[發(fā)明專利]用于α-羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒的穩(wěn)定劑及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711180286.6
• 申請(qǐng)日: 2017-11-23
• 公開（公告）號(hào): CN107991252B
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃小全;崔海林;曾曉君;黃清媚
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中山市創(chuàng)藝生化工程有限公司
• 主分類號(hào): G01N21/31
• 分類號(hào): G01N21/31;G01N31/10;G01N35/00
• 代理公司: 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44205
• 代理人: 丁佳佳

本發(fā)明公開了一種用于α?羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒的穩(wěn)定劑及其制備方法，屬于體外診斷領(lǐng)域。所述穩(wěn)定劑包括下列質(zhì)量百分比的組分：0.1～0.5％乙二胺四乙酸二鈉、1～3％蔗糖、1～2％Triton X?100、3～5％CCD、1～2％甘油，0.1～0.2％液體生物防腐劑Proclin300，余量水。本發(fā)明的穩(wěn)定劑用于α?羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒中，確保了試劑盒檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，并且使α?羥丁酸脫氫酶試劑盒更為穩(wěn)定，可有效延長試劑盒的保存時(shí)間。此外，該穩(wěn)定劑成本低廉，配制簡(jiǎn)單，值得進(jìn)一步廣泛推廣。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于體外診斷領(lǐng)域，具體涉及一種用于α-羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒的穩(wěn)定劑及其制備方法。

背景技術(shù)

α-羥丁酸脫氫酶(α-HBDH)是心肌酶譜中的一種酶，在哺乳動(dòng)物體內(nèi)普遍存在，主要分布在心肌紅細(xì)胞、白細(xì)胞及腎臟等組織或器官中。α-羥丁酸脫氫酶(α-HBDH)不是一個(gè)獨(dú)立的特異酶，而是含有H亞基的乳酸脫氫酶同工酶LDH1和LDH2的總稱。測(cè)定α- 羥丁酸脫氫酶，其實(shí)際反映的是乳酸脫氫酶同工酶LDH1和LDH2的活性，對(duì)診斷心肌疾病和肝病有重要意義。α-HBDH活性升高常見于急性心肌梗塞、骨骼肌損傷、急性肝炎、白血病及惡性腫瘤等。

目前用于α-羥丁酸脫氫酶的檢測(cè)方法主要有酶學(xué)比色法、連續(xù)監(jiān)測(cè)法等。目前關(guān)于穩(wěn)定的α-羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒的報(bào)道有限，僅有專利CN201610273293.X、CN201410404609.5和CN201610129718.X對(duì)該試劑盒進(jìn)行報(bào)道。目前市面上的試劑盒存在穩(wěn)定性不好，準(zhǔn)確度不高的問題。因此，研究一種配制簡(jiǎn)單、成本低廉、針對(duì)α-羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒有穩(wěn)定效果的穩(wěn)定劑，制備得到穩(wěn)定的α-羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒，具有相當(dāng)?shù)氖袌?chǎng)價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種用于α-羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒的穩(wěn)定劑及其制備方法。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種α-羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒。

本發(fā)明的再一目的在于提供一種測(cè)定α-羥丁酸脫氫酶的方法。

本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：

一種用于α-羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒的穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑包括下列質(zhì)量百分比的組分： 0.1～0.5％乙二胺四乙酸二鈉、1～3％蔗糖、1～2％Triton X-100、3～5％CCD、1～2％甘油， 0.1～0.2％液體生物防腐劑Proclin300，余量水。

優(yōu)選的，所述穩(wěn)定劑包括下列質(zhì)量百分比的組分：0.2～0.4％乙二胺四乙酸二鈉、1～2％蔗糖、1～1.5％Triton X-100、3～4％CCD、1～1.5％甘油，0.2％液體生物防腐劑Proclin300，余量水。

優(yōu)選的，所述穩(wěn)定劑包括下列質(zhì)量百分比的組分：0.2％乙二胺四乙酸二鈉、1％蔗糖、1％ Triton X-100、3％CCD、1％甘油，0.2％液體生物防腐劑Proclin300，余量水。

優(yōu)選的，所述α-羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒包括第一試劑和第二試劑，所述第一試劑包括： Trisbase 12.00g/L、鹽酸81.00g/L、α-酮丁酸0.85g/L和余量水；第二試劑包括：Trisbase 3.60 g/L、鹽酸0.650g/L、β-NADH 1.00g/L和余量水。

優(yōu)選的，穩(wěn)定劑在α-羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒的試劑中的使用量為1％v/v-3％v/v。

由于α-羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒的原理是α-酮丁酸在α-羥丁酸脫氫酶的作用下和β -NADH反應(yīng)，分解生成α-羥基丁酸和NAD⁺，在340nm處NADH吸光度的下降速率與 HBDH活性成正比。但是由于試劑盒中包含的NADH本身性質(zhì)不穩(wěn)定，極易被氧化不利于保存，導(dǎo)致α-羥丁酸脫氫酶試劑盒缺乏穩(wěn)定性，保存時(shí)間短，直接影響到臨床使用。