[發明專利]冷凍保護試劑，冷凍保護和冷凍保存的組合物，其用途，和冷凍保存方法

有效

• 申請號: 201711133145.9
• 申請日: 2013-11-29
• 公開（公告）號: CN108112575B
• 公開（公告）日: 2021-09-10
• 發明（設計）人: H·B·安德里森;L·克里斯藤森;K·諾德耶爾德;J·斯凱特;C·克勞森;B·霍斯特
• 申請（專利權）人: 法瑪科思莫斯控股有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 邵華一

1.冷凍保護試劑在冷凍保存樣品中的用途，其中所述樣品選自器官，細胞和組織且所述細胞是哺乳動物細胞，所述冷凍保護試劑包括一種或多種的冷凍保護劑，所述冷凍保護劑選自具有850至1150Da的重量平均分子量(M_W)的異麥芽糖寡糖和具有850至1150Da的重量平均分子量(M_W)的氫化的異麥芽糖寡糖，其中所述試劑不含或基本上不含DMSO，所述基本上不含DMSO意味著DMSO含量少于0.01w/w％。

2.根據權利要求1的用途，其中所述冷凍保護劑具有≥1和≤5的多分散性。

3.根據權利要求1或2的用途，其中所述冷凍保護劑是具有850至1150Da的重量平均分子量(M_W)的異麥芽糖寡糖。

4.根據權利要求1或2的用途，其中所述冷凍保護劑是具有850至1150Da的重量平均分子量(M_W)的氫化的異麥芽糖寡糖。

5.根據權利要求1或2的用途，其中有少于3個葡萄糖單元的異麥芽糖寡糖的重量分數少于15％w/w。

6.根據權利要求1或2的用途，其中有多于9個葡萄糖單元的異麥芽糖寡糖的重量分數少于20％w/w。

7.根據權利要求1或2的用途，其中所述異麥芽糖寡糖是基于葡聚糖的。

8.根據權利要求1或2的用途，其中所述試劑為粉末的形式或為溶液的形式。

9.根據權利要求1或2的用途，其中所述試劑包括從30％到70％w/w的所述冷凍保護劑。

10.根據權利要求1或2的用途，其中所述試劑包括至少一種額外的冷凍保護劑，所述額外的冷凍保護劑選自乙酰胺，瓊脂，海藻酸鹽或酯，1-苯胺，白蛋白，醋酸銨，丁二醇，硫酸軟骨素，氯仿，膽堿，二甘醇，二甲基乙酰胺，二甲基甲酰胺，赤蘚糖醇，乙醇，乙二醇，甲酰胺，葡萄糖，甘油，a-甘油磷酸鹽或酯，單乙酸甘油，甘氨酸，羥乙基淀粉，肌醇，乳糖，氯化鎂，硫酸鎂，麥芽糖，甘露醇，甘露糖，甲醇，甲基乙酰胺，甲基甲酰胺，甲基脲，苯酚，普流尼克多元醇，聚乙二醇，聚乙烯吡咯烷酮，脯氨酸，丙二醇，吡啶N-氧化物，核糖，絲氨酸，溴化鈉，氯化鈉，碘化鈉，硝酸鈉，硫酸鈉，山梨糖醇，蔗糖，海藻糖，三甘醇，乙酸三甲基胺，脲，纈氨酸和木糖。

11.根據權利要求1或2的用途，其中所述樣品選自間充質干細胞和造血干細胞。

12.根據權利要求11的用途，其中所述造血干細胞是外周血來源的造血干細胞。

13.根據權利要求12的用途，其中所述外周血來源的造血干細胞是CD34陽性血干細胞。

14.包括如權利要求1-13中的任何一項中定義的冷凍保護試劑的冷凍保存組合物，所述冷凍保存組合物進一步包括將被冷凍保存的樣品，所述樣品是如權利要求1-13中任何一項所定義的。

15.根據權利要求14的冷凍保存組合物，包括1至50％w/w的量的所述冷凍保護劑。

16.根據權利要求14或15的冷凍保存組合物，其中所述組合物基本上不含DMSO，所述基本上不含DMSO意味著DMSO含量少于0.01w/w％。

17.根據權利要求14或15的冷凍保存組合物，其中所述組合物不含DMSO。

18.冷凍保存樣品的方法，包括如下步驟：使將被冷凍保存的樣品與在權利要求1-13中任何一項中定義的冷凍保護試劑接觸，從而獲得如權利要求14-17中任何一項的冷凍保存組合物，和隨后降低冷凍保存組合物的溫度至冷凍保存溫度，其中所述樣品是如權利要求1-13中任何一項所定義的。