[發明專利]一套月季黑斑病菌生理小種的鑒別寄主體系及其鑒別方法

有效

• 申請號: 201711147465.X
• 申請日: 2017-11-17
• 公開（公告）號: CN107904280B
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發明（設計）人: 邱顯欽;陳敏;張顥;晏慧君;唐開學;王其剛;蹇洪英;李淑斌;周寧寧;張婷
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院花卉研究所
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18
• 代理公司: 云南凌云律師事務所 53207
• 代理人: 康珉

1.一種月季黑斑病菌生理小種的鑒別方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)月季寄主材料的準備

以9份活體薔薇屬植物材料為月季黑斑病菌生理小種鑒別的寄主材料，并采集每一份寄主材料枝條從其頂端向下第3～4層的完全展開的含有5片或7片葉的無病蟲害的完全葉，經解剖鏡鏡檢，無真菌菌落或菌絲后，用70％v/v乙醇處理1～2min，然后用無菌水清洗3～4次，用無菌的濾紙吸干完全葉表面水分，然后將完全葉葉面朝上平鋪在盛有營養基質的培養皿中，每一份寄主材料的完全葉放置在一個培養皿內；9份活體薔薇屬植物材料是：木香花、玫瑰、川滇薔薇、大葉薔薇、七姊妹、金粉蓮、軟香紅、云玫和浴火鳳凰；

(2)接種待鑒別的月季黑斑病菌

采用噴霧法將待鑒別的黑斑病菌孢子懸浮液分別接種到步驟(1)中所述每一個培養皿內的葉片上，保證肉眼可見每片葉葉面被待鑒別的月季黑斑病菌孢子懸浮液覆蓋，接種完成后，將培養皿在室內光強1800～2600lx、光周期為10～16h光期、14～8h暗期，空氣相對濕度75～95％、室溫18～28℃的條件下培養7～14d；

(3)月季寄主材料的病情觀測和統計

接種葉片病情劃分為2個等級：0級：抗病，用0表示，所述0級是葉片無病斑或葉片發病面積葉面面積的20％；1級：感病，用1表示，所述1級是葉片發病面積≥葉面面積的20％；

(4)月季黑斑病菌生理小種的鑒別

將步驟(3)的統計結果與表1月季黑斑病菌生理小種類型對照表進行比對：

當表1中9份鑒別寄主材料均表現為抗病時，則該待鑒別的月季黑斑病菌為A型月季黑斑病菌生理小種；

當表1中的七姊妹1份鑒別寄主材料為感病，而表1中其余8份鑒別寄主材料均為抗病時，則該待鑒別的月季黑斑病菌為B型月季黑斑病菌生理小種；

當表1中的七姊妹和軟香紅2份鑒別寄主材料均為感病，而表1中其余7份鑒別寄主材料均為抗病時，則該待鑒別的月季黑斑病菌為C型月季黑斑病菌生理小種；

當表1中的七姊妹、軟香紅和浴火鳳凰3份鑒別寄主材料均為感病，而表1中其余6份鑒別寄主材料均為抗病時，則該待鑒別的月季黑斑病菌為D型月季黑斑病菌生理小種；

當表1中的七姊妹、軟香紅、浴火鳳凰和大葉薔薇4份鑒別寄主材料均為感病，而表1中其余5份鑒別寄主材料均為抗病時，則該待鑒別的月季黑斑病菌為E型月季黑斑病菌生理小種；

當表1中的七姊妹、軟香紅、浴火鳳凰、大葉薔薇和云玫5份鑒別寄主材料均為感病，而表1中其余4份鑒別寄主材料均為抗病時，則該待鑒別的月季黑斑病菌為F型月季黑斑病菌生理小種：

當表1中的木香花、玫瑰和川滇薔薇3份鑒別寄主材料均為抗病，而表1中其余6份鑒別寄主材料均為感病時，則該待鑒別的月季黑斑病菌為G型月季黑斑病菌生理小種；

當表1中的木香花和玫瑰2份鑒別寄主材料均為抗病，而表1中其余7份鑒別寄主材料均為感病，則該待鑒別的月季黑斑病菌為H型月季黑斑病菌生理小種；

當表1中的木香花1份鑒別寄主材料為抗病，而表1中其余8份鑒別寄主材料均為感病時，則該待鑒別的月季黑斑病菌為I型月季黑斑病菌生理小種；

表1 月季黑斑病菌生理小種類型對照表

表1中0：抗病；1：感病。

2.按照權利要求1所述的月季黑斑病菌生理小種的鑒別方法，其特征在于，步驟(1)中所述營養基質為：MS+苯并咪唑0.4g/L+瓊脂8.0g/L。