[發明專利]煙曲霉SQH4及在生物轉化法制備花旗松素中的應用

有效

• 申請號: 201711178892.4
• 申請日: 2017-11-23
• 公開（公告）號: CN107893033B
• 公開（公告）日: 2020-08-21
• 發明（設計）人: 梅建鳳;陳翔;應國清;沈琪華;易喻;陳才軍;李彬
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學;舟山市食品藥品檢驗檢測研究院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P17/06;C12R1/68
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

1.一種煙曲霉（Aspergillus fumigatus）SQH4，保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號：GDMCC No: 60239，保藏日期2017年9月15日，地址：廣東省廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓；郵編：510075。

2.一種權利要求1所述煙曲霉SQH4在生物轉化落新婦苷制備花旗松素中的應用。

3.如權利要求2所述的應用，其特征在于所述的應用為：以煙曲霉SQH4經發酵培養后的發酵液或發酵液離心收集的濕菌體用pH6.0~6.5磷酸緩沖液懸浮制成的菌懸液為生物催化劑和反應介質，以落新婦苷為底物，以甲醇為助溶劑構成轉化體系，于30～35℃、200～250r/min恒溫振蕩條件下進行轉化反應，轉化反應結束后，轉化液經分離獲得花旗松素。

4.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述轉化體系中濕菌體用量以干重計為3～4g/L。

5.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述轉化體系中所述底物落新婦苷的終濃度為0.01～3 g/L，所述甲醇的體積終濃度為0.1%～1%。

6.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述發酵液按如下方法制備：將煙曲霉SQH4接種至發酵培養基，于28～30℃、200～250 r/min恒溫振蕩條件下培養2～3 d，獲得發酵液；所述發酵培養基終濃度組成為：蔗糖10～20 g/L，蛋白胨5～8 g/L，酵母粉3～5 g/L，KH₂PO₄5 g/L，NaCl 5 g/L，MgSO₄·7H₂O 1 g/L，MnSO₄·H₂O 1 g/L，溶劑為自來水，初始pH 6.0～7.0。

7.如權利要求6所述的應用，其特征在于所述煙曲霉SQH4發酵培養方法為：

（1）活化培養：將煙曲霉SQH4接種于PDA平板培養基，于28～30℃恒溫培養2～3 d，獲得煙曲霉SQH4孢子；所述的PDA平板培養基終濃度組成為：馬鈴薯200 g/L，葡萄糖20 g/L，瓊脂20 g/L，溶劑為自來水，pH自然；

（2）種子擴大培養：挑取步驟（1）活化培養后煙曲霉SQH4孢子接種至種子培養基中，于28～30℃、200～250 r/min恒溫振蕩條件下培養2～3 d，得種子液；所述種子培養基組成為：蔗糖10 g/L，蛋白胨5 g/L，酵母粉3 g/L，KH₂PO₄ 5 g/L，NaCl 5 g/L，MgSO₄·7H₂O 1 g/L，MnSO₄·H₂O 1 g/L，溶劑為自來水，初始pH 6.5；

（3）發酵培養：用步驟（1）活化培養后煙曲霉SQH4孢子，或步驟（2）制備的種子液按體積濃度3%～6%的接種量接入發酵培養基，于28～30℃、200～250 r/min恒溫振蕩條件下培養2～3 d，獲得發酵液；所述發酵培養基終濃度組成為：蔗糖10～20 g/L，蛋白胨5～8 g/L，酵母粉3～5 g/L，KH₂PO₄ 5 g/L，NaCl 5 g/L，MgSO₄·7H₂O 1 g/L，MnSO₄·H₂O 1 g/L，溶劑為自來水，初始pH 6.0～7.0。

8.如權利要求6或7所述的應用，其特征在于所述發酵培養基終濃度組成為：蔗糖20 g/L，蛋白胨8 g/L，酵母粉5 g/L，KH₂PO₄ 5 g/L，NaCl 5 g/L，MgSO₄·7H₂O 1 g/L，MnSO₄·H₂O1 g/L，溶劑為自來水，初始pH 6.0。