[發明專利]一種水解牛乳過敏源β-乳球蛋白蛋白酶的分離純化及應用有效
| 申請號： | 201711191890.9 | 申請日： | 2017-11-24 |
| 公開（公告）號： | CN109837219B | 公開（公告）日： | 2020-09-04 |
| 發明（設計）人： | 張娟;鄭天飛;堵國成;陳堅;湯恒;楊佩珊;馬浩 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;C12N9/54;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人： | 張勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 水解 牛乳 過敏 球蛋白 蛋白酶 分離 純化 應用 | ||
1.一株產蛋白酶的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)S7，其特征在于，于2016年9月27日保藏于中國典型培養物保藏中心，菌種保藏編號CCTCC NO:M2016532，保藏地址為武漢大學保藏中心。
2.應用權利要求1所述的枯草芽孢桿菌S7發酵生產水解牛乳過敏源β-乳球蛋白的粗酶液的方法，其特征在于，具體步驟如下：
(1)將枯草芽孢桿菌S7接種至培養基中培養得到種子液；
(2)將種子液接種于培養基中發酵培養得到發酵液；
(3)將發酵液離心，收集發酵液上清即為粗酶液。
3.根據權利要求2所述的發酵方法，其特征在于，具體步驟如下：
(1)將枯草芽孢桿菌S7接種至AM液體培養基或PDA液體培養基中培養得到種子液；
(2)將種子液按體積2-5％接種量接種于PDA液體培養基中發酵培養得到發酵液；
(3)將發酵液離心，收集發酵液上清即為粗酶液。
4.根據權利要求3所述的發酵方法，其特征在于，所述AM液體培養基成分為：葡萄糖10g/L，酵母粉5g/L，蛋白胨10g/L，MgSO4 0.5g/L，KH2PO4 2g/L，CaCl2 0.2g/L；所述PDA液體培養基成分為：葡萄糖20g/L，馬鈴薯200g/L。
5.根據權利要求3所述的發酵方法，其特征在于，所述步驟(1)中的培養為，在35-39℃，180-260rpm培養10-16h得到種子液。
6.根據權利要求3所述的發酵方法，其特征在于，所述步驟(2)中的發酵培養為，在35-39℃，180-260rpm發酵10-16h得到發酵液。
7.權利要求2所述的粗酶液在消除牛奶過敏源中的應用。
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