[發明專利]水稻細胞分裂素氧化/脫氫酶基因OsCKX4的編碼序列及其應用

在審

• 申請號: 201711149105.3
• 申請日: 2017-11-18
• 公開（公告）號: CN108004255A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發明（設計）人: 明鳳;毛嬋娟;何建美;丁佳琳;呂波;張彬
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: C12N15/53
• 分類號: C12N15/53;C12N9/06;C12N15/11;C12Q1/6858;C12Q1/6851;C12Q1/6895;A01H5/00;A01H6/46
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 陸飛;陸尤

1. 一種分離出的DNA分子，其特征在于，為從水稻中克隆出的基因，記為OsCKX4，全長2842bp，其中開放閱讀框為1590bp，其核苷酸序列為SEQ ID NO.1。

2. 一種如權利要求1所述的基因OsCKX4編碼的蛋白質分子，其特征在于，該序列編碼529個氨基酸殘基，分子量58.43kDa，等電點為7.8，氨基酸序列為SEQ ID NO.2。

3. 一對用于調取獲得水稻樣品中基因OsCKX4的引物序列，其特征在于，根據權利要求1所述基因OsCKX4設計，序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。

4. 一種檢測水稻基因OsCKX4 mRNA表達模式的方法，其特征在于，利用權利要求1所述基因OsCKX4的核苷酸序列作為設計探針引物的保守區段，調取其序列的引物序列見SEQ IDNO.5和SEQ ID NO.6，對水稻cDNA樣品進行Real-time PCR，然后檢測該基因在莖、葉、根中的表達；樣品為水稻的RNA 經過逆轉錄后所得cDNA；其步驟如下：提取水稻不同器官的總RNA；利用反轉錄試劑盒將總RNA反轉錄成cDNA ，利用引物SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6，進行定量PCR檢測。

5. 一種檢測水稻在干旱、高鹽脅迫以及植物激素處理后，基因OsCKX4表達含量變化的方法，其特征在于，具體步驟為：將水稻進行低溫、干旱、高鹽脅迫以及植物激素處理后，提取水稻的總RNA；利用反轉錄試劑盒將總RNA反轉錄成cDNA ，利用引物SEQ ID NO.5和SEQID NO.6，進行定量PCR檢測。

6. 一種檢測水稻OsCKX4 tilling突變體的方法，其特征在于，具體步驟為：提取OsCKX4 tilling突變體和野生型對照組水稻的總DNA；利用引物SEQ ID NO.7和SEQ IDNO.8，進行PCR檢測。

7.如權利要求1所述的水稻基因OsCKX4在植物品種改良中的應用。

8.如權利要求7所述的應用，所述的植物品種改良包括改善水稻抗高鹽、干旱脅迫、激素脅迫的性能。