[發(fā)明專利]一種復(fù)合微生物菌劑的制備方法和用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711162575.3
• 申請日: 2017-11-21
• 公開（公告）號: CN109810911A
• 公開（公告）日: 2019-05-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 徐曉慶;孫春雁;宮本永
• 申請（專利權(quán)）人: 乳山韓威生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05G3/00;C05F11/08;C12R1/125;C12R1/10;C12R1/07
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本發(fā)明公開了一種含有枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌的復(fù)合微生物菌劑，按照各自發(fā)酵液合理配比，達(dá)到各種功能菌共生共存，其到復(fù)合作用的目的，應(yīng)用于作物增加產(chǎn)量，該產(chǎn)品可廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)種植上，具有優(yōu)良的綜合效益。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及到微生物發(fā)酵工程領(lǐng)域，具體涉及到由枯草芽孢桿菌、地衣芽胞桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌合理配比制備農(nóng)用微生物菌劑，屬于農(nóng)業(yè)投入品，微生物肥料。

背景技術(shù)

微生物菌劑是以微生物的生命活動提供作物所需特定肥料效應(yīng)的一種制品，屬于生物肥料的一種，微生物菌劑作為活體肥料，主要依靠它含有特定的功能微生物來完成的，這些微生物在進(jìn)行旺盛的繁殖和新陳代謝時，把自然界無法利用的物質(zhì)轉(zhuǎn)化成可被植物利用的物質(zhì)，并且不斷積累有益代謝的產(chǎn)物，促進(jìn)作物的良性生長。

隨著土壤污染、土壤酸化越來越嚴(yán)重，土壤修復(fù)勢在必行，微生物菌劑則是土壤修復(fù) 劑中的利刃。然而不同的微生物具有不同的功能性，單獨使用只能實現(xiàn)單一功效，不同種類 混合使用，由于微生物生長過程中存在抗性，會導(dǎo)致個別功能性菌競爭喪失，無法生長，便 達(dá)不到預(yù)期的效果，如何讓幾種常見的功能微生物，合理的混合，使其在使用中互不干擾、 和平共處、是復(fù)合微生物緊急發(fā)展的重中之重。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種具有較好肥效的微生物菌劑，為達(dá)到上述目的，本發(fā)明所述的各種微生物菌劑合理配比成一種農(nóng)用復(fù)合微生物菌劑。

本發(fā)明是由枯草芽孢桿菌、地衣芽胞桿菌和膠凍樣類芽孢桿菌，按照發(fā)酵液中有效活菌數(shù)按照重量進(jìn)行配比，得到復(fù)合微生物菌劑的有效活菌，不低于1.0×109CFU/ml。

本發(fā)明的農(nóng)用復(fù)合微生物菌劑的制備方法，其中所述的3種菌種復(fù)壯后接種到種子培養(yǎng)基中，生長至對數(shù)生長期后，分別接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，得到芽孢轉(zhuǎn)化率達(dá)到90%以上，按需有效活菌數(shù)的比例，進(jìn)行復(fù)配。

本發(fā)明的農(nóng)用復(fù)合微生物菌劑，由3種功能性微生物復(fù)合而成，具有明顯的解磷、解鉀，固氮的功能，同時可分泌多種作物刺激素和殺菌物質(zhì)，通過田間肥效實驗表明，對多種作物均有較明顯的增產(chǎn)提質(zhì)的作用。

本發(fā)明通過3種微生物獨立進(jìn)行發(fā)酵，將各自的發(fā)酵液按照3：3：4的配比，添加適量保護(hù)劑制得復(fù)合微生物的菌劑。

具體實施方式：

下面結(jié)合實施例，對本發(fā)明的具體實施方式進(jìn)一步詳細(xì)描述，以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。

實施例一，本發(fā)明的枯草芽孢桿菌、地衣芽胞桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌的發(fā)酵工藝條件的研究。

1.枯草芽孢桿菌、（CGMCC NO、9269）發(fā)酵液的制備：在無菌室中，用接種針從菌種保存管中蘸出少許菌種，涂布在預(yù)先制備好的平板上，在34℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2-3天，菌落成乳白色，附著在培養(yǎng)基表面，挑取單菌落，制備茄子瓶斜面，得斜面菌苔成熟后，用生理鹽水洗下，進(jìn)行搖瓶菌種的活化，將活化好的種子轉(zhuǎn)接到一級發(fā)酵瓶中，培養(yǎng)10h，達(dá)到對數(shù)生長期后，轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐中，接種量為10%，通氣攪拌培養(yǎng)24h左右，待鏡檢芽孢轉(zhuǎn)化率大于90%后，停止發(fā)酵。

發(fā)酵及種子的培養(yǎng)基配方為：魚粉5g、淀粉10g、葡萄糖1g 、KH2PO4 0.4g、MgSO40.75g、 CaCO3 5g、花生餅粉20g、泡敵0.01g 蒸餾水1000mL ，按照比例配置液體培養(yǎng)基。

2.地衣芽胞桿菌（CGMCC NO 1.0265）在無菌室中，用接種針從菌種保存管中蘸出少許菌種，涂布在預(yù)先制備好的平板上，在34℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2-3天，菌落成灰白色，菌體可生長到培養(yǎng)基內(nèi)部，挑取單菌落，制備茄子瓶斜面，得斜面菌苔成熟后，將培養(yǎng)基挖下，放入滅菌好的搖瓶中，進(jìn)行搖瓶菌種的活化，將活化好的種子轉(zhuǎn)接到一級發(fā)酵瓶中，培養(yǎng)15h，達(dá)到對數(shù)期后，轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐中，接種量為10%,通氣攪拌培養(yǎng)24h左右，待鏡檢芽孢轉(zhuǎn)化率大于90%后，停止發(fā)酵。