[發(fā)明專利]利用紅和遠紅熒光染料在細胞級表征生物組織

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711135770.7
• 申請日: 2013-05-17
• 公開（公告）號: CN108095687A
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 繆麗爾·阿巴西;奧迪勒·卡西拉吉;科琳娜·拉普拉斯-比埃
• 申請（專利權(quán)）人: 古斯塔夫·魯西IGR研究所;冒納凱阿技術(shù)公司
• 主分類號: A61B5/00
• 分類號: A61B5/00;G01N21/64
• 代理公司: 上海專利商標事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 陸嘉

在至少一個方面，本文公開的實施例涉及觀察生物組織形態(tài)的方法，其包括：在所述生物組織上使用熒光染料，其中所述熒光染料選自專利藍V、異硫藍、甲苯胺藍、金絲桃素、吲哚氰綠、MVAC、或亞德里亞霉素；使用顯微線性或非線性成像系統(tǒng)來形成所述生物組織的圖像，其中所述染料的熒光在細胞級揭示了所述組織的形態(tài)。

相關(guān)申請的交互參考

本申請是2014年11月17日進入中國國家階段、申請?zhí)枮?01380025844.5、發(fā)明名稱為“利用紅和遠紅熒光染料在細胞級表征生物組織”的發(fā)明專利申請的分案申請。

背景技術(shù)

口腔癌(包括嘴唇、舌部、咽喉和口腔)在所有的癌癥形式中排列第12位。盡管原發(fā)惡性腫瘤當(dāng)前在治療上有所進展，但由于其確診時通常已是晚期，因而仍然是一種預(yù)后不佳的癌癥。白光檢查和觸診通常用于定位活體檢視部位。在進行了放射性膠體和藍色染料的間質(zhì)注射后，術(shù)中淋巴造影已被確認和廣泛接受為常規(guī)的手術(shù)程序，其主要用于乳腺癌、皮膚黑色素瘤以及較小范圍的頭頸癌。

已引入光學(xué)診斷方法來改善對癌癥前期及癌性損害與正常組織之間的鑒別，以及用來檢測前哨淋巴結(jié)(Rasmussen J.C.et al.,Lymphatic imaging in humans withnear-infrared fluorescence,Curr Opin Biotechno 2009；20:74-822009，以及Varghese P.et al.,Methylene Blue Dye-A Safe and Effective Alternative forSentinel Lymph Node Localization,The Breast J 2008；14:61-7)。已利用來自內(nèi)源性和外源性誘導(dǎo)熒光團的宏觀(或稱可目視)熒光成像，或利用諸如喇曼光譜學(xué)、熒光光譜學(xué)和彈性散射光譜學(xué)等的分光鏡分析法進行臨床研究。共焦顯微術(shù)長時間局限于基礎(chǔ)研究，但是近年來已用于可疑組織細胞級的體內(nèi)成像(Kiesslich R.et al.,Confocal laserendoscopy for diagnosing intraepithelial neoplasias and colorectal cancer invivo,Gastroenterology 2004；127:706-13)。為了滿足對高分辨率成像的需要，過去幾年已廣泛使用基于探頭的共焦激光顯微內(nèi)鏡(pCLE)。這樣的非侵入式方案被稱為“光學(xué)活體檢視”，其使得利用熒光染料來評定和監(jiān)視各種器官中的癌癥及其他疾病成為可能。

金絲桃素，一種羥基化二苯基二萘嵌苯喹啉(phenantroperylenequinone)，已被考慮用來進行熒光診斷。已評價了這種染料在異常細胞特別是癌性細胞中較高的上染率對于提高膀胱癌檢出率(D'Hallewin M-A.et al.,Hypericin-based fluorescencediagnosis of bladder carcinoma,BJU International 2002；89:760-3)和惡性口腔損害檢出率(Thong P.S.P.et al.,Clinical application of fluorescence endoscopicimaging using hypericin for the diagnosis of human oral cavity lesions,Br JCancer 2009；101:1580-4)的可能性。在后來的研究中，診斷標準是基于紅藍強度比，在非惡性損害中的紅藍強度比大于惡性損害中的紅藍強度比。

甲苯胺藍，一種來自噻嗪族的公知異染性染料，現(xiàn)已研究了其在口腔寬場檢查中的可能性，通過某種局部施用對惡性和惡變前的損害進行染色：根據(jù)愛潑斯坦(Epstein)所述，利用這種處理方法，具有較高風(fēng)險發(fā)展成癌癥的惡變前損害會被優(yōu)先著色。利用這種活體染料進行宏觀檢查時，主要的假陽性結(jié)果通常與炎癥或創(chuàng)傷區(qū)域有關(guān)。因此，為了消除這些因素，強烈推薦在兩星期后進行復(fù)查(Epstein J.B.et al.,2009)。一種現(xiàn)有的元分析法被用來評價甲苯胺藍在口腔癌篩查中的有效性。結(jié)果表明，在高風(fēng)險人群中，該方案的靈敏度范圍在93.5％至97.5％之間，特異性范圍在73.3％至92.9％之間。