[發明專利]一種人獸共患隱孢子蟲雙抗夾心膠體金免疫層析試紙在審
| 申請號： | 201711193965.7 | 申請日： | 2017-11-24 |
| 公開（公告）號： | CN107727857A | 公開（公告）日： | 2018-02-23 |
| 發明（設計）人： | 張西臣;邰利鑫;李建華;宮鵬濤;王一凡;李赫;楊正濤;楊舉 | 申請（專利權）人： | 吉林大學 |
| 主分類號： | G01N33/569 | 分類號： | G01N33/569;G01N33/558 |
| 代理公司： | 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司22100 | 代理人： | 陳宏偉 |
| 地址： | 130011 吉*** | 國省代碼： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 人獸共患隱 孢子 蟲雙抗 夾心 膠體 免疫 層析 試紙 | ||
【權利要求書】：
1.一種基于病毒檢測的隱孢子蟲雙抗夾心膠體金免疫層析試紙，主要包括玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜、吸水紙、PVC底板；其特征在于：
金標墊上的金標抗體為CSpV單克隆抗體，硝酸纖維素膜上的指示線T線包被CSpV兔多克隆抗體、C線包被羊抗鼠抗體。
2.如權利要求1所述的一種基于病毒檢測的隱孢子蟲雙抗夾心膠體金免疫層析試紙的制備方法，利用檸檬酸三鈉還原法燒制膠體金溶液，之后利用膠體金對單克隆抗體進行標記，制備金標墊，組裝試紙條，CSpV多克隆抗體作為檢測線、羊抗鼠抗體作為質檢線；具體步驟如下：
（1）膠體金的燒制
利用檸檬酸三鈉還原法，向99mL ddH2O中加入1mL 1%氯金酸，沸騰后加入1mL 1%檸檬酸三鈉，直至酒紅色后，停止加熱，制備40nm膠體金顆粒；
（2）金標抗體的制備
取1mL膠體金溶液，加入4μL 0.2mol/L K2CO3和6μg CSpV單克隆抗體，對單抗進行標記，標記后的金標抗體溶解于復溶液中4℃保存待用或直接滴加于金標墊上；
（3）試紙條的組裝
取NC膜貼于PVC底板上，裁剪好的金標墊壓NC膜上，樣品墊壓在金標墊上，吸水紙壓在NC膜上，粘在底板上，按壓各組狀部分緊緊粘好；
檢測線（T）與質控線（C）
將多抗濃度稀釋到0.5mg/mL，取1μL點于檢測線（T）位置，將羊抗鼠抗體濃度稀釋到0.25mg/mL，取1μL點于質控線（C）位置。
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