[發明專利]用于純化重組ADAMTS13和其它蛋白質的方法以及其組合物

在審

• 申請號: 201711191958.3
• 申請日: 2010-08-02
• 公開（公告）號: CN107988192A
• 公開（公告）日: 2018-05-04
• 發明（設計）人: M·哈斯拉赫爾;A·米特雷爾;C·菲德勒;C·邁爾
• 申請（專利權）人: 百深有限責任公司;百深公司
• 主分類號: C12N9/64
• 分類號: C12N9/64;C12N11/14;C12M1/00
• 代理公司: 上海華誠知識產權代理有限公司31300
• 代理人: 湯國華

1.一種用于在治療性蛋白質組合物的純化中使蛋白質溶液中的脂質包衣病毒污染物滅活的體外方法，所述方法包括：

提供包含治療性蛋白質的蛋白質溶液；

在體外將所述治療性蛋白質固定在載體上，其中所述固定通過載體上的基團和蛋白質上的基團之間的鍵而發生，以及其中所述固定在不存在溶劑-清潔劑混合物的條件下進行，所述混合物包含非離子型清潔劑和有機溶劑；

隨后，在所述治療性蛋白質保持固定在所述載體上時，用包含處于適合于實現脂質包衣病毒污染物滅活的濃度下的非離子型清潔劑和有機溶劑的溶劑-清潔劑混合物將所述治療性蛋白質處理適合于實現脂質包衣病毒污染物滅活的時間。

2.根據權利要求1所述的方法，其中，所述治療性蛋白質為選自ADAMTS13、因子VIII、因子VIIa、因子IX、血管性血友病因子和抗MIF抗體中的至少一種。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述載體是色譜樹脂。

4.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述溶劑-清潔劑混合物包含1％Triton X-100、0.3％磷酸三正丁酯和0.3％聚山梨醇酯80。

5.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述溶劑-清潔劑混合物的處理持續30分鐘到1小時。

6.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述方法進一步包括使用存儲緩沖液將所述治療性蛋白質從所述載體上洗脫。

7.根據權利要求6所述的方法，其中，所述存儲緩沖液具有大于7.0的pH值并包含小于10mM的鈣離子、緩沖化合物、0.05％非離子型清潔劑和鹽。

8.根據權利要求6所述的方法，其中，所述載體是陽離子交換樹脂；以及其中在用存儲緩沖液從陽離子交換樹脂上洗脫的步驟之后沒有超濾、滲濾或緩沖液更換步驟。

9.根據權利要求1或2所述的方法，其中，與所述治療性蛋白質處于溶液中時的溶劑-清潔劑混合物的處理相比，所述溶劑-清潔劑混合物的處理導致所述治療性蛋白質聚集物的形成減少。