[發(fā)明專利]一種提取菌膠團(tuán)胞外聚合物的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711167014.2
• 申請(qǐng)日: 2017-11-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108129547B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-01-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姬丹丹;臧立華;毛家明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 齊魯工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K1/14
• 分類號(hào): C07K1/14;C12N15/10;C08B37/00
• 代理公司: 濟(jì)南竹森知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 37270
• 代理人: 朱家富;孫憲維

1.一種胞外聚合物提取液，由下列組分組成：按重量比為，二氧化鈦5-6份、3.6%的甲醛溶液5-6份、pH為5.5的乙酸-乙酸鉀溶液10-15份、75目石英砂20-25份。

2.如權(quán)利要求1所述的胞外聚合物提取液的使用方法，污泥中添加胞外聚合物提取液的量為：40-52g/L污泥。

3.一種高效提取菌膠團(tuán)胞外聚合物的方法，采用以下步驟：

（1）清洗

原位獲取污泥樣品，測(cè)定其體積，將濾紙潤(rùn)濕后覆蓋于布氏漏斗上，將污泥放置在濾紙上，打開(kāi)抽濾機(jī)，在漏斗內(nèi)加入氯化鈉溶液對(duì)污泥進(jìn)行清洗，直到漏下的溶液變澄清；

（2）離心法提取黏液層

處理后的污泥加入氯化鈉溶液恢復(fù)原體積，分裝入離心管內(nèi)，在低轉(zhuǎn)速的離心機(jī)內(nèi)離心，提取上清液為黏液層；所述離心機(jī)的離心速度為550-650r/min，離心時(shí)間為10-15min，離心溫度為28℃；

（3）高速離心法提取松散結(jié)合性胞外聚合物（LB-EPS）

使用氯化鈉溶液將離心管污泥恢復(fù)至原體積；使用120W超聲將污泥處理1.5-2min；使用高速離心機(jī)內(nèi)在低溫、高速的條件下離心，提取上清液為松散結(jié)合型胞外聚合物（LB-EPS）；離心機(jī)的溫度為3-5℃，離心速度為5000-6000r/min，離心時(shí)間為8-10min；

（4）甲醛—乙酸—乙酸鉀加熱法提取緊密結(jié)合型胞外聚合物（TB-EPS）

將步驟（3）中獲得的污泥全部加入燒杯中，加入氯化鈉溶液恢復(fù)至原體積；加入提取液，將污泥放入震蕩培養(yǎng)箱內(nèi)以25-27℃、150-200r/min震蕩培養(yǎng)15-20min，取出；所述提取液為：二氧化鈦5-6g/L污泥、3.6%的甲醛溶液5-6mL/L污泥、pH為5.5的乙酸-乙酸鉀溶液10-15mL/L污泥、75目石英砂20-25g/L污泥；

（5）將燒杯內(nèi)污泥水浴加熱20min，冷卻后分裝于離心管內(nèi)，在1-4℃的條件下低溫高速離心20-22min；提取上清液為（TB-EPS）；離心機(jī)轉(zhuǎn)速為8000-9000r/min，離心時(shí)長(zhǎng)為18-20min；

（6）將提取的黏液層、LB-EPS與TB-EPS合并混勻，使用濾膜過(guò)濾，即為胞外聚合物提取液；提取液應(yīng)在1-4℃條件下冷藏保存。

4.如權(quán)利要求3所述的高效提取菌膠團(tuán)胞外聚合物的方法，其特征在于，步驟（4）中，pH為5.5的乙酸-乙酸鉀溶液的配制方法為：將41g乙酸鉀與29.5mL冰乙酸分別定容至500mL，將乙酸鉀溶液與乙酸溶液按照9:1的體積比混勻，密封保存，即為pH=5.5的乙酸鉀溶液。

5.如權(quán)利要求3所述的高效提取菌膠團(tuán)胞外聚合物的方法，其特征在于，步驟（1）所述的氯化鈉溶液濃度為0.50%-0.80%；抽濾機(jī)的壓力為0.03-0.04MPa；步驟（3）、（4）中所述的氯化鈉溶液濃度為0.05%-0.10%。

6.如權(quán)利要求3所述的高效提取菌膠團(tuán)胞外聚合物的方法，其特征在于，步驟（5）中的水浴加熱溫度為60-70℃。

7.如權(quán)利要求3所述的高效提取菌膠團(tuán)胞外聚合物的方法，其特征在于，步驟（6）中過(guò)濾使用0.40-0.45μm水系濾膜加壓過(guò)濾。