[發明專利]抗DR5的抗體及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201711166864.0
• 申請日: 2017-11-21
• 公開（公告）號: CN109810194B
• 公開（公告）日: 2020-11-03
• 發明（設計）人: 萬曉春;陳倩;夏蒙;劉綠艷;李俊鑫;張青梅
• 申請（專利權）人: 深圳市中科艾深醫藥有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;A61K48/00;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 深圳中一聯合知識產權代理有限公司 44414
• 代理人: 李艷麗

本發明具體涉及一種抗DR5的抗體及其制備方法和應用。抗DR5的抗體包括恒定區和可變區，該可變區包括重鏈可變區和輕鏈可變區，重鏈可變區包括以下3個CDR：SEQ ID NO:1所示的CDR1，SEQ ID NO:2所示的CDR2，和SEQ ID NO:3所示的CDR3；輕鏈可變區包括以下3個CDR：SEQ ID NO:4所示的CDR1’，SEQ ID NO:5所示的CDR2’，和SEQ ID NO:6所示的CDR3’。該抗體具有獨特的抗體可變區序列，可與抗原DR5特異結合，與DR4沒有交叉反應，具有很高的親和力和生物活性，其不需添加交聯劑就能誘導細胞凋亡，可以與TRAIL聯合協同誘導細胞凋亡。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及一種抗DR5的抗體及其制備方法和應用。

背景技術

根據世界衛生組織的研究顯示，自1990年到2013年，癌癥死亡率從12％上升至15％，已成為僅次于心血管疾病的高死亡率疾病，預測2020年全球癌癥新發病例將達到2000萬，因癌癥死亡達1200萬人；因此，人類亟需開發新的癌癥治療藥物。

誘導癌細胞凋亡是多種癌癥治療方法之一，腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(Tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand，TRAIL)能與死亡受體(Death receptor,DR)結合誘導癌細胞凋亡而不會損傷正常組織，因此TRAIL-DR成為抗腫瘤抗體藥物研發的熱門靶點。TRAIL又稱為Apo2L，是Wiley 1995年首次發現的，是繼TNF、FasL之后的第三個TNF家族的凋亡分子。TRAIL是一種Ⅱ型跨膜蛋白，胞外區可以被金屬蛋白酶切下形成可溶性TRAIL，TRAIL在正常人體的各種組織內有廣泛的表達，通過與靶細胞表面的受體特異性結合而發揮作用。目前，在人類中已發現5種TRAIL受體：①2個死亡受體DR4(death receptor 4)和DR5(death receptor 5)；②2個誘騙受體DcR1(decoy receptorl)和DcR2(decoy receptor 2)；③1個可溶性受體OPG(osteoprotegerin)。其中，DR4和DR5的胞內區擁有完整的死亡結構域，能夠誘導細胞凋亡，而DcR1卻沒有死亡結構域，DcR2也只有一個截短的死亡結構域，均不能傳遞凋亡信號，OPG是這五種受體中唯一的可溶性蛋白，它主要參與骨骼密度的調節。在37℃條件下，TRAIL與DR5結合的親和力高于其它膜表達的TRAIL受體；因此，在生理狀態下，TRAIL更傾向與DR5結合，尤其當內源性TRAIL有限時。DR5高表達于人類癌癥，包括結腸癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、非小細胞肺癌，在正常細胞無或低表達。死亡受體DR4或DR5與TRAIL結合后，形成配體/受體三聚復合物，誘導死亡受體胞漿段死亡結構域(death domain，DD)與Fas相關死亡結構域蛋白(Fas-associated deathdomain protein，FADD)C端DD結合，而FADD以其N端死亡效應結構域(death effectordomain，DED)與procaspase-8結合，形成DR4/DR5/FADD/procaspase-8死亡誘導信號復合物(death-inducing signaling complex，DISC)，促使其中procaspase-8自身催化成有活性的caspase-8，caspase-8活化后，通過2條信號途徑傳遞凋亡信號(非線粒體依賴途徑和線粒體依賴途徑)。