[發(fā)明專利]一種BOD生物傳感器及其制備方法和應用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201711190156.0
• 申請日: 2017-11-24
• 公開（公告）號: CN107991363A
• 公開（公告）日: 2018-05-04
• 發(fā)明（設計）人: 馬強;苗升展
• 申請（專利權）人: 儒安科技有限公司
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N33/18
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種BOD生物傳感器的制備方法，其特征在于，采用篩選后的菌種制備BOD生物傳感器，包括以下步驟：

(1)將醋酸纖維素與沸水充分混勻，配制成夾膜后，冷卻；

(2)將篩選后的菌種、淀粉和聚乙烯醇進行混合，混勻后涂抹在所述夾膜上，形成薄膜；

(3)對所述薄膜進行抽吸，使菌種緊密貼在薄膜內壁上；

(4)在薄膜上涂抹粘連劑，制成BOD生物傳感器。

2.如權利要求1所述的BOD生物傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(2)中篩選后的菌種、淀粉和聚乙烯醇的質量比為1:(0.5-1.5):(1.5-2.5)，優(yōu)選為1:(0.8-1.2):(1.8-2.4)，進一步優(yōu)選為1:1:2。

3.如權利要求1或2所述的BOD生物傳感器的制備方法，其特征在于，將制備得到的生物傳感器進行保藏；

優(yōu)選地，所述保藏的pH為7.0-7.8，優(yōu)選為7.2-7.6，更優(yōu)選為7.4-7.5；

優(yōu)選地，所述保藏的甘油的質量濃度為7-23％，優(yōu)選為9-20％；

優(yōu)選地，所述保藏的溫度為-15～-25℃，優(yōu)選為-18～-20℃。

4.如權利要求1-3之一所述的BOD生物傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述醋酸纖維素與沸水的質量比為1:(95-105)，優(yōu)選為1:(98-100)。

5.如權利要求1-4之一所述的BOD生物傳感器的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)菌種篩選：利用污染物梯度濃度平板涂布法結合平板四區(qū)劃線進行菌種的分離純化，獲得純菌種后置于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng)約24h后，震蕩離心、生理鹽水洗脫，制成濕菌體，即篩選后的菌種；

(2)制備BOD生物傳感器：將醋酸纖維素與沸水按照質量比1:(95-105)充分混勻，配制成夾膜后，室溫下冷卻；將篩選后的菌種、淀粉和聚乙烯醇按照1:(0.5-1.5):(1.5-2.5)的質量比混合均勻后涂抹在所述夾膜上，形成薄膜，對所述薄膜進行抽吸，使菌種緊密貼在薄膜內壁上，再在薄膜上涂抹粘連劑，制成BOD生物傳感器；

(3)BOD生物傳感器的保藏：將制成的BOD生物傳感器在pH7.0-7.8、甘油質量濃度為7-23％且溫度為-15～-25℃的條件下進行保藏。

6.一種如權利要求1-5之一所述的方法制備得到的BOD生物傳感器。

7.如權利要求6所述的BOD生物傳感器在水體BOD檢測方面的應用。

8.如權利要求7所述的應用，其特征在于，包括以下步驟：

根據(jù)BOD生物傳感器氧電極輸出的溶解氧降低值與待測水體BOD濃度的線性關系，得出待測水體的BOD濃度。

9.如權利要求7或8所述的應用，其特征在于，包括以下步驟：

(1)分別配置不同BOD5濃度的水體；

(2)用所述BOD生物傳感器分別測定所述不同BOD5濃度下水體的溶解氧降低值；

(3)制作水體BOD5濃度與溶解氧降低值的標準曲線；

(4)當待測水體的溶解氧值穩(wěn)定后加入所述BOD生物傳感器，待待測水體的溶解氧下降到另一穩(wěn)定值后，求得兩側溶解氧值之差，通過步驟(3)所述標準曲線得出待測水體的BOD值。

10.如權利要求9所述的應用，其特征在于，步驟(1)所述水體BOD5濃度的范圍為15-100mg/L，且水體BOD5濃度相差5-10mg/L；

優(yōu)選地，步驟(2)所述測定溶解氧降低值的具體溫度為30-35℃；

優(yōu)選地，步驟(2)所述測定溶解氧降低值的具體曝氣強度為20-25h/L。