[發(fā)明專利]一種改性修飾多壁碳納米管分散固相萃取/UPLC-MS測定EGCG棕櫚酸酯的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711144816.1
• 申請日: 2017-11-17
• 公開（公告）號: CN107957455B
• 公開（公告）日: 2020-03-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周杏琴;陳志華;欽曉峰;徐希杰;毛師師
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01R33/14;C01B32/168
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務(wù)所(普通合伙) 32104
• 代理人: 時旭丹;張仕婷

本發(fā)明涉及一種改性修飾多壁碳納米管分散固相萃取/UPLC?MS測定EGCG棕櫚酸酯的方法，屬于茶多酚的EGCG分析技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明將Fe₃O₄納米粒子鍵合SiO₂并進行苯乙基?C₈修飾多壁碳納米管，修飾后的多壁碳納米管對疏水性能不同的化合物具有高度的選擇性。聯(lián)合UPLC?MS同時檢測了茶葉中EGCG棕櫚酸酯palmitate及多種EGCG活性成分，方法操作簡單、快速、準確、成本低。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種改性修飾多壁碳納米管分散固相萃取/UPLC-MS測定EGCG棕櫚酸酯的方法，屬于茶多酚的EGCG分析技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

茶多酚(tea polyphenols，TP )由多種酚類物質(zhì)組成，具有豐富的酚羥基，因其結(jié)構(gòu)的特殊性而具有多種生物活性。茶多酚除了抗氧化作用外，在抗衰老、抗炎癥、抗病毒、預(yù)防心血管疾病等方面具有多種保健功能，因而在醫(yī)療、食品、保健等方面具有廣泛的應(yīng)用前景。

茶多酚組成極為復(fù)雜，因分子量及其結(jié)構(gòu)差異而具有不同的生物活性。其中最為核心的成分是兒茶素 (黃烷醇類物質(zhì))，主要包括8種兒茶素類活性成分：兒茶素(catechin，C)、表兒茶素(epicatechin，EC) 、沒食子兒茶素(gallocatechin，GC)、表沒食子兒茶素 (epigallocatechin，EGC)、兒茶素沒食子酸酯(catechin gallate，CG )、表兒茶素沒食子酸酯(epicatechin gallate，ECG)、沒食子兒茶素沒食子酸酯(gallocatechingallate，GCG)及表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin gallate，EGCG)。其中EGCG 含量最高，占兒茶素總量的50％～80％。8種兒茶素類活性成分的分子結(jié)構(gòu)式及EGCG-p如圖1所示。

由于茶多酚的高水溶性，影響了其在生物體內(nèi)的利用率。有研究顯示取代后的EGCG棕櫚酸酯(EGCG-p)具有更強的抗氧化性。研究人員將茶多酚中的主要成分EGCG通過與棕櫚酸氯酯化反應(yīng)制備成脂溶性的EGCG-p。

茶多酚含量的檢測基本上采用理化分析法、光譜分析法、電化學(xué)方法、流動注射化學(xué)發(fā)光法等，測定的是總酚的含量。對于開發(fā)藥用級和保健功能的茶多酚，活性成分及異構(gòu)體的分離檢測對茶多酚的功能和應(yīng)用極為重要。有用HPLC分析幾種多酚的報道，最近有文獻報道了C18核殼粒子填充毛細管柱采用納米液相色譜法，同時分離分析了幾種多酚和甲基黃嘌呤。人們關(guān)注的重點是兒茶素類多酚物質(zhì)的分析分離，而對于茶多酚里是否含有高活性的EGCG-p以及EGCG-p的提取分析還未有報道。

碳納米管(CNTs)是由碳六元環(huán)構(gòu)成的類石墨平面卷曲而成的納米級中空管，具有比表面積大、耐酸堿耐熱性好等獨特的物理化學(xué)性質(zhì)，比C18具有更大的比表面積和更強的吸附能力。然而，CNTs 表面含有豐富的π電子，存在疏水性較強，易團聚的缺陷。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種改性修飾多壁碳納米管分散固相萃取/UPLC-MS測定EGCG棕櫚酸酯的方法，用于茶多酚里是否含有高活性的EGCG-p以及EGCG-p的提取分析。

本發(fā)明的技術(shù)方案：一種改性修飾多壁碳納米管分散固相萃取/UPLC-MS測定EGCG棕櫚酸酯的方法，步驟為：

一、磁性碳納米管制備

（1.1）多壁碳納米管酸化

取1g外徑為10～20nm，純度97％的多壁碳納米管MWNTs，放入80mL濃硝酸中，60℃回流3.5h；冷卻至室溫，過濾，用去離子水洗滌至濾液呈中性，于60℃烘干過夜，得到酸化多壁碳納米管AMWNTs，干燥器中保存；

（1.2）改性磁性納米粒子的制備