[發明專利]一種皺皮木瓜籽多糖及其制備方法

在審

• 申請號: 201711141382.X
• 申請日: 2017-11-17
• 公開（公告）號: CN107903328A
• 公開（公告）日: 2018-04-13
• 發明（設計）人: 黃立新;鄧葉俊;張彩虹
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院林產化學工業研究所
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及多糖類技術領域。

背景技術

皺皮木瓜是薔薇科木瓜屬多年生落葉灌木或小喬木，在國內南北各地均有廣泛栽培，是一種重要的經濟樹種。皺皮木瓜的果實營養豐富、氣味芳香含有豐富的糖類、皂苷、有機酸、黃酮、維生素等，具有護肝、抗氧化、抑菌、抗腫瘤、降血脂等特殊療效。據本草綱目記載，木瓜具有舒經絡、健脾胃、益精血的藥理作用，臨床上用于治療吐瀉腹痛、風濕關節痛、腰膝酸痛等疾病。皺皮木瓜一般被加工用作瓜脯、飲片、木瓜酒或木瓜醋，具有很好的經濟價值。皮木瓜籽為皺皮木瓜的加工副產物，可用于壓榨木瓜籽油。皺皮木瓜籽粕為木瓜籽壓榨完后的主要剩余物，大量的木瓜籽粕被丟棄，不僅對環境造成不良影響，且資源也沒有得到充分利用。

多糖是單糖通過糖苷鍵鏈接而成的大分子高聚物，且廣泛存在于植物、微生物、藻類和動物體中。多糖在細胞與細胞之間的信息交流、細胞吸附、以及免疫系統分子識別方面扮演著及其重要的作用，因此也越來越引起研究人員的重視。近年來，從自然資源提取得到的一些多糖引起生物化學和藥理學領域的重大關注。研究表明多糖具有抗氧化、抗腫瘤、降血脂、抗衰老、抗病毒、抗潰瘍等多種生理活性。其中，多糖在輔助治療癌癥中，具有安全性高、毒副作用小，以及抑制腫瘤效果好等優點。因此，多糖的提取具有廣闊的市場和應用前景。

現有的技術公開了多種多糖的提取方法，如公開號為CN105820262A和CN103113489A的中國專利中采用酶法提取多糖，前者采用了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶提取苦瓜多糖，后者采用生物生物復合酶法提取新疆駿棗多糖，酶法提取多糖雖然條件溫和，但該法操作復雜、酶制劑價格高且酶經滅活后作為雜質會影響多糖的純度。公開號為CN106589158A的中國專利中,采用超臨界的方法提取山芝麻多糖，該方法雖操作簡便，但設備成本過高難以實現產業化。公開號為CN103044559A的中國專利中,采用熱水浸提法提取紅棗多糖，提取溫度高達120℃，提取時間長達5h，此提取方法中的高溫環境容易破壞多糖的結構，且生產周期長。公開號為CN103755829A的中國專利中,采用內部沸騰減壓法提取壺瓶棗多糖，該方法需提供負壓條件，對設備要求高。

皺皮木瓜籽總糖含量豐富，但是關于皺皮木瓜籽多糖的制備方法尚未見到相關報道。

發明內容

本發明的目的在于充分利用皺皮木瓜籽粕的剩余經濟價值，提供一種皺皮木瓜籽多糖的提取方法。

為實現上述目的，本發明采用如下步驟：

(1)提取

將經壓榨后的木瓜籽粕干燥、粉碎、脫脂；脫脂后的籽粕蒸餾水提取，濃縮，加入無水乙醇沉淀，干燥后得木瓜籽粗多糖；

(2)分離和純化

a、除蛋白；

b、進一步分離純化，得純度較高木瓜籽多糖；

b進一步分離純化，包括：

1)、透析：將脫蛋白后的木瓜籽粗多糖溶液放入透析袋中，分別用自來水、蒸餾水透析，透析后的袋內溶液經冷凍干燥得到木瓜籽二級粗多糖；

2)、離子交換柱層析：采用DEAE-cellulose 52纖維素柱層析對木瓜籽二級粗多糖進行分離純化，經收集、減壓濃縮、透析和冷凍干燥，得到木瓜籽精制多糖；

3)、凝膠柱層析：使用葡萄糖凝膠Sephadex G-100對木瓜籽精制多糖進行純化，洗脫、收集、濃縮、透析、冷凍干燥，得到組分單一的木瓜籽多糖。

步驟(1)提取為：將經壓榨后的木瓜籽粕干燥、粉碎，按一定質量比1:10~1:20（g:ml），加入石油醚，于40~60 ℃下加熱回流提取1~2次，每次提取8~16小時，過濾得濾渣，濾渣經真空干燥脫除，得脫脂木瓜籽粕粉；取脫脂木瓜籽粕粉，按一定質量比1:10~1:40（g:ml），加入蒸餾水，于25~85 ℃下攪拌或超聲波輔助提取或微波輔助提取1~3次，每次20min~4h，離心并合并上清液，上清液于40~80℃下減壓濃縮;按照體積比為1:4(多糖濃縮液:無水乙醇)向脫蛋白后的多糖濃縮液中加入無水乙醇，4℃過夜醇沉，離心收集沉淀，并反復向沉淀物加入無水乙醇及丙酮洗滌；洗滌后的沉淀經旋轉蒸發完全脫除有機溶劑，再加入蒸餾水復溶，復溶溶液冷凍干燥后得到木瓜籽粗多糖。

步驟(2)中分離和純化：