[發明專利]一種微生物源抗菌肽添加劑的綠色高效提取制備方法

有效

• 申請號: 201711158175.5
• 申請日: 2017-11-20
• 公開（公告）號: CN107936087B
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 寧亞維;賈英民;王志新;姚歡
• 申請（專利權）人: 河北科技大學
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;A23K20/147;A01N63/50;A01P1/00;A01P3/00
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;姚自奇

本發明涉及一種微生物源抗菌肽綠色高效提取制備方法，屬于添加劑技術領域。本發明采用谷物加工副產物米糠作為吸附劑，從微生物發酵液中吸附抗菌肽，然后經干燥、粉碎等工藝制備米糠抗菌肽添加劑。米糠吸附抗菌肽的較適工藝條件為：吸附溫度25?65℃，吸附pH 5?9，米糠添加量20?100g/L，吸附時間30?180min。在此工藝條件下，抗菌肽提取率可以達到80％以上，米糠抗菌肽的效價可以達到2.4×10⁴AU/g以上。該方法具有操作簡單、提取率高、成本低廉、綠色環保等優點。所制備抗菌肽米糠產品屬于天然抗菌劑，可用作食品防腐劑、飼料添加劑、生物農藥，具有綠色安全、不易產生耐藥性等優點。

技術領域

本發明涉及一種利用谷物加工副產物米糠從發酵液中高效吸附提取抗菌肽的方法，屬于生物工程技術領域。

背景技術

抗菌肽為一類具有抑菌活性的多肽物質，具有抑菌譜廣、穩定性好、安全性高等優點。截止到2017年11月，抗菌肽數據庫(APD)收錄的抗菌肽已有2838種。其中，76.43％來源于動物，12.09％來源于植物，11.52％來源于微生物。動物源抗菌肽數量最多，但成本較高。微生物源抗菌肽因為具有發酵周期短、生產成本低、可大規模制備等優點，具有良好的工業化生產前景。然而，目前微生物源抗菌肽的提取制備方法大多采用傳統的硫酸銨沉淀耦合色譜分離等方法，提取制備步驟較為繁瑣，導致工業化成本較高。

米糠為稻谷和粟米等加工的副產物，主要是由種皮、外胚乳、糊粉層和胚構成，富含油脂、蛋白質、礦物質、維生素等多種營養素和生育酚、脂多糖、谷維素、二十八烷醇、α-硫酸鋅、角鯊烯、神經酰胺等多種天然抗氧化及生理活性物質，被譽為“天賜營養源”。我國米糠資源量巨大，僅稻谷米糠年產量就已超過1400萬噸(居世界之首)，然而我國米糠主要用作動物飼料，僅有少量用于制備可食用產品如(米糠油、米糠蛋白、米糠纖維等)，與美國、日本等國家相比資源利用率偏低。因此，米糠作為一種廉價但營養價值豐富的稻谷加工副產品具有很廣闊的開發利用前景。

發明內容

本發明申請人團隊針對微生物源抗菌肽提取工藝存在操作步驟復雜、成本高昂的問題結合米糠作為谷物副產物具有的營養價值高、富含纖維素的優點，經過長期研究開發了米糠作為吸附劑從微生物發酵液中高效快速提取抗菌肽制備抗菌肽添加劑的技術。該抗菌肽添加劑制備技術采用米糠吸附提取后，無需進行解吸附，操作步驟簡單、抗菌肽提取效率高，且具有較好的營養價值。整個提取制備過程綠色環保不需要使用任何有機溶劑、緩沖鹽等。因此，該米糠抗菌肽添加劑制備工藝具有較高的工業化應用潛力。

本發明的目的在于提供一種微生物源抗菌肽添加劑的綠色高效提取制備方法，此方法能夠快速、高效、綠色制備抗菌肽添加劑。

本發明的技術方案如下：

一種微生物源抗菌肽添加劑的綠色高效提取制備方法，包括：將米糠加入抗菌肽發酵液(優選上清液)中，待米糠充分吸附抗菌肽后，過濾，干燥，粉碎，即得米糠抗菌肽添加劑。

進一步地，預先將米糠水洗去除雜質，干燥后過50-100目篩后，備用。

進一步地，所述米糠包括粟糠(細糠和粗糠)、稻谷糠(細糠和粗糠)等中的一種或幾種。

進一步地，是將米糠加入抗菌肽發酵液的上清液中。

進一步地，將抗菌肽發酵液滅菌后，離心除去菌體及顆粒物，收集得上清液。

所述滅菌可用本領域常規方法，例如將抗菌肽發酵液經過121℃，15-20min滅菌處理。

所述抗菌肽發酵液可用本領域常規方法制備。

進一步地，所述抗菌肽發酵液為側孢短芽孢桿菌(Brevibacillus laterosporus)抗菌肽發酵液。

本發明所述各微生物均為已知菌種，均可市售購得。