[發(fā)明專利]用于發(fā)光免疫分析法的濃縮緩沖液及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711180582.6
• 申請日: 2017-11-23
• 公開（公告）號: CN107703291A
• 公開（公告）日: 2018-02-16
• 發(fā)明（設計）人: 李冰;彭金燕
• 申請（專利權）人: 中山市創(chuàng)藝生化工程有限公司
• 主分類號: G01N33/532
• 分類號: G01N33/532;G01N21/76
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司44205
• 代理人: 丁佳佳

技術領域

本發(fā)明涉及體外診斷技術領域，具體涉及一種用于發(fā)光免疫分析法的濃縮緩沖液及其制備方法，更具體地涉及用于雅培免疫分析儀i2000用濃縮緩沖液及其制備方法。

背景技術

發(fā)光免疫分析法是將發(fā)光反應與免疫反應相結(jié)合而產(chǎn)生的一種免疫分析法。美國雅培i2000全自動化學發(fā)光免疫分析儀，同時可檢測25項，每小時可完成200個測試，大大提高了工作效率和檢測的準確度與靈敏度，減少人為操作誤差。該儀器采用智能化分步?jīng)_洗，使用磷酸鹽緩沖液和表面活性劑，徹底消除試驗攜帶問題，提高了測試結(jié)果的可信度。通過壓力檢測的凝塊檢測技術可確保樣本的前處理質(zhì)量。

雅培免疫分析儀目前在國內(nèi)外擁有很好的市場占有率，i2000濃縮緩沖液作為電化學發(fā)光分析儀的系統(tǒng)試劑市場銷售量很大，目前該產(chǎn)品基本被雅培公司所壟斷，價格高，導致醫(yī)療成本高。

因此有必要研發(fā)一種用于發(fā)光免疫分析法的濃縮緩沖液，其可以用作雅培免疫分析儀i2000的濃縮緩沖液，可以替代雅培公司生產(chǎn)的濃縮緩沖液，在保證測試效果的同時降低使用成本，節(jié)約了人們的醫(yī)療開支，促進了產(chǎn)品的出口貿(mào)易，能夠?qū)︶t(yī)院檢驗科免疫檢測的發(fā)展起到一定的促進作用，并為其他免疫緩沖液的研究奠定基礎。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種用于發(fā)光免疫分析法的濃縮緩沖液，其可以用作雅培免疫分析儀i2000的濃縮緩沖液，其具有良好的測試效果同時降低了成本。

本發(fā)明主要解決的技術問題是研制出雅培免疫分析儀i2000用濃縮緩沖液替代試劑。本發(fā)明采用的技術方案是：一種用于發(fā)光免疫分析法的濃縮緩沖液，每升濃縮緩沖液中含有5-20g Brij，1-10g OP-10，10-30g磷酸氫二鈉，1-10g磷酸二氫鈉，60-100g氯化鈉，1-5g疊氮化鈉，余量為去離子水。

優(yōu)選的，每升濃縮緩沖液中含有8-15g Brij，3-8g OP-10，13-25g磷酸氫二鈉，2-6g磷酸二氫鈉，65-90g氯化鈉，2-3g疊氮化鈉，余量為去離子水。

優(yōu)選的，每升濃縮緩沖液中含有15g Brij，5g OP-10，25g磷酸氫二鈉，2.8g磷酸二氫鈉，70g氯化鈉，3g疊氮化鈉，余量為去離子水。

Brij是一種非離子型表面活性劑，可以從市場上購買。

優(yōu)選的，所述濃縮緩沖液的pH值為6.5-7.2，電導率為100-130ms/cm。

優(yōu)選的，所述濃縮緩沖液的滲透壓為2700-3000mOsm/kg。

本發(fā)明還提供了用于發(fā)光免疫分析法的濃縮緩沖液的制備方法，包括以下步驟：

1)按上述配方準確稱取各組分；

2)在1000mL燒杯中依次加入稱取好的Brij56、OP-10、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、氯化鈉，加入適量的去離子水，加熱攪拌，使其完全溶解；

3)物料完全溶解后，降溫至40℃以下，加入疊氮化鈉，攪拌均勻，定容到1L的體積，測定溶液的pH值、電導率、滲透壓，過濾，即得用于發(fā)光免疫分析法的濃縮緩沖液。

優(yōu)選的，步驟2)中，加熱攪拌中控制溫度為60-90℃。

化學發(fā)光免疫分析(CLIA)檢測原理，是一種以發(fā)光物質(zhì)代替放射性核素或酶作為標記物直接標記抗體或抗原的一類免疫分析法。常用的發(fā)光劑為丫啶酯類。這類標記物在化學結(jié)構(gòu)上有產(chǎn)生發(fā)光的特殊基團，在發(fā)光免疫分析過程中直接參與發(fā)光反應。這類物質(zhì)沒有本底發(fā)光，在反應中能用于檢測低濃度或微量濃度的樣品。干擾作用也較少且標記和偶聯(lián)后穩(wěn)定、理化性質(zhì)和免疫特性不改變。是一類發(fā)光效率很高的發(fā)光劑。可與抗體(或抗原)結(jié)合，生成具有化學發(fā)光活性強，免疫反應特異性高的標記抗體。檢測技術中檢測小分子抗原使用競爭法；檢測大分子抗原用夾心法。

本發(fā)明的有益效果是：1)本發(fā)明的用于發(fā)光免疫分析法的濃縮緩沖液配制方法簡單，原料易得、安全，對操作人員和環(huán)境不存在危害；2)與進口的濃縮緩沖液對比相關系數(shù)R值達到0.99以上，體現(xiàn)為較好的相關性；3)生產(chǎn)成本低，預計其銷售價格比市場同等原裝試劑的價格降低達30％左右，有利于雅培免疫分析儀i2000用濃縮緩沖液的大規(guī)模推廣和應用。

附圖說明

圖1是本發(fā)明實施例1試劑與雅培試劑分別測試的HGB項目的測試結(jié)果對比相關性；

圖2是本發(fā)明實施例1試劑與雅培試劑分別測試的Prog項目的測試結(jié)果對比相關性；

圖3是本發(fā)明實施例1試劑與雅培試劑分別測試的TP項目的測試結(jié)果對比相關性；