[發明專利]一種旱地木槿紫色花系優良單株組培快繁方法

有效

• 申請號: 201711192038.3
• 申請日: 2017-11-24
• 公開（公告）號: CN107711514B
• 公開（公告）日: 2020-02-21
• 發明（設計）人: 羅桂芬;陳高;孫衛邦
• 申請（專利權）人: 中國科學院昆明植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G24/60
• 代理公司: 昆明協立知識產權代理事務所(普通合伙) 53108
• 代理人: 旃習涵

本發明公開了一種旱地木槿Hibiscus aridicola Anthony紫色花系優良單株組培快繁方法。以旱地木槿紫色花系優良單株為外植體，通過外植體消毒、誘導、分化、增殖與生根一系列培養步驟，有效解決了旱地木槿組培快繁、引種馴化及其商業上的開發利用瓶頸問題，同時有效避免野生資源過度利用所造成的自然植株量減少與自然植被區遭受破壞，特別是在保持優良單株特殊形狀的穩定性方面具有積極作用。開發利用前景極好。本方法誘導分化率80％，繁殖周期30天，增殖系數為4，生根率為95％，移栽成活率為92％，極大地提高了旱地木槿的繁殖數量與生長速率，為該物種的引種馴化、保存和規模化生產供了技術支撐。

技術領域

本發明涉及生物技術中植物組培快繁方法，具體地說涉及到旱地木槿紫色花系優良單株組培快繁方法。

背景技術

旱地木槿Hibiscus aridicola Anthony隸屬于錦葵科Malvaceae木槿屬，美麗的多花灌木。旱地木槿是金沙江干熱干暖河谷特有種，僅分布于云南麗江和四川鹽邊地區，海拔高600-2500米的干熱干暖河谷叢中。花色以白色較為常見，紫色花和粉色花極為罕見。同時由于自然分布點少于5個，種群持續衰退，2004年被列入《中國物種紅色名錄》瀕危種類[EN B2ab(ii)]。近年來，由于興建水庫大壩，生境逐步喪失，加上受人類活動頻繁影響，旱地木槿的生存環境受到更加嚴重的威脅。

目前，生物技術中的無菌快速繁殖已成為中藥材、花卉、瀕危物種、經濟林果等種苗生產的重要手段。

迄今為止，現有技術沒有關于旱地木槿紫色花系優良單株組培快繁和相關的生物技術方面的報道。

發明內容

本發明的目的是提供旱地木槿紫色花系優良單株組培快繁的方法，填補旱地木槿生物技術上的空白，同時解決旱地木槿在野外分布區域狹窄，引種馴化難度大的問題。本發明為旱地木槿全面的開發和持續利用、紫色花基因型的保存與擴大奠定了種苗繁育基礎。

為了實現本發明的目的，本發明提供了如下的技術方案：

一種旱地木槿紫色花系優良單株組培快繁的方法，該方法包括外植體選擇與消毒、誘導與分化培養、增殖與繼代培養、壯苗與生根培養、瓶苗移栽步驟：

所述外植體選擇與消毒是取旱地木槿紫色花系優良單株幼嫩的頂芽和側芽，用1％肥皂水浸泡10分鐘，經流水沖洗干凈后進行外植體消毒；

所述誘導與分化培養是將消毒后的外植體在誘導與分化培養基中培養，誘導與分化培養基為MS培養基+1mg/L 6-BA+0.5mg/L IAA+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L，pH5.8，培養周期20天；

所述增殖與繼代培養是誘導與化培養后的材料在增殖與繼代培養基中培養，增殖與繼代培養基為MS培養基+0.8mg/L 6-BA+0.5mg/L IAA+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L，pH5.8，培養周期30天；

所述壯苗與生根培養是經過增殖與繼代培養的苗在壯苗與生根培養基中培養，壯苗與生根培養基為MS培養基+0.3mg/LNAA+0.3mg/L IAA+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L，pH5.8，培養周期20天；

所述瓶苗移栽是：經生根后的生根瓶苗提前一周置放于大棚煉苗，準備基質，基質為體積比的珍珠巖∶腐殖土∶生紅土＝1∶2∶3，用800倍多菌靈進行噴施拌土，用塑料膜密封消毒7天，調節pH至5.8，開瓶取苗，輕輕洗凈基部培養基，移栽，及時噴水并覆蓋塑料膜，大棚溫度為20～30℃，空氣濕度50～60％，基質濕度75～85％。

根據所述的旱地木槿紫色花系優良單株組培快繁方法，所述紫色花系優良單株幼嫩的頂芽和側芽作為外植體，誘導與分化、增殖與繼代、壯苗與生根培養的光照條件均為人工輔光1500LUX，溫度為23～30℃。