[發(fā)明專利]豬多殺性巴氏桿菌病活疫苗保護(hù)劑及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711200108.5
• 申請(qǐng)日: 2017-11-27
• 公開（公告）號(hào): CN107929749A
• 公開（公告）日: 2018-04-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖華春;皇培剛;王成業(yè);羅文瓊;吳艷琴;李斌;田貴云;曹燦花
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南生物制藥有限公司
• 主分類號(hào): A61K47/42
• 分類號(hào): A61K47/42;A61K47/26;A61K47/22;A61K9/19;A61K39/102;A61P31/04
• 代理公司: 昆明潤(rùn)勤同創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙)53205
• 代理人: 付石健

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及疫苗保護(hù)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種豬多殺性巴氏桿菌病活疫苗保護(hù)劑及其制備方法。

背景技術(shù)

根據(jù)生產(chǎn)工藝和保存條件不同，細(xì)菌活疫苗可分為常規(guī)保護(hù)劑活疫苗和耐熱保護(hù)劑活疫苗。目前國(guó)內(nèi)大多數(shù)細(xì)菌活疫苗產(chǎn)品為常規(guī)保護(hù)劑活疫苗，其保護(hù)劑主要成分為蔗糖、明膠等，保護(hù)劑組方簡(jiǎn)單、配制簡(jiǎn)便，抗原對(duì)溫度敏感，如果在2～8℃條件下，保存期只有3～9個(gè)月，多數(shù)疫苗需要在-15℃以下保存。常規(guī)保護(hù)劑制備的豬多殺性巴氏桿菌病活疫苗2～8℃保存，有效期為6個(gè)月，－15℃以下保存，有效期為12個(gè)月，2～8℃保存12個(gè)月細(xì)菌存活僅為60％。在疫苗生產(chǎn)、運(yùn)輸以及使用過程中，如果冷鏈系統(tǒng)控制不當(dāng)，疫苗保存環(huán)境溫度升高，常常導(dǎo)致疫苗效力下降或失效，造成免疫失敗。疫苗耐熱保護(hù)劑的重要性已不言而喻，它不僅為疫苗的冷鏈運(yùn)輸和貯藏提供了便利，其關(guān)鍵在于提升了疫苗的效力。

疫苗抗原的損耗主要發(fā)生于凍干過程中溫度快速變化階段，因而耐熱保護(hù)技術(shù)是疫苗品質(zhì)穩(wěn)定的關(guān)鍵技術(shù)。對(duì)多品種疫苗的制造檢驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn)，不同品種的疫苗因細(xì)菌(或抗原蛋白)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)不同，適用于它的保護(hù)技術(shù)也不同。其中有耐熱保護(hù)劑配方的不同，也有制備工藝的特別要求不同，沒有一種可以通用于各種疫苗的“萬(wàn)能”保護(hù)劑。如果采用的耐熱保護(hù)技術(shù)不恰當(dāng)，盡管疫苗能在冷藏條件下保存，但這項(xiàng)技術(shù)給疫苗品質(zhì)帶來(lái)的提升作用就難以體現(xiàn)。現(xiàn)實(shí)中可以遇到，部分采用了耐熱保護(hù)技術(shù)的產(chǎn)品，不得不加大使用劑量才能實(shí)現(xiàn)有效免疫。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提出了一種能使疫苗保存時(shí)間長(zhǎng)的豬多殺性巴氏桿菌病活疫苗保護(hù)劑。

本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：

一種豬多殺性巴氏桿菌病活疫苗保護(hù)劑，所述保護(hù)劑由以下重量組份的組分制成：明膠30～50份、酪蛋白50～80份、乳糖140～180份、煙酸1～5份和水800～1200份。

乳糖，低分子化合物，可提高微生物存活率，形成均一懸液，起到水分緩解作用。酪蛋白，高分子化合物，對(duì)微生物有保護(hù)作用，可促進(jìn)其升華形成耐熱骨架阻斷熱傳導(dǎo)和熱輻射。明膠，可去掉雜質(zhì)蛋白、無(wú)抗原性、無(wú)過敏反應(yīng)、無(wú)熱源，并且分子量小、均質(zhì)、易溶于水，可過濾除菌，共熔點(diǎn)為-12℃。煙酸，是機(jī)體必需的13種維生素之一，是一種水溶性維生素，是輔酶Ⅰ和輔酶Ⅱ的組成部分，參與體內(nèi)脂質(zhì)代謝，組織呼吸的氧化過程和糖類無(wú)氧分解的過程。

優(yōu)選的，所述保護(hù)劑由以下重量組份的組分制成：明膠35～45份、酪蛋白60～70份、乳糖150～170份、煙酸1～3份和水900～1100份。

優(yōu)選的，所述保護(hù)劑由以下重量組份的組分制成：明膠40份、酪蛋白66份、乳糖160份、煙酸2份和水1000份。

優(yōu)選的，所述明膠選自明膠225，對(duì)微生物的保護(hù)作用高出普通明膠10％以上。

優(yōu)選的，所述水選自注射用水。

本發(fā)明還提供了一種制備所述保護(hù)劑的方法，包括以下步驟：按重量配比，稱取各組分混勻，溶解，滅菌。

優(yōu)選的，所述滅菌的條件為在116℃的溫度下保持30分鐘。

本發(fā)明還提供一種添加所述保護(hù)劑的豬多殺性巴氏桿菌病活疫苗，在無(wú)菌條件下，將所述保護(hù)劑和豬多殺性巴氏桿菌病活疫苗按重量比為1:1的比例進(jìn)行混勻，冷凍干燥。

作為優(yōu)選，所述冷凍干燥包括預(yù)凍控制、冷井設(shè)置、一次干燥和解析干燥。

作為優(yōu)選，所述預(yù)凍控制包括兩個(gè)步驟：(1)設(shè)定溫度為2℃，設(shè)定時(shí)間1分鐘，持續(xù)時(shí)間10分鐘；(2)設(shè)定溫度-45℃，設(shè)定時(shí)間1分鐘，持續(xù)時(shí)間120分鐘；

所述冷井設(shè)置：捕水器制冷設(shè)定溫度設(shè)定-60℃；預(yù)抽真空0.14mBar，報(bào)警真空0.22mBar；

所述一次干燥分為三個(gè)步驟：(1)設(shè)定溫度為-25℃，設(shè)定時(shí)間90分鐘，持續(xù)時(shí)間120分鐘，控制真空0.14mBar；(2)設(shè)定溫度為-10℃，設(shè)定時(shí)間150分鐘，持續(xù)時(shí)間900分鐘，控制真空0.14mBar；(3)設(shè)定溫度為5℃，設(shè)定時(shí)間120分鐘，持續(xù)時(shí)間60分鐘，控制真空0.14mBar；

所述解析干燥分為兩個(gè)步驟：(1)設(shè)定溫度為25℃，設(shè)定時(shí)間20分鐘，持續(xù)時(shí)間120分鐘，控制真空0.14mBar；(2)設(shè)定溫度為25℃，設(shè)定時(shí)間30分鐘，持續(xù)時(shí)間0分鐘，控制真空0mBar。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：