[發明專利]一種生物體中微塑料的檢測方法

有效

• 申請號: 201711178353.0
• 申請日: 2017-11-23
• 公開（公告）號: CN108181154B
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發明（設計）人: 李承勇;閆協民;呂露露;孫省利;千忠吉;周春霞;洪鵬志
• 申請（專利權）人: 廣東海洋大學;廣東海洋大學深圳研究院
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30;G01N1/34;G01N1/40;G01N15/14;G01N21/3563;G01N23/2202
• 代理公司: 北京鍾維聯合知識產權代理有限公司 11579
• 代理人: 羅銀燕

本發明涉及一種檢測生物體樣品中微塑料的方法，包括：S110，消解：將生物體樣品用濃度為50?70％的硝酸在室溫下浸泡6?18小時，加熱到60?95℃并維持1?4小時，得到消解的生物體樣品；S120，脫脂：將步驟S110中得到的消解的生物體樣品趁熱用60?95℃的表面活性劑溶液沖洗和抽濾，得到脫脂的微塑料；S130，將步驟S120中得到的脫脂的微塑料用60?95℃的水沖洗和抽濾，得到清洗的微塑料。本發明的方法能夠快速、準確地對進入生物體中的微塑料進行定性和定量檢測，實現了檢測微塑料在生物體內的富集和分布的目的，為環境監測提供了實用的工具。

技術領域

本發明屬于環境污染物檢測領域，尤其是涉及一種生物體中微塑料的檢測方法，特別是一種利用熒光顯微鏡計數的方法檢測生物體中微塑料的方法。

背景技術

塑料由于其成本低，化學性質穩定，抗沖擊性能好等特點，在日常生活中被大量使用，但因其難以降解，加劇了環境污染，海洋塑料污染情況尤為突出。海水中的塑料污染物在光、熱、生物等因素逐漸降解成微小顆粒，稱之為微塑料。一旦水中的微塑料污染升高，就會對海洋生物造成毒理學反應，例如誘發遺傳畸變，生殖異常，激素紊亂或組織出現毒理學變化等。研究牡蠣中微塑料的成分和含量，不僅可以闡明其污染機制，更能為海洋食品安全提供保障。

因此，仍然需要開發新的檢測生物體中微塑料的方法。

發明內容

為了解決上述現有技術中的問題，本發明提供了以下技術方案。

本發明的一個方面提供一種檢測生物體樣品中微塑料的方法，包括：

S100，從生物體樣品中提取微塑料的步驟，包括：

S110，消解：將生物體樣品用濃度為50-70％的硝酸在室溫下浸泡6-18小時，加熱到60-95℃并維持1-4小時，得到消解的生物體樣品；

S120，脫脂：將步驟S110中得到的消解的生物體樣品趁熱用60-95℃的表面活性劑溶液沖洗和抽濾，得到脫脂的微塑料；

S130，將步驟S120中得到的脫脂的微塑料用60-95℃的水沖洗和抽濾，得到清洗的微塑料。

進一步地，步驟S100還包括：將得到的清洗的微塑料加入水中，然后超聲處理，得到微塑料懸浮液。

進一步地，所述抽濾是用微孔濾膜進行的抽濾。

進一步地，步驟S100還包括：

S140，分級：用密度不同的溶液將微塑料按密度分級；優選地，所述溶液選自密度為1g/cm³的水、密度為1.19g/cm³的飽和氯化鈉水溶液、密度為0.91g/cm³的58.4％乙醇水溶液、密度為0.925g/cm³的55.4％乙醇水溶液、以及密度為1.27g/cm³的27.5％氯化鈣水溶液。

進一步地，所述表面活性劑是十二烷基硫酸鈉。

進一步地，所述檢測生物體中微塑料的方法，還包括：

S200，將步驟S100中得到的清洗的微塑料進行染色，包括：用氨基硅氧烷與微塑料接觸以便得到具有氨基的微塑料，然后用異硫氰酸熒光素與具有氨基的微塑料接觸得到染色的微塑料。

進一步地，在步驟S200中，所述氨基硅氧烷為(3-氨丙基)三甲氧基硅烷，按照19:1的比例將甲醇和(3-氨丙基)三甲氧基硅烷加入微塑料中以便得到具有氨基的微塑料。

進一步地，所述檢測生物體中微塑料的方法，還包括：

S300，用顯微鏡觀察步驟S200中得到的染色的微塑料，并對微塑料的顆粒進行計數。

進一步地，所述檢測生物體中微塑料的方法，還包括：