝膠溶液2-4mL注入10-20mL離心管內(nèi)；用注射器吸取3mL1.5％CaCl₂溶液，針頭插入離心管底部并注入CaCl₂溶液，固化10min后，形成巨菌草種芽膠囊，用無菌水漂洗3次；

S6，人工種皮成分及制備：人工種皮成分為5-7％海藻酸鈉、0.8-1.2％普魯蘭多糖和0.3-0.6％羧甲基纖維素鈉；110-130℃高溫高壓滅菌20min后冷卻至室溫，備用；

S7，人工種皮包備：將人工巨菌草種芽膠囊浸入人工種皮溶液中，再用鑷子夾出后放入2％CaCl₂中固化20min，形成巨菌草人工種皮，用無菌水漂洗3次，晾干表面水分；取合適大小的膠囊殼，用紫外線照射消毒；將人工種子放入后，最后蓋上膠囊殼蓋子，既得成品巨菌草人工種子。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種巨菌草人工種子制作方法，其特征在于，所述S2中將經(jīng)過酒精消毒的外植體轉(zhuǎn)移低速攪拌機內(nèi)以30-60轉(zhuǎn)/分攪拌，使得外植體消毒充分。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種巨菌草人工種子制作方法，其特征在于，所述S4中人工胚乳成分為3％海藻酸鈉、MS培養(yǎng)基、2.5mg/L萘乙酸、0.5mg/L吲哚丁酸、3％蔗糖和0.9g/L活性炭。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種巨菌草人工種子制作方法，其特征在于，所述S5中胚乳凝膠溶液的取用量及離心管的規(guī)格根據(jù)種芽的實際大小決定，且以種芽放入胚乳凝膠溶液中被完全淹沒為準。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種巨菌草人工種子制作方法，其特征在于，所述S6中所制得的人工種皮成分為6％海藻酸鈉、1％普魯蘭多糖和0.5％羧甲基纖維素鈉。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種巨菌草人工種子制作方法，其特征在于，所述S6中高溫高壓滅菌后冷卻至室溫，然后向混合溶液中加入多菌靈至濃度為0.25-0.4％。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種巨菌草人工種子制作方法，其特征在于，所述S7中所使用的膠囊殼用市售藥用膠囊殼，且可根據(jù)人工種子大小定做合適的尺寸。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種巨菌草人工種子制作方法，其特征在于，所述S7中向膠囊殼內(nèi)放入人工種子，用高吸水性樹脂填充膠囊殼內(nèi)部剩余空間，以供種子播種后的吸水和保水。