[發明專利]一種同位素原位標記土壤甲烷氧化菌的方法及裝置

有效

• 申請號: 201711138428.2
• 申請日: 2017-11-16
• 公開（公告）號: CN107942036B
• 公開（公告）日: 2021-03-12
• 發明（設計）人: 高丹丹;侯海軍;劉毅;張文釗;魏文學
• 申請（專利權）人: 中國科學院亞熱帶農業生態研究所
• 主分類號: G01N33/24
• 分類號: G01N33/24;A01G22/22;A01G7/06
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 王敏鋒

1.一種同位素原位標記土壤甲烷氧化菌的方法，其步驟是：

1）將硅膠管裝置分別埋入根際和非根際土壤中，土層高于硅膠管頂部，稱取土壤樣品，裝入培養盆中，盆中設置兩個尼龍網根袋，直徑7－9厘米的尼龍網根袋中放入三根硅膠管裝置，直徑5－7厘米的尼龍網根袋中放入一根硅膠管裝置，尼龍網根袋中及培養盆中分別裝入土壤；

2）在培養盆中加入去離子水，保持淹水狀態，2－4厘米水層，沿培養盆的側壁加入去離子水，使土壤上方持續保持2－4厘米的水層；

3）淹水一周后，移栽水稻幼苗，幼苗苗齡18－22天，移栽時選擇陰天，或者在溫室大棚的頂部鋪上遮陽網，以減少幼苗的水分蒸發，將幼苗置于水盆中，洗掉幼苗根部的土壤，選取5株長勢相同的幼苗，移栽到7－9厘米的尼龍網根袋中；

水稻苗齡45天時開始標記13C-甲烷氣體；標記時在硅膠管裝置上的三通閥上連接2個5ml注射器，其中1個是空的，另1個已吸取了3ml 13C-CH4，將三通閥的開口旋轉至空的注射器，從硅膠管內吸取3ml氣體，然后將三通閥的開口旋至有13C-CH4的注射器，讓甲烷氣體自然吸入至硅膠管，然后每8個小時按此步驟注射一次，共標記6天。

2.權利要求1所述的一種同位素原位標記土壤甲烷氧化菌的裝置，它包括硅膠管（1）、硅膠塞（2）、不銹鋼長針頭（3）、植物（5）、尼龍網袋（6）、培養盆（7），其特征在于：硅膠塞（2）與硅膠管（1）相連，硅膠管（1）與不銹鋼長針頭（3）相連組成硅膠管裝置，培養盆（7）與兩個尼龍網袋（6）相連，其中一個尼龍網袋中與三根硅膠管裝置和植物（5）相連，另一個尼龍網袋與一根硅膠管裝置相連。

3.根據權利要求2所述的一種同位素原位標記土壤甲烷氧化菌的裝置，所述的在培養盆（7）任意內裝有硅膠管（1）、硅膠塞（2）、不銹鋼長針頭（3）、三通閥（4）、植物（5）、尼龍網袋（6），硅膠管（1）兩端用硅膠塞塞緊，并在兩端的外部涂一層704膠，將不銹鋼長針頭（3）插入其中一端硅膠塞中，不銹鋼針頭（3）尺寸為1.6mm×1.32mm，針頭外露長度100mm，針頭總長度116mm。

4.根據權利要求2所述的一種同位素原位標記土壤甲烷氧化菌的裝置，所述的在不銹鋼長針頭（3）的頂端裝有三通閥（4），在不銹鋼長針頭（3）與三通閥（4）的接觸區域涂抹704膠。

5.根據權利要求2所述的一種同位素原位標記土壤甲烷氧化菌的裝置，所述的硅膠管（1）透氣不透水，尺寸為14mm×12mm×120mm。