[發明專利]一種植物基因組DNA快速提取液及基于該提取液的提取方法在審
| 申請號: | 201711181857.8 | 申請日: | 2017-11-23 |
| 公開(公告)號: | CN107841497A | 公開(公告)日: | 2018-03-27 |
| 發明(設計)人: | 李瑋瑜;路平;謝皓;南張杰;石恒華;陳洪偉;晉玉寬;王亞飛 | 申請(專利權)人: | 北京農學院 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙)11548 | 代理人: | 李靜 |
| 地址: | 102200 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 植物 基因組 dna 快速 提取 基于 方法 | ||
技術領域
本發明涉及DNA提取技術領域,具體是一種植物基因組DNA快速提取液及基于該提取液的提取方法。
背景技術
基因是是產生一條多肽鏈或功能RNA所需的全部核苷酸序列。基因支持著生命的基本構造和性能。儲存著生命的種族、血型、孕育、生長、凋亡等過程的全部信息。環境和遺傳的互相依賴,演繹著生命的繁衍、細胞分裂和蛋白質合成等重要生理過程。生物體的生、長、衰、病、老、死等一切生命現象都與基因有關。它也是決定生命健康的內在因素。
作為21世紀科技的重要發展項目,基因工程技術在植物方面應用具有以下重要意義。
1、植物基因工程技術可以實現超遠緣育種,克服不親和障礙。植物基因工程技術可以增強作物改良力度,促進品種更新換代。作物改良基本有兩方面,其中提高作物品種的光合與養分效率、病害與蟲害抗性正在成為植物基因工程的研究重點,促使作物品種適應低溫、干旱、雨澇、土壤瘠薄和鹽堿以及溫室效應等新舊災害從而提高作物產量,也已成為基因工程育種的主要內容。
2、植物基因工程技術可以拓寬應用研究,擴大生產領域。隨著轉基因植物技術日益成熟,利用植物的生物反應器作用,進行貴重藥品、人畜疫苗和精細化工等的生產,因具有成本低,競爭力強的吸引力,正在成為高技術及其產業化的新興熱門領域。現已成功地將干擾素、胰島素、多肽抗體、人血清白蛋白等基因轉給植物進行這些藥物的生產。
3、植物基因工程技術可以作為能源開發的新途徑。現在社會高速發展,但人類文明的發展卻面臨能源危機。化石燃料的不可再生性以及其帶來的環境污染以成為各國政府無法回避的事實。因此尋找一種可以代替化石燃料而且對環境影響較小的新能源已迫在眉睫。非糧生物質能的高效應用無疑是一種很好的方法,而要將生物質能高效、低廉、方便的轉化為燃料,與基因工程技術是密不可分的
4、植物基因工程技術可以導致新產業革命,帶動其他行業發展。
在植物基因工程研究過程中,如何實現植物基因組DNA的快速提取是一大研究熱點。現有的植物基因組DNA提取液普遍存在提取效果不佳、提取效率低的缺陷,已經逐漸無法滿足植物基因工程研究的需求,亟待改進。
發明內容
本發明的目的在于提供一種植物基因組DNA快速提取液及基于該提取液的提取方法,以解決上述背景技術中提出的問題。
為實現上述目的,本發明提供如下技術方案:
一種植物基因組DNA快速提取液,每10mL所述植物基因組DNA快速提取液包含以下組分:Tris-HCL緩沖液0.4-0.6mL、NaCL溶液0.70-0.80mL、蔗糖溶液1.4-1.6mL,余量為蒸餾水,其中,所述Tris-HCL緩沖液的濃度為1M,NaCL溶液的濃度為4M,蔗糖溶液的濃度為2M。
作為本發明進一步的方案:每10mL所述植物基因組DNA快速提取液包含以下組分:Tris-HCL緩沖液0.45-0.55mL、NaCL溶液0.73-0.77mL、蔗糖溶液1.45-1.55mL,余量為蒸餾水。
作為本發明再進一步的方案:每10mL所述植物基因組DNA快速提取液包含以下組分:Tris-HCL緩沖液0.5mL、NaCL溶液0.75mL、蔗糖溶液1.5mL、蒸餾水7.25mL。
作為本發明再進一步的方案:所述Tris-HCL緩沖液的pH為7.5。
基于上述植物基因組DNA快速提取液的提取方法,步驟如下:
1)配置植物基因組DNA快速提取液,備用;
2)取適量的植物嫩葉片,裝入離心管中,然后放入冰盒保存;
3)取出離心管,向離心管中加入配置好的植物基因組DNA快速提取液600-700微升,在90-98℃下恒溫水浴加熱,并在加熱期間進行多次攪拌混合;
4)將加熱后的離心管靜置,取上清液,并轉移至新的離心管中,獲得提取樣品,用于直接檢測或擴增使用。
作為本發明再進一步的方案:步驟2)中,所述離心管為2.0mL離心管。
作為本發明再進一步的方案:步驟3)中,所述植物基因組DNA快速提取液的加入量為650微升。
作為本發明再進一步的方案:步驟3)中,加熱溫度為95℃。
與現有技術相比,本發明的有益效果是:
本發明制備的植物基因組DNA快速提取液能夠實現對植物基因組DNA的快速高效的提取,提取效率高,提取效果好,有利于促進植物基因工程研究的發展,具有重要的市場價值和社會價值。本發明基于所述植物基因組DNA快速提取液的提取方法,步驟簡單,容易操作,易于推廣。
具體實施方式
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